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HOJA DE INFORMACIÓN DE PRODUCTO HOJA DE INFORMACIÓN DE PRODUCTO Uso del Producto B-Pol ® Polimerasa de alta fidelidad Es una polimerasa de alta fidelidad, producida acorde al estado del arte de manera recombinante y por ingenierías de bioprocesos. Es ideal para su uso en la amplificación por PCR de fragmentos de ADN cuya aplicación requieren de alta fidelidad en las copias producidas. La enzima presenta actividad proofreading (3´-5´ exonucleasa) capaz de corregir errores durante la replicación del ADN. Fuente B-Pol® es una enzima recombinante purificada producida en E. coli a partir de un diseño quimérico que codifican para una enzima de alta fidelidad. Receta Sugerida para PCR Volumen Final de Reacción 50µL Componente STOCK Volumen tomado STOCK Concentración Final Agua 10x Buffer de Reacción Solución Iónica 50mM B-Pol® Enzima dNTP’s 10mM each Forward Primer 100µM Reverse Primer 100µM ADN Molde (Templado) 30µL 5µL 1µL 1µL 2 µL 5µL 5µL 1µL 1x 1mM 1 Unidad 0.4mM 10µM 10µM 10ng por lo menos Que se Incluye en el KIT Enzima 100 Unidades (100 Reacciones) Concentración STOCK 1 Unidad/µL en Buffer de Almacenamiento (50% glicerol, 100 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 2 mM DTT, 0.2% NP40, 0.2% Tween 20). 10x Buffer de Reacción Concentración STOCK 10x, que debe ajustarse a una concentración final en la reacción de 1x. (20 mM Tris-HCl, 10 mM KCl, 10 mM (NH4)2SO4, 2 mM MgSO4, and 0.1% Triton X-100). Solución Iónica 50mM Concentración STOCK 50mM, La concentración final recomendada es de1mM. Dependiendo de la dificultad del amplicon la solución 50mM MgCl2 puede ajustarse una concentración final de entre 1mM y 6mM. Agua Agua estéril grado mQ HOJA DE INFORMACIÓN DE PRODUCTO Condiciones de Reacción Etapa Número de Ciclos Temperatura Tiempo 1 2.1 2.2 2.3 3 4 1 94°C 94°C 55°C 68°C 68°C 4°C 5 minutos 15 segundos 30 segundos 90 segundos 5 minutos 30 1 1 ∞ *Añadir al menos 60 segundos por 1Kbp de longitud en el templado Soporte Técnico soporte@polimerasa.com HOJA DE INFORMACIÓN DE PRODUCTO Uso del Producto B-Pol ® Polimerasa de alta fidelidad Es una polimerasa de alta fidelidad, producida acorde al estado del arte de manera recombinante y por ingenierías de bioprocesos. Es ideal para su uso en la amplificación por PCR de fragmentos de ADN cuya aplicación requieren de alta fidelidad en las copias producidas. La enzima presenta actividad proofreading (3´-5´ exonucleasa) capaz de corregir errores durante la replicación del ADN. Fuente B-Pol® es una enzima recombinante purificada producida en E. coli a partir de un diseño quimérico que codifican para una enzima de alta fidelidad. Receta Sugerida para PCR Volumen Final de Reacción 50µL Componente STOCK Volumen tomado STOCK Concentración Final Agua 10x Buffer de Reacción Solución Iónica 50mM B-Pol® Enzima dNTP’s 10mM each Forward Primer 100µM Reverse Primer 100µM ADN Molde (Templado) 30µL 5µL 1µL 1µL 2 µL 5µL 5µL 1µL 1x 1mM 1 Unidad 0.4mM 10µM 10µM 10ng por lo menos Que se Incluye en el KIT Enzima 100 Unidades (100 Reacciones) Concentración STOCK 1 Unidad/µL en Buffer de Almacenamiento (50% glicerol, 100 mM Tris-HCl pH 8.0, 0.2 mM EDTA, 2 mM DTT, 0.2% NP40, 0.2% Tween 20). 10x Buffer de Reacción Concentración STOCK 10x, que debe ajustarse a una concentración final en la reacción de 1x. (20 mM Tris-HCl, 10 mM KCl, 10 mM (NH4)2SO4, 2 mM MgSO4, and 0.1% Triton X-100). Solución Iónica 50mM Concentración STOCK 50mM, La concentración final recomendada es de1mM. Dependiendo de la dificultad del amplicon la solución 50mM MgCl2 puede ajustarse una concentración final de entre 1mM y 6mM. Agua Agua estéril grado mQ Condiciones de Reacción Etapa Número de Ciclos Temperatura Tiempo 1 2.1 2.2 2.3 3 4 1 94°C 94°C 55°C 68°C 68°C 4°C 5 minutos 15 segundos 30 segundos 90 segundos 5 minutos 30 1 1 ∞ *Añadir al menos 60 segundos por 1Kbp de longitud en el templado Soporte Técnico soporte@polimerasa.com
