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Rev. Bio!. Trop., 1 2 ( 1 ) : 67-74, 1964 Contribución al estudio fitoquímico de plantas costarricenses. 1. Análisis Alcaloidal por José A. Sáenz R.'" (Recibido para su publicación el 28 de abril de 1 9 64 ) Desde hace aproximadamente cuatro años, l a Universidad d e Costa Rica en asocio con la Universidad de Wisconsin y el Instituto del Cáncer de los Es tados Unidos de América, ha venido trabajando en un programa tendiente al análisis alcaloidal y determinación de las propiedades antitumóricas de plantas costarricenses, de preferencia aquellas que reciben o han recibido atención en medicina popular. En este aspecto nuestro programa va más lejos de lo que otros han hecho sobre el mismo campo ( 1 , 3, 4, 5, 9, 10, 1 1, 1 2 ) . Como paso posterior, se contempla el ensayo analítico y farmacológico de aquellas planta;; que indiquen presencia de sustancias alcaloidales o muestren acción inhibidora de tejidos neoplásicos. El presente trabajo tiene por objeto únicamente dar a conocer el análisis alcaloidal cualitativo verificado en plantas costarricenses, ya que los ensayos antitumóricos han sido publicados en forma tabular en otra parte ( 2 ) . los resultados positivos, mostrados por algunas plantas sobre tej i dos neoplásicos, por razones obvias, no serán dados a conocer hasta que se haga un estudio exhaustivo de las mismas. Este trabajo tiene también por fina lidad contribuir al conocimiento de nuestra flora de tal manera que los resul tados aquí anotados sean incluidos posteriormente en la futura revisión de la Flora de Costa Rica. MATERIALES Y METOnos Se emplearon plantas costarricenses que, de acuerdo con ciertas publica ciones ( 6, 7, 8) o bien por indagaciones personales, han tenido o tienen uso * Depto. de Biología, Universidad de Costa Rica. 67 68 REVISTA DE BIOLOGIA TROPICAL en medicina popular. Se utilizaron raíces, tallos, hojas, frutos y, en menor grado, cortezas y flores. Para cada planta se anotó la fecha de colección y la localidad. Previa identificación taxonómica, cada parte de la planta se secó artificialmente a una temperatura de 5 5° C. aproximadamente. Una vez seca la droga bruta, se reduj o a polvo maderadamente grueso, en un molino Wiley NQ 3. Cada parte de planta pulverizada se extrajo , por agitación, con alcohol de 95°, a la tempe ratura ambiente y en la proporción de 100 gm de droga seca por 600 mI de alcohol. Hecho ésto, se agitó por dos horas y luego se filtró con succión. El equivalente a 20 gm de droga seca del filtrado, se separó para hacer análisis alcaloidal y el 80 % restante se concentró por destilación al vacío, hasta obtener un extracto semisólido que terminó de concentrarse al vacío sobre cloruro de cal cio, en desecadora de vidrio. Este extracto se envió a la Universidad de \'V'isconsin en donde se le hacen ensayos para determinar su actividad antitumórica en animales sobre di versos tipos de tejidos neoplásicos. Aquellos extractos que llegan a la etapa de "actividad confirmada" demandan luego la extracción en gran escala, y poste riormente análisis con el fin de determinar el o los posibles principios origina dores de la acción inhibidora del tejido tumórico. La alícuota antes citada que representa un 20 0/0 de la droga extraída, se evaporó a sequedad y a presión reducida. El residuo obtenido se agitó hasta su total disolución con 50 mI de agua amoniacal al 5 0/0, la cual luego se extrajo con 50 mI de éter etílico. La capa etérea se separó, dejando la alcalina, y se extrajo con 5 mI de HCl al 5 % . La fracción ácida se separó y una porción de ella se ensayó por alcaloides con reactivo de Mayer. El contenido de bases alca loidales trivalentes se evaluó visualmente. La validez del precedente ensayo se confirma mediante adición, a otra porción de la capa ácida, de cloruro de sodio hasta su saturación ; se filtra; en el filtrado se repite la prueba con reactivo de Mayer. Si da negativo, el primer resultado no era debido a alcaloides sino a otras sustancias extraña'S, tales como proteínas u ácidos orgánicos. Una muestra de la capa alcalina original se acidifica con HCl; se filtra luego y el contenido de bases cuaternarias se evalúa en forma similar. Los precipitados obtenidos con reactivo de Mayer se evalúan sobre la ba'Se de una cruz ( + ) hasta cuatro cruces ( + + + + ) , utilizando una solución es tandar de brucina para las bases terciarias y otra más diluí da de metilioduro de aspidospermina en HCI, al 2 0/0 . En esta evaluación, una cruz ( + ) indica que aproximadamente 10 Kg de droga 'Seca proporcionará al menos 1 gramo de alca loides; dos cruces ( + + ) , que aproximadamente 3 Kg de droga seca darán el rendimiento anotado y tres cruces ( + + + ) que con 1 Kg de droga se podrá obtener 1 gm de alcaloides. Cuatro cruces ( + + + + ) se emplean para desig nar todas aquellas partes de planta de mayor rendimiento que tres cruces ( + + + ) . Intencionalmente se han escogido, como estandars, alcaloides que den precipitados voluminosos y floculentos, ya que así no es posible sobreesti mar la cantidad de alcaloides en las plantas sometidas a ensayo. SAENZ: ESTUDIO FITOQUíMICO DE PLANTAS COSTARRICENSES 69 RESULTADOS a Un resumen de los resultados obtenidos se detalla en la tabla continuación : 1 que damos TABLA 1 Análisis Alcaloidal Cualitativo AJe. Tere. AJe. Cuat. Parte de la Planta ANACARDIACEAE Mangifera indica L. Mangifera indica L. Hojas Tallo ANNONACEAE AnnonJ muricata L . Annona muricata L. Tallo Hojas + ApOCYNACEAE Al/amanda cathartica L. Al/amanda cathartica L. Vincetoxicum edule (Hems! . ) Stand!. Vincetoxicum edule ( Hems!. ) Stand!. Vincetoxicum edule ( Hems!. ) Stand!. Thevetia plumeriaefolia Benth. Thevetia plumeriaefolia Benth. Thevetia plumeriaefolia Benth. Stemmadenia glabra Benth. Stemmadenia glabra Benth. ++++ ++++ + + + -t ++++ Hojas Tallo Raíz Tallo Hojas Fruto Hojas Tallo Corteza Hojas ARALIACEAE Oreopanax xalapense (HBK) Dene. & PI. Oreopanax xalapense (HBK) Dene. & PI. Tallo Hojas ASCLEPIADACEAE Asclepias curassa/Jica L. Asclepias curassavica L. Asclepias curassavica L. -j-- Raíz Hojas Tallo BIXACEAE Bixa orel/ana L. Bixa orellana L. Raíz Hojas BORAGINACEAE Heliotropium indicum L. Heliotropium indicum L. Cordia glabra L. Cordia glabra L. Tournefortia glabra L. Hojas Tallo Hojas Tallo Hojas REVISTA DE BIOLOGIA TROPICAL 70 Ale. Tere. ToUl'nejortia Ale. Cuat. + glabra 1. Parte de la Planta Tallo BURSERACEAE BUl'sel'a Simarttba ( 1. ) Sargo Bursera Simaruba ( 1. ) Sargo Hojas Tal l o CAESALPINIACEAE Hymenaea Coul'baril 1. Hymena'ea Courbaril 1. CtlSJia reticulata Willd Cassia reticulata Willd Cassia spectabilis De. Cassia spectabilis De. Bauhinia sp. Hojas Tallo Hojas Tallo Semilla Vaina Tallo +++ COMPOSITAE Sonchus oleraceus Sonchus oleraceus Vernonia stellaris Vernonia stellaris Emilia sonchifolia Emilia sonchifolia Tagetes erecta 1. Tagetes erecta 1. Raíz Parte aérea florida Parte aérea florida Tallo Tallo Hojas Raíz y Tallo Hojas y Tallo 1. 1. Llave & Lexarza Llave & Lexarza (1.) De. (1.) De. CUCURBITACEAE Sechium edule Sechium edule Cucurbita Pepo Ctlcttrbita Pepo (Jacq. ) Sw. (Jacq. ) SW. 1. 1. Hojas Tallo Hojas Tallo Jatropha gossypiifolia 1. Jatropha gossYPiifolia 1. Jatrophc: gossypiifolia 1. Jatropha gossypiifolia 1. Jatropha aconitifolia MilI. Jatropha aconitifolia Mi l I . Euphorbia cotinifolia 1. Euphorbia cotinifolia 1. Euphorbia cotinifolia 1. Croton nivem Jacq. Croton ni1ieus Jacq. Croton nivetlS Jacq. Croton gossypiifolius Vahl. Croton gossypiifolius Vahl. Artocarpus commums Forst. Ricinus communis 1. Ricinu.r communis 1. Rici1111S co 111 111 IInis 1. Fruto Raíz Hojas Tallo Tallo Hojas Tallo Hojas Raíz Raíz Tallo Hojas Hojas Tallo Hojas Hojas Tallo Raíz EUPHORBIACEAE + + SAENZ: ESTUDIO FlTOQUIMICO DE PLANTAS COSTARRICENSES Ale. Tere. Ale. Cuat. 71 Parte de la Planta LAURACEAE Pel'sea americana Mil!. Persea a.me1'icana Mil!. Hojas Tallo LILIACEAE Yucca elephantiPes Regel Hojas MALPIGHIACEAE Byrsonima crassifolia (1.) DC Byrsonima crassitolia (1.) DC Hoj-as Tallo MALVACEAE Hojas Tallo Raíz Hojas Tallo Gossypium sp. Gossypium sp. Gossypium sp. Malvaviscus palmanus Pitt. & Donn. Sm. Malvaviscus palmanus Pitt. & Donn. Sm. MELIACEAE TI'ichilia Trichilia Trichilia Trichilia havanensis havanensis havanensis havanensis Jaeq. Jaeq. Jaeq. Jaeq. + + Hojas Fruto Tallo Raíz MENISPERMACEAE Cissampelos pareÍ1'a 1. Cissampelos pareira L. CissampeJoJ pareira L. + + + + + + Hojas Tallo Raíz MIMOSACEAE Enterolobium cyclocarp1t1n (Jaeq . ) Gris. Enterolobium cyclocarpum ( Jaeq . ) Gris. Acacia Pittiel'iana Stand!. Acacia Pittieriana Stand!. Acacia Pittieriana Stand!. Mimosa invisa Mart. Mimosa invisa Mart. Inga edulis Mart. Inga edulis Mart. +++ + Hojas Tallo Tallo Semillas Cubierta seminal Raíz Tallo Hojas Tallo MORACEAE Ficus cos/arictma ( Liebm. ) Miq. Ficus cos/aricana ( Liebm . ) Miq. Hojas Tallo MYRTACEAE Eugenia Jambos L. Eugenia Jambos 1. Hojas Tallo PAPAVERACEAE Argelll one mexica/ta L. + Hojas REVISTA DE BIOLOGIA TROPICAL 72 Argemone mexicana L. Argemone mexicana L. Argemone mexIcana L. Ale. Tere. Ale. Cuat. + -1+ + + Parte de la Planta Fruto Raíz Tallo PAPILIONACEAE Crotalaria mysorensis Crotalaria mysorensis Erythrina berteroana Erythrina berteroana Erythrina berteroana Roth Roth. Urb. Urb. Urb. . -+- + + + + T Hojas Tallo Hojas Tallo Raíz PHYTOLACCACEAE Raíz Phytolacca icosandra L. PIPERACEAE Hojas Tallo Raíz Piper gonagricum Trel. Piper gonagricum Trel. Piper gonagricum Trel. RosAcEAE Hojas Tallo Eriobotrya japonica Lindl. Eriobotrya japonica Lindl. RUBIACEAE + + ++ Hamelia patens Jacq. Hamelia patens Jacq. Hamelia patens Jacq. +++ Hoja.s Tallo RaÍ:>. RUTACEAE Casimiroa edulis Millsp. Casimiroa edulis Millsp. Hojas Tallo SAPINDACEAE Cupania glabra Sw. Hojas SAPOTACEAE Chrysophyllum Cainito L. Chrysophyllum Cainito L. Hojas Tallo SOLANACEAE Datura arborea L. Datttra arborea L. Acnisttts arborescens ( L ) Schl. Acnistus arborescens ( L ) Schl. Solanum ferrugineum Jacq. Solanum ferrugineum Jacq. Solanum ferrugineum Jacq. Solanum Q uitoense Lam. Solanum Quitoense Lam. Solanum Quitoense Lam . + + Tallo Hojas Hoj as Tal l o Hojas Ta l lo Raíz Hojas Tallo Raíz SAENZ: ESTUDIO FITOQUíMICO DE PLANTAS COSTARRICEN5ES Ale. Tere. Ale. Cuat. + + -1- + 73 Parte de la Planta STERCULIACEAE Meloehia pyramidata L . Meloehia pyramidata L. Meloehia pyramidata L. Tallo Hojas Semilla UMBELLIFERAE Parte aérea Raíz Eryngium Carlinae Delar. Eryngium Carlinae Delar. DISCUSION Comparando los resultados anteriores con los publicados por el Departa mento de Agricultura de los Estados Unidos de América ( 1 3 ) observamos que las especies Stemmad enia glabra Benth. corteza y hojas; erotalaria mysoremis Roth. hojas y tallos; Tournefortia glabra 1. tallo; Melochia pyramidata L., tallo, hojas y raíz, son reportadas por primera vez como poseedoras de alcaloides. AGRADECIMIENTO Al Dr. R. 1. Rodríguez por la identificación de la mayoría de las especies reportadas. RESUMEN Se analizan cualitativamente por bases terciarias y cuaternarias un total de 5 9 especies de plantas de Costa Rica. Por primera vez se reporta el análisis po sitivo por alcaloides para las especies : Stemmadenia glabra Benth. ; erotalaria mysorensis Roth. ; Tournefortia glabra 1. y Melochia pyramidata 1. Se comprue ba la ausencia de alcaloides en numerosas plantas de uso en la medicina popular costarricense. SUlVIMARY A total of 59 species of Costa Rica plants have been tested for terciary and quaternary bases. The presence of alkaloids in the following plants : Stem madenia glabra Benth. ; erotalaria mysorensis Roth . ; Tournefortia glabra 1. y Melochia pyramidata 1. is reported for the first time. Alkaloids are shown to be absent in several other plants used in foIk medicine in Costa Rica. BIBLIOGRAFIA 1. 2. DALAL u. c., A. TAYLOR, & G. F. McKENNA 1958. The effeet of plant extraets on egg eultivated tumor tissue. Texas Rep. Biol. Med., 1 6 : 439-442. , A . R. BOURKE, S. A . SCHEPARTZ, B. J . ABB o n, & D. B. FITZGERALD Sereening Data from the Caneer Chemotherapy National Service Center Sereen ing Laboratories VI. Plant Extracts. Parto 2. Caneer Researeh. 2 1 : 93. 1 5 3 . LEITER, ]., 196 1 . REVISTA DE BIOLOGIA TROPICAL 74 3. 1954. 4. McKENNA, G . 1959. 6. PÉREZ, 1938. 7. F., A. TAYLOR, & B. S. GIBSON Further studies of plant extracts in cancer ehemotherapy. Texas Rep. Biol. 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