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METODOS DE ESTUDIO DE LA CELULA PROFESOR JUAN FERNANDEZ 2011 DIAGRAMA DE UNA CELULA EUCARIOTICA Alberts et al., 2002 RELACIONES DE MAGNITUD ENTRE COMPONENTES VISIBLES, CELULARES Y ATOMOS Alberts et al., 2002 PODER DE RESOLUCION DEL OJO Y DE DIFERENTES MICROSCOPIOS Alberts et al, 2002 EL MICROSCOPIO OPTICO Alberts et al., 2003 FIBROBLASTO OBSERVADO CON DIFERENTES TIPOS DE MICROSCOPIA OPTICA MICROSCOPIO DE CAMPO CLARO MICROSCOPIO DIC O NOMARSKI Alberts el al., 2002 MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO CELULAS NERVIOSAS TEÑIDAS Maximow y Bloom, 1957 COMPORTAMIENTO DE LA LUZ EN OBJETOS DE AMPLITUD Y DE FASE Objeto de amplitud Alberts et al., 2002 Objeto de fase INTERFERENCIA ENTRE ONDAS LUMINOSAS Interacciones constructivas Alberts et al., 2002 Interacciones destructivas EFECTO DE INTERFERENCIA DE LUZ EN BORDES Disco de Airy “Point spread function” Alberts et al., 2002 RESOLUCION Y APERTURA NUMERICA Interfase condensador/objetivo Alberts et al., 2002 COMPONENTES DE UN PROCESADOR DE IMAGENES Sluder y Wolf, 1998 RESOLUCION ESPACIAL DE UNA CAMARA DE VIDEO Sluder y Wolf, 1998 IMAGEN DIGITAL MOSTRANDO PIXELES CON DISTINTOS VALORES DE GRIS Sluder y Wolf, 1998 DESCONVOLUCION DE UNA IMAGEN: CROMOSOMAS POLITENICOS Antes Alberts et al., 2002 Después MANEJO DIGITAL DEL CONTRASTE EN UN TROZO DE MUSCULO ESTRIADO Sluder y Wolf, 1998 PSEUDOCOLORACION (PURPURA) DE CANALES DE TRANSPORTE EN EL CITOPLASMA DEL ZIGOTO DEL PEZ CEBRA Fuentes and Fernández, 2010 MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA Alberts et al., 2002 FLUOROFOROS Y SUS ESPECTROS DE ABSORCION Y EMISION Alberts et al., 2002 DNA NUCLEAR TEÑIDO CON LA SONDA FLUORESCENTE DAPI. PRONÚCLEOS DEL ZIGOTO DEL PEZ CEBRA Fuentes y Fernández, 2010 INMUNOFLUORESCENCIA SIMPLE, DOBLE O TRIPLE Y AMPLIFICACION DE LA SEÑAL FLUORESCENTE Simple Triple Renshaw, 2007 Doble Amplificación MULTIFLUORESCENCIA DE UN HUSO MITOTICO CUYOS COMPONENTES SE HAN REVELADO POR INMUNOCITOQUIMICA AZUL: CROMOSOMAS ROJO: CENTROMEROS VERDE: MICROTUBULOS Alberts et al., 2002 DOBLE IMMUNOFLUORESCENCIA (MICROTUBULOS Y ACTINA) EN ZIGOTOS DE LA SANGUIJUELA Rojo: Actina VISTA ANIMAL Verde: Microtúbulos Amarillo y anaranjado: codistribución Proyección: sobreposición de imágenes en el eje Z Fernández et al., 2002 VISTA VEGETAL TRIPLE INMUNOFLUORESCENCIA EN EL TUBO NEURAL DE LA LARVA DEL PEZ CEBRA Azul = núcleos Verde = microtúbulos Rojo = Actina Amarillo = codistribución Azul = núcleos Rojo = β-catenina Verde = microtúbulos Amarillo/anaranjado = codistribución Capa matríz y manto Cavidad central, capa matríz y manto Manuscrito en preparación. Laboratorio Juan Fernández VISUALIZACION DE CALCIO LIBRE CON FURA2 EN UNA CELULA DE PURKINGE DEL CEREBELO ROJO. MUCHO CALCIO AMARILLO: MENOS CALCIO AZUL: MUCHO MENOS CALCIO Alberts et al., 2002 RECUPERACION DE LA FLUORESCENCIA DESPUES DE UN FOTO BLANQUEADO (FRAP) DE LA PROTEINA VERDE UNIDA A LA GLICOSIL TRANSFERASA EN LA ZONA DEL GOLGI Blanco Testigo Alberts et al., 2008 FOTOACTIVACION CON UNA LASER ULTRAVIOLETA (413 nm) DE UNA VARIANTE DE LA PROTEINA VERDE DE UNA CELULA EN CULTIVO Difusion de la señal Alberts et al., 2008 HIBRIDACIÓN in situ QUE MUESTRA LA DISTRIBUCIÓN DE DOS RNAm EN EL ZIGOTO (bicoide) Y BLASTULA (knirps) de DROSOPHILA RNAm de bicoide producido por un gen de coordinación P A RNAm de knirps producido por un gen gap P A Publicación en preparación. Laboratorio de J. Fernández HIBRIDACION IN SITU PARA LOCALIZAR DNA o RNA UTILIZANDO SONDAS FLUORESCENTES CADA CROMOSOMA HOMOLOGO TIENE UNA DOBLE HELICE Y POR LO TANTO DOS GENES DETECCION DEL RNAm DEL GEN DELTA C (LIGANDO) EN LOS SOMITOS DEL PEZ CEBRA Alberts et al., 2002 DETECCION DE 6 PARES DE GENES EN LOS CROMOSOMAS HOMOLOGOS No5 HUMANOS DETECCION DE SITIOS (GENES) DE TRANSCRIPCION DE RNAr (BRILLANTE) EN EL NUCLEOLO HIBRIDACION in situ PARA DETECTAR LA DISTRIBUCION DE CINCO RNA EN UN EMBRION DE DROSOPHILA Amarillo= wingless Azul= engrailed Rojo= short gastrulation Verde= defecto en los neuroblastos intermedios Púrpura= homeobox específico de músculo Alberts et al., 2002 INTRODUCCION DE SUSTANCIAS EN UNA CELULA MICROINYECCION ELECTRO SHOCK FUSION DE EMBRANAS BOMBARDEO CON ORO PERMEABILIZACION DETERGENTES Alberts et al., 2008 SISTEMA OPTICO PARA MICROSCOPIA DIC Sluder y Wolf, 1998 MICROFOTOGRAFIA AVEC-DIC DE UN CENTRO NUCLEADOR DE MICROTUBULOS Centrosoma y microtúbulos Sluder y Wolf, 1998 Estructura de los micotúbulos MANIPULACION DE OBJETOS MICROSCOPICOS (BOLITAS DE SILICIO RECUBIERTAS DE KINESINA) CON PINZAS OPTICAS (LASER) BOLITA DE 0,2 NM Alberts et al., 2008 MICROTUBULOS PREPARACION DE REPLICAS METALICAS DE LA SUPERFICIE DE UNA MUESTRA BIOLOGICA La muestra Sombreado con metal Cubierta de carbón Disolución de la muestra Réplica final Alberts et al., 2008 CELULAS EN CULTIVO FIBROBLASTO MIOBLASTOS Y MIOTUBOS Alberts et al, 2002 OLIGODENDROCITOS MICROTOMIA Alberts et al., 2002 RECONSTRUCCION DE CORTES FISICOS U OPTICOS Alberts et al., 2002 EL MICROSCOPIO CONFOCAL Alberts et al., 2002 MICROSCOPIA CONVENCIONAL (A) Y CONFOCAL (B) DE CELULAS DE LA GASTRULA DE UN INSECTO MOSTRANDOLA DISTRIBUCION DE ACTINA Actina cortical Alberts et al., 2002 INMUNOFLUORESCENCIA DOBLE DE UN ZIGOTO DE SANGUIJUELA. CORTE OPTICO EN EL MICROSCOPIO CONFOCAL Actina: rojo Microtúbulos: verde Fernández et al., 2004 Anillo polar y bandas meridionales MICROSCOPIA CONFOCAL: CORTES OPTICOS Y SECCIONES ORTOGONALES DE UN ZIGOTO DE LA SANGUIJUELA INMUNOTEÑIDO X----X Y----Y Actina: rojo Microtúbulos: verde Y----Y X----X Fernández et al., 2004