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[1ºESO]
Eficacia de distintos colutorios
comerciales sobre las bacterias bucales
Javier Rojas Carrillo, Ignacio Ballesteros
Ruíz, Javier Ramírez Bueno y
Carlos Vilches Aguilera
Colegio de San Francisco de Paula (Sevilla)
5 de abril de 2011
Índice
1. Objetivo
pág. 2
2. Fundamento teórico
pág. 2
2.1. ¿Qué es la caries?
pág. 2
2.2. Estructura celular bacteriana
pág. 2
3. Variables
pág. 3
4. Materiales
pág. 3
5. Procedimiento
pág. 3
6. Resultados
pág. 6
7. Referencias
pág. 11
1
1. Objetivo
Identificar qué colutorio es más eficaz contra las bacterias bucales.
2. Fundamento teórico
Las bacterias patógenas son aquellas que producen enfermedades, como la caries, el ántrax e
incluso a veces pueden causar cánceres.
A su vez existen las bacterias beneficiosas. Habitan en los intestinos y son conocidas como
flora intestinal que nos ayudan a digerir los alimentos, así como aportarnos vitaminas. Se
encuentran principalmente los lactobacilos y las bifidobacterias en los productos lácteo, como la
leche, yogurt o queso (1).
Para que las bacterias patógenas no invadan nuestra boca y no nos produzcan caries, hay
que:
-Cepillarse los dientes bien después de cada comida.
-Comer frutas, verduras y lácteos.
-Comer sano.
2.1. ¿Qué es la caries?
La caries es la “destrucción progresiva de los dientes y la desmineralización de estos.
Progresa siempre del exterior hacia el interior del diente. Empieza con la destrucción del esmalte,
esta fase aún no es dolorosa. Si sigue progresando destruirá otras capas del diente y empezará a ser
doloroso ante el contacto con el calor, el frío y el azúcar. Si no se trata, la caries continua
evolucionando, producirá dolores fuertes y espontáneos y la destrucción del diente” (2).
Para eliminar las bacterias patógenas, es importante conocer su estructura, ya que el efecto
de las sustancias bactericidas, como los antibióticos, depende del tipo de bacteria. Las bacterias son
microorganismos procariotas con una estructura bien diferenciada, y distinguiéndose dos tipos en
función de la misma (3):
Las bacterias pueden clasificarse en dos grupos según su estructura celular:
Gram +: Son bacterias provistas de una pared con un grueso esqueleto de glucopeptídico.
Gram -: Son bacterias con un esqueleto glucopeptídico delgado.
2.2. Estructura celular bacteriana
La estructura bacteriana típica es la de un organismo procariota que se reproduce por fisión
binaria y donde se distinguen las siguientes partes (4):
Figura 1. Estructura bacteriana (http://www.lourdesluengo.es/biologia/microbio.html).
2
-Cápsula: Es una cubierta externa mucilaginosa compuesta por agua y polisacáridos. No es
vital para la célula pero le confiere resistencia y aumenta la virulencia de las bacterias patógenas.
-Pared: Cubierta rígida que rodea la membrana plasmática de todas las bacterias excepto los
micoplasmas. Les confiere su forma.
-Membrana plasmática: Una doble capa de lípidos. Aseguran la permeabilidad.
-El citoplasma: Es una matriz acuosa, contiene gran cantidad de proteínas y sustancias de
reserva.
- ADN: Es el material genético de la célula que contiene la información de todos los genes
de la misma.
3. Variables
-Independiente: El tipo de colutorio. Se utilizarán tres colutorios comerciales que pueden adquirirse
fácilmente.
-Dependiente: El crecimiento de las bacterias, midiendo con una regla el diámetro de la colonia en
la placa de Petri.
-Controladas: La fuente de saliva, la temperatura de la estufa de cultivo, el medio de cultivo y el
tiempo de cultivo.
4. Materiales
Licor del Polo® (colutorio 1)
Listerine® (colutorio 2)
Protección Total® (colutorio 3)
Estufa a 30ºC
Cuatro vasos de precipitados
Servilletas
Agua
Mechero bunsen
Veinte placas de Petri con medio LB agar
Bastoncillos de oídos
Alcohol de 96º
Rotulador negro
Regla
Preparación placas LB agar:
1. Mezclar 10 g NaCl, 5 g extracto levadura, 10 g peptona, 15 g de agar-agar y 1000 mL de
agua.
2. Esterilizar en olla a presión durante 15 min.
3. Dejar enfriar y verter sobre placas de Petri estériles.
5. Procedimiento
1.- Desinfectar la mesa de trabajo con alcohol de 96º.
2.- Encender el mechero bunsen para que las bacterias no contaminen el medio de cultivo de nuestra
placa de Petri (Imagen 1).
3
Imagen 1. Mesa y material esterilizado
3.- Añadir nuestra saliva en uno de los vasos, junto al mechero para que solo las bacterias de la boca
entren en el vaso.
4.- Mojamos la torunda de un bastoncillo en la saliva, y luego, tocamos el centro de la placa de Petri
con dicho bastoncillo, depositando de esta forma las bacterias contenidas en la muestra a estudiar
(Imagen 2).
Imagen 2. Siembre de placa de Petri con saliva
5.- Cerramos la placa y la rotulamos como “control” y la fecha (Imagen 3).
4
Imagen 3. Rotulado de las placas con saliva.
6.- Esta misma operación la repetimos en cinco placas de Petri.
7.- Llenamos otro vaso con Listerine® y cogemos otro bastoncillo. Lo mojamos en la saliva, y
luego tocamos el vaso con Listerine® y dejamos las bacterias con el colutorio en el centro de la
placa de Petri, la cerramos y le ponemos el nombre del colutorio y la fecha. Enjuagamos el vaso con
agua, lo secamos con servilletas y lo llenamos otra vez con Listerine®.
Imagen 4. Limpieza del colutorio.
8.- Repetimos lo anterior cinco veces con cada colutorio.
9.- Ahora, metemos las placas de Petri en la estufa, a 30 ºC, para que las bacterias puedan crecer
durante varios días.
10.- Al día siguiente, con una regla medimos el diámetro de las bacterias del control y de cada uno
de los colutorios. Anotamos en una tabla en milímetros durante los días 1, 4, 5, 6, 7 y también
5
anotamos nuestras observaciones.
11.- Finalmente, analizamos que colutorio es más efectivo y el porcentaje eliminado por cada uno
de los colutorios.
6. Resultados
Tabla 1. Tamaño de las colonias de bacterias a lo largo del tiempo
Tiempo de
CONTROL
LISTERINE® PROTECCIÓN
TOTAL®
cultivo/días
Longitud/mm
Longitud/mm
Longitud/mm
1
4
5
6
7
LICOR DEL POLO®
Longitud/mm
10
13
3
6
9
2
7
6
4
4
6
8
5
7
8
7
6
6
7
5
9
12
10
12
16
14
14
18
10
10
19
14
15
10
11
20
14
16
11
11
10
8
9
7
7
9
11
9
7
10
10
7
9
12
10
9
10
7
11
11
7
10
9
11
6
11
10
6
9
13
13
10
7
13
11
13
10
7
11
14
10
10
7
9
9
9
9
11
11
9
9
10
11
10
9
9
10
11
10
9
6
Imagen 5. Crecimiento colonias después de 1 día en estufa
Imagen 6. Crecimiento colonias después de 4 días en estufa
7
Imagen 7. Crecimiento colonias después de 5 días en estufa
Imagen 8. Crecimiento colonias después de 6 días en estufa
8
Tabla 2. Tamaño medio de las colonias de bacterias a lo largo del tiempo.
Tiempo/días
CONTROL
Longitud/mm
LISTERINE®
Longitud/mm
PROTECCIÓN
TOTAL®
Longitud/mm
LICOR DEL
POLO®
Longitud/mm
1
8,2
4,6
6,8
6,2
4
11,8
8,2
8,6
9,0
5
13,2
9,2
6
13,8
9,6
10,8
9,8
7
14,4
9,6
11,0
9,8
9,8
Gráfico 1. Crecimiento bacteriano en función del colutorio.
9
9,8
Tabla 3. Disminución del crecimiento bacteriano en función Porcentaje de colonia eliminado
Tiempo/días
LISTERINE®
PROTECCIÓN
TOTAL®
LICOR DEL
POLO®
1
44 %
17 %
24 %
4
31 %
27 %
24 %
5
30 %
26 %
26 %
6
30 %
22 %
29 %
7
33 %
24 %
32 %
Conclusiones
1) Todos los colutorios presentan efecto sobre el crecimiento de las bacterias bucales,
reduciendo de media un 30% el crecimiento bacteriano respecto al control sin colutorio tras
7 días de cultivo.
2) Los colutorios más efectivos son el nº 1 y 3, ya que provocan una disminución del
crecimiento bacteriano tras 7 días de cultivo por encima de la media.
3) El efecto del colutorio nº1 en las primeras 24 h de cultivo Listerine es el más efectivo, pues
elimina un 10% más de bacterias que los otros, lo que significa que tienen un nivel superior
de clorhexidina.
Debilidades y mejoras:
A continuación exponemos algunos aspectos que creemos deben ser tenidos en cuenta, de cara a
continuar esta investigación, y que han podido afectar a nuestros resultados.
• Algunas placas se contaminaron con otras bacterias, lo cual puedo haber afectado al
crecimiento de la nuestra.
• No hemos podido seguir el crecimiento de las bacterias durante los días 2 y 3, ya que se
correspondía con el fin de semana. Si se hubiera medido en estos días, podrían haberse
tenidos más datos que ayudaran a determinar de forma más precisa el crecimiento
bacteriano.
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Anexo: Componentes de cada colutorio
• Listerine®: eucaliptol, cloruro de zinc, timol, salicato de Metelo, mentol, agua, alcohol,
sorbitol, poloxamer 407, Benroic acid, sodium Benzotae, sucralose aroma, sodium
Saccharín, CI 42090.
• Protección Total®: agua, alcohol, sorbitol, Peg 40 hydrogenated castor oil, aroma, sodium
Saccharín, Celylpyridinium chloride, citric acid, CI 42090, CI 18965.
• Licor del Polo®: agua, alcohol, sorbitol, Peg 60 hydrogenated castor oil, aroma, Lauryl
glucoside, sodium Fluorite, chlorhexidine digluconate, sodium Saccharín, CI 42090, CI
18965.
7. Referencias
(1) VVAA. Gran Enciclopedia Planeta. Tomo 3. Editorial Planeta. Varios autores. Año 2008.
(2) VVAA. ¿Por qué enferman los dientes? Plan de Salud Bucodental del Ministerio de
Sanidad y Política Social.
Fecha de consulta: Marzo de 2011. Dirección web:
http://www.msps.es/campannas/campanas08/bucoDental/index.html
(3) TM. WASSENAAR Museo virtual bacteriano. Fecha de consulta: Marzo de 2011.
Dirección web: http://www.bacteriamuseum.org/cms/Pathogenic-Bacteria/pathogenicbacteria.html.
(4) BROCK Biología de los Microorganismos (10ª ED.) Madigan, Michael; Martinko, John
y Parker Jack. PEARSON EDUCACION. Año 2003.
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