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Se busca estudiante avanzado de biología/biotecnolología para realizar tesis de licenciatura “ESTUDIO DE LAS INTERACCIONES HÉTERO Y HOMODIMÉRICAS DE LOS DOMINIOS TRANSMEMBRANA DE LA GLICOPROTEÍNA DE MEMBRANA NEURONAL M6A” Director: Dra. Camila Scorticati Lugar de Trabajo: Laboratorio de Neurobiología. Instituto de Investigaciones Biotecnológicas (IIB-INTECH-CONICET-UNSAM). Av Gral Paz 5445 INTI (Ed 24). Buenos Aires. Argentina. http://www.iib.unsam.edu.ar Tel: +54 1145807255 int 315 Enviar cv a cscorticati@iib.unsam.edu.ar o cscorticati@yahoo.com.ar Resumen Trabajos previos del laboratorio demostraron la reducción en la cantidad de ARNm que codifica a una glicoproteína de superficie de neuronas denominada M6a en el hipocampo de animales (ratones y musarañas) sometidos a estrés crónico. En estudios posteriores se determinó que M6a es requerida para la formación de espinas/filopodios en cultivos primarios de neuronas del hipocampo de rata y que su sobreexpresión favorece el crecimiento de neuritas. Estos estudios permitieron concluir que M6a podría estar involucrada en la alteración de la plasticidad neuronal observada en el estrés crónico. M6a es una proteína con cuatro dominios transmembrana, dos "loops' extracelulares y las extensiones N- y C- terminales hacia el citoplasma celular. Hasta la fecha se desconoce la existencia de ligandos específicos para M6a, así como la vía por la cual lleva a cabo sus funciones celulares. Una posibilidad es que las regiones transmembrana posibiliten su localización en microdominios de la membrana plasmática mediante interacciones proteína-proteína o/y proteínalípido. Durante este proyecto se analizará la posible interacción entre los cuatro diferentes dominios transmembrana de la proteína M6a. Para ello se utilizarán los sistemas in vitro TOXCAT y GALLEX que ponen en evidencian asociaciones homo y heterodiméricas, respectivamente. Estudiaremos la presencia de multímeros de M6a en membrana plasmática por ensayos de "crosslinking" en distintas líneas celulares. Además se analizará la posibilidad de la localización de M6a en microdominios del tipo de "lipid rafts" de la membrana utilizando diferentes métodos que posibilitan su ruptura conjuntamente con la sobreexpresión de M6a en distintas líneas celulares. Finalmente por mutagénesis dirigida se determinará los aminoácidos relevantes para dicha interacción. Asimismo, se estudiará la importancia de la interacción/localización en la membrana en la estimulación de la formación de neuritas/espinas/filopodios mediadas por M6a El plan propuesto intenta comprender las interacciones y la localización de M6a en la membrana plasmática neuronal y en esta forma profundizar sobre los mecanismos moleculares que se disparan en el estrés crónico.
