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EVIDENCIA DE TRANSMISIÓN VERTICAL DEL VIRUS ZIKA, VENEZUELA, FEBREROMAYO 2016. 1 Instituto 1Ruiz Y, 1 Arteaga D, 1 Tovar C, 1 Ladera M, 1 Moreno A, 1 Chacón P. Nacional de Higiene “Rafael Rangel”. Ciudad Universitaria, Caracas-Venezuela. yessikaruiz.1221@gmail.com Introducción Resultados El virus Zika es un virus de ARN de la familia Flaviviridae, a la cual pertenecen también los virus de la fiebre amarilla, dengue, virus del Nilo Occidental y la encefalitis japonesa. Transmitido al humano principalmente por la picadura de un mosquito del género Aedes infectado, produciendo un cuadro clínico caracterizado principalmente por exantema, fiebre, artralgias y conjuntivitis1 (figura n 1). En 2015, debido a un aumento inusual del número de casos de microcefalia en Brasil en relación con años anteriores, el Ministerio de Salud de ese país señala que los datos epidemiológicos sugerían que los casos podrían estar asociados con la introducción del virus Zika2 en las Américas. A partir de entonces se han reportado numerosas evidencias de la asociación entre el virus Zika y la ocurrencia del Síndrome Guillain-Barré severas anomalías congénitas del sistema nervioso central (SNC). En base a esta evidencia numerosos trabajos han planteado la posible transmisión vertical del virus Zika, con probable infección en el feto, asociándose con la aparición de patologías en el mismo e incluso abortos (figura 1). De un total de 54 muestras sometidas a estudio se obtuvo positividad en 29 muestras, representando un 53,7 %. En la tabla 1 se observa como fue la positividad en porcentajes de cada tejido estudiado. Tabla 1. Porcentaje de positivos de acuerdo a cada tejido estudiado. Muestra TEJIDO EMBRIONARIO (n=1) RESTOS OVULARES (n=10) TEJIDO FETAL (n=10) TEJIDO PLACENTARIO (n=14) SANGRE DE CORDON (n=5) TEJIDO DE CORDON (n=11) LIQUIDO AMNIOTICO (n=3) Positividad (%) 100 70 60 57 40 36 33 En la figura 3 podemos observar el número de muestras evaluadas de cada tejido y la proporción de positivos y negativos de cada representación. Figura 1. Síntomas de la infección de Virus Zika1 y posibles vías de transmisión del agente. Objetivo Evidenciar la transmisión vertical mediante la detección del virus Zika en muestras producto de la concepción, provenientes de pacientes embarazadas con diagnóstico clínico-epidemiológico de Zika, recibidas en el Instituto Nacional de Higiene “Rafael Rangel” entre los meses de febrero y mayo de 2016. Metodología Recepción de muestras en el Laboratorio de Aislamiento Viral Obtención de macerados de tejidos fetales Extracción de ARN mediante el estuche FavorPrep Viral Nucleic Acid Extraction kit I Muestras fetales: Tejido placentario Restos ovulares Tejido fetal Tejido de cordón Sangre de cordón Líquido amniótico Tejido embrionario Figura 3. Proporción de muestras positivas y negativas a virus Zika. Discusión Existen reportes de agentes infecciosos virales tales como virus dengue, virus del Nilo Occidental, citomegalovirus y rubéola, con capacidad de atravesar la barrera placentaria y causar daño al feto. En este estudio se procesaron distintos tipos de muestras producto de la concepción de mujeres embarazadas con sintomatología compatible con infección por virus Zika. El ARN viral fue detectado en todos los tipos de muestras procesadas(Tabla 1). Este hallazgo es apoyado por estudios previos donde se ha detectado el material genético del virus Zika en líquido amniótico y placenta por qRT-PCR2,3 y en tejido fetal mediante inmnohistoquimica. Sin embargo, este trabajo podría ser el primero en detectar el ARN viral por qRTPCR en otros tipos de muestras como tejido y sangre de cordón y restos ovulares, demostrando la capacidad del virus Zika de pasar de la madre al feto atravesando la barrera placentaria. Conclusión ARN Se detectó la presencia de material genético del virus Zika en todos los tipos de muestras y tejidos producto de la concepción, evidenciando la posibilidad de que el virus Zika pueda atravesar la barrera placentaria, y probablemente infectar al feto. Referencias Resultado positivo Detección de ARN del virus Zika mediante RT-PCR Tiempo Real dirigida al segmento del gen NSP1. Figura 2. Esquema del diagnóstico molecular del virus Zika El protocolo de la RT-PCR en tiempo real utilizado fue el recomendado por la OMS de Lanciotti y col., 2008 4, cuyos cebadores son los siguientes: ZIKV 1086 (5ʼ-CCGCTGCCCAACACAAG-3ʼ) ZIKV 1162c (5ʼ-CCACTAACGTTCTTTTGCAGACAT-3ʼ) ZIKV 1107-FAM (5ʼ-AGCCTACCTTGACAAGCAGTCAGACACTCAA-3ʼ). 1.Ritter J, Martines R, Zaki S. Zika Virus: pathology from th pandemic. Arch Pathol Lab Med. 2016: 1-12. 2.Calvet G, Aguiar R, Melo A, Sampaio S, de Filippis I, Fabri A, et al. Detection and sequencing of Zika virus from amniotic fluid of fetuses with microcephaly in Brazil: a case study. Lancet Infect Dis . 2016: 1-8. 3.Besnard M, Lastère S, Teissier A, Cao-Lormeau V M, Musso D. Evidence of perinatal transmission of Zika virus, French Polynesia, December 2013 and February 2014. Euro Surveill. 2014;19(13):pii=20751. Disponible: http://www.eurosurveillance.org/ViewArticle.aspx?ArticleId=20751. 4.) Lanciotti, R., Kosoy, O., Laven, J., Velez, J., Lambert, A., Johnson, A., Stanfield, S., Duffy, M. Genetic and Serologic Properties of Zika Virus Associated with an Epidemic, Yap State, Micronesia, 2007. Emerg Infect Dis. 2008; 14(8): 1232–39. Agradecimientos Agradecimientos al T.S.U Dulce Carrero y a todos los trabajadores del laboratorio de aislamiento viral que apoyaron a la realización de este trabajo.