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Bacterias aeróbicas responsables de infecciones de sitio operatorio y su sensibilidad a los antibióticos lencia de cepas bacterianas resistentes a múltiples antibióticos, lo cual hace más difícil el manejo médico de estos pacientes. Se señala la necesidad de agregar, en este tipo de estudios, métodos apropiados para la investigación de anaerobios.y de mantener un programa de vigilancia de la resistencia a los antimicrobianos. Dra. Ana Teresa Menjívar y Dra. Leonor Murillo de Linares(1); Lic. Ena Yolanda González y Dr. Antonio Menjivar Tobar(2) 1) Departamento de Microbiología, Escuela de Medicina, Universidad “Dr. José Matías Delgado”, 2) Departamento de Cirugía, Hospital San Rafael, Santa Tecla PALABRAS CLAVES: Infección del sitio operatorio (ISO), bacterias aerobias, resistencia bacteriana INTRODUCCIÓN R ESUMEN: Treinta y ocho pacientes intervenidos quirúrgicamente en el Hospital San Rafael, en un periodo de 6 meses, mostraron infección del sitio operatorio. La mayoría de las infecciones se observaron en pacientes que habían sido sujetos de apendicetomía. El examen directo de la secreción de las lesiones dio resultados positivos en 95% de los casos, observándose bacilos gram negativos, cocos y bacilos gram positivos, los cuales no fueron aislados en todos los casos, por lo que se postula que los no recuperados posiblemente eran bacterias anaerobias o bacterias inhibidas de crecer por el uso de antimicrobianos antes de la toma de la muestra. De especial importancia fue la observación de una alta preva- Universidad “Dr. José Matías Delgado” Infección del sitio operatorio (ISO) es la infección de cualquiera de los sitios en donde se genera una herida durante un procedimiento quirúrgico, e incluye heridas superficiales y profundas, desde la incisión en la piel hasta el procedimiento quirúrgico como tal(2). Estas infecciones ocupan entre el primero y segundo lugares en frecuencia de infecciones nosocomiales en los hospitales del mundo. La tasa global en los hospitales de Estados Unidos de América oscila entre el 3% al 5% de acuerdo al tipo de hospital, siendo más alto en los centros de trauma (4). Constituyen un serio problema de morbilidad y mortalidad en los servicios de cirugía y complican el proceso de curación de los pacientes, hacen fracasar el procedimiento quirúrgico aplicado, aumentan los días de estancia hospitalaria y en consecuencia incrementan los costos(6,11). Entre los pacientes quirúrgicos, la infección del sitio operatorio es la más frecuente de las infecciones nosocomiales (38%); de estas, 2/3 se limitan a la incisión, mientras 1/3 involucran órganos y espacios implicados en la cirugía. Cuando los pacientes con infecciones del si 10 Órgano de Difusión de la Red Docencia-Investigación tio operatorio mueren, el 77% de las muertes se relacionan con la infección y la mayoría (93%) son causadas por infecciones que involucran órganos y espacios relacionados con el procedimiento quirúrgico(2,4). La inexistencia de ISO en pacientes con cirugía limpia se considera internacionalmente como uno de los mejores indicadores de la calidad de los servicios de cirugía (6). Nosotros estudiamos en este trabajo algunas características de las ISO presentadas por los pacientes del Departamento de Cirugía del Hospital San Rafael y complementamos el reporte con el estudio de la bacteriología aeróbica del sitio operatorio infectado y la resistencia de las bacterias aisladas a los antibióticos utilizados en dicho hospital, a fin de dar información al personal de salud de la institución sobre esa patología, para que puedan prevenir su ocurrencia y dar un mejor tratamiento a los pacientes. OBJETIVO GENERAL Estudiar en pacientes con infección del sitio operatorio del Departamento de Cirugía del Hospital San Rafael, las bacterias aeróbicas responsables de la infección y determinar, por métodos convencionales, su resistencia a los antibióticos del cuadro básico del hospital. MATERIALES Y MÉTODOS a) Población estudiada Se trabajó con la población de pacientes mayores de 12 años, que fueron intervenidos quirúrgicamente en el Departamento de Cirugía del Hospital Nacional San Rafael durante los meses de marzo a agosto de 2007, que cumplían los criterios clínicos y microbiológicos de Infección del Sitio Operatorio(2), y que dieron consentimiento informado para participar 11 en el estudio. No se incluyeron pacientes de las áreas de oftalmología, ortopedia ni urología. Los pacientes incluidos en el estudio fueron seleccionados por uno de los responsables de la investigación, durante la visita médica diaria realizada en el servicio. A los pacientes que llenaban los criterios de inclusión se les explicó en qué consistía el procedimiento y sus propósitos. A aquéllos que estuvieron de acuerdo en colaborar en el estudio, se les registró en un formulario específico, sus datos personales, tipo de procedimiento quirúrgico, la fecha de inicio de síntomas, la fecha en que el procedimiento fue practicado y las características de la lesión y del material purulento. b) Colección de las muestras Inmediatamente después de entrevistado el paciente, se le realizó una limpieza cuidadosa del área de la operación. Luego, con un hisopo estéril, se tomó secreción del fondo de la herida, el cual fue colocado en un tubo con medio de transporte AMIES, previamente identificado. A continuación se tomó una segunda muestra con la cual se hicieron 2 frotis en portaobjetos, también debidamente identificados. Dichas muestras fueron transportadas el mismo día al Laboratorio del Área Básica de la Escue- Centro de Investigaciones en Ciencias y Humanidades la de Medicina para la realización del examen directo y cultivo. c) Procesamiento de las muestras Todas las muestras recibidas fueron registradas en el Libro de Ingreso y se les asignó un número correlativo. Los frotis fueron coloreados por el método de Gram y examinados al microscopio con objetivo de inmersión, anotando su morfología, reacción de Gram, cantidad relativa de bacterias observadas y la presencia o ausencia de células inflamatorias. Estos resultados fueron reportados de inmediato al médico tratante. Los cultivos se realizaron en medios de Mac Conkey y Agar Sangre y se incubaron a 35ºC por 18 a 24 horas, después de lo cual se revisaron los cultivos, se anotó la morfología y número relativo de colonias y se estudiaron Universidad “Dr. José Matías Delgado” microscópicamente los organismos de cada colonia y su coloración de Gram. Se hicieron subcultivos en agar nutritivo de cada tipo de colonia para tener cultivos puros, los cuales fueron utilizados para la identificación de las bacterias aisladas por métodos convencionales(3,7,14) y para el estudio de la sensibilidad a los antibióticos del cuadro básico del Hospital San Rafael, según la técnica de Kirby Bauer(3,7). Los milímetros de los diámetros de inhibición alrededor de las colonias fueron medidos e interpretados utilizando las tablas específicas para ello. Los resultados fueron reportados al médico tratante, de forma inmediata, para su aplicación en el manejo del paciente. RESULTADOS Se incluyeron en el estudio 38 pacientes con infección de sitio operatorio, que habían sido intervenidos quirúrgicamente en el Departamento de Cirugía del Hospital San Rafael, en el periodo de marzo a agosto de 2007. Fueron del sexo masculino 21(54%) y del sexo femenino 17 (46%) (Tabla I). 12 Órgano de Difusión de la Red Docencia-Investigación Las edades variaron en el rango de 13 a 94 años, estando la mayoría (37%) comprendidos entre los 19 y 35 años, seguidos por los de 12 a 18 años y los de 35 a 59 años (26% cada uno)(Gráfica I). El área anatómica de la intervención fue el abdomen en 95% de los casos y pélvica en el restante 5% (Gráfica II). 13 Centro de Investigaciones en Ciencias y Humanidades La intervención quirúrgica que se complicó con infección más frecuentemente fue la apendicetomía, en 75% de los casos; el trauma abdominal en 11%, la cura de hernia y la extirpación de masa abdominal en 5% cada una, y finalmente la plastia escrotal en 3% (Gráfica III). En todos los casos las lesiones presentaron signos de inflamación: calor, rubor y dolor. La secreción estuvo presente en 34 de los pacientes, descrita como purulenta en 12 casos, achocolatada en 8, verde en 2, amarillenta en 4 y sanguinolenta en 8. No fue descrita en 4 casos. Todos los pacientes, excepto dos, fueron positivos al examen directo, mostrando bacilos gram negativos en 28 casos (74%) y cocos gram positivos en 19(50%) (Gráfica IV) Gráfica IV GRUPOS BACTERIANOS AISLADOS Universidad “Dr. José Matías Delgado” 14 Órgano de Difusión de la Red Docencia-Investigación Doce pacientes (32%) tenían ambos grupos bacterianos, además 5(13%) tenían bacilos gram positivos y bacilos gram negativos, 2 (5%) tenían cocos gram positivos y bacilos gram positivos (Gráfica V). Es preciso señalar que algunas bacterias se observaron en el examen directo, pero no crecieron en los cultivos y en ningún caso se aislaron bacilos gram positivos. Gráfica V COMBINACIONES DE BACTERIAS AISLADAS Los resultados de los cultivos fueron los siguientes: se aislaron bacterias aerobias en 28 (74%) de los pacientes, 9 (24%) no mostraron crecimiento y 1 (2%) creció contaminado.(Gráfica VI) Gráfica VI RESULTADO DE CULTIVOS 15 Centro de Investigaciones en Ciencias y Humanidades De los diferentes grupos bacterianos predominaron en los cultivos los bacilos gram negativos, recuperados de 21 pacientes (75% de los positivos). De ellos 5 tuvieron infecciones mixtas de Escherichia coli, con Morganella morganii, Pseudo- monas aeruginosa, Proteus mirabilis, Streptococcus grupo D y Staphylococcus aureus. Otros bacilos gram negativos aislados fueron Acinetobacter baumanni y Klebsiella pneumoniae, ambos de gran importancia como bacterias responsables de infecciones nosocomiales, y caracterizados por altos niveles de resistencia a los antibióticos. Gráfica VII BACILOS GRAM NEGATIVOS AISLADOS Los cocos gram positivos fueron cultivados de las secreciones en 9(24%) casos, de los cuales 2, como ya mencionamos, estaban coexistiendo con Escherichia Universidad “Dr. José Matías Delgado” coli. Las especies de gram positivos aisladas correspondieron a S. aureus 4 (10%), S. epidermidis 1 (3%), Streptococcus grupo D 3 (8%) y Streptococcus alfa hemolítico (3%) 16 Órgano de Difusión de la Red Docencia-Investigación Gráfica VIII BACTERIAS GRAM POSITIVAS AISLADAS Previo a la toma de la muestra 36 (95%) de los pacientes habían recibido antibióticos, 19 (50%), 8 casos monoterapia con gentamicina, o gentamicina combinada con otro antibiótico en 11. De estas combinaciones las más utilizadas fueron: con metronidazol 2 casos, con cloranfenicol 2, con amoxicilina 2, con ciprofloxacina 2 y con metronidazol y ciprofloxacina 3. El otro antibiótico muy utilizado fue la ciprofloxacina en 11 casos (29%) la cual fue usada siempre combinada, con metronidazole en 3 casos, con ceftriazona en 2, con gentamicina en 2, con metronidazole y gentamicina en 3 y con cloranfenicol y ampicilina en un caso. El metronidazol fue utilizado en 10 casos (26%), se usó siempre combinado, con gentamicina en 2 casos, con ciprofloxacina en 3, con ceftriaxona en 2, y con 17 ciprofloxacina y gentamicina en 3 casos. Ceftriaxona fue utilizada en 8 pacientes (21%), en monoterapia en 2 casos, con metronidazole en 2, con ciprofloxacina en 2, con clindamicina en 1 y con cloranfenicol en un caso. Amoxicilina fue utilizada en 7 pacientes (18%), en monoterapia en 4 casos, con gentamicina en 2, y con ampicilina en un caso. La resistencia de las bacterias aisladas a los antibióticos utilizados en los pacientes fue bastante alta, a gentamicina de 33%, a ciprofloxacina de 42%, a amoxicilina 70% y a trimetroprim- Centro de Investigaciones en Ciencias y Humanidades sulfametoxazole de 81%. La resistencia a Imipenem fue del 3%, lo que se explica, por ser este último un antibiótico de uso restringido y de alto precio, al cual la mayoría de las bacterias no han estado expuestas. Gráfica IX RESISTENCIA DE LAS BACTERIAS AISLADAS A 4 ANTIBIÓTICOS DISCUSIÓN La infección del sitio operatorio continua siendo un problema siempre presente en los hospitales con servicio de cirugía, como se puede apreciar en este estudio realizado en el Hospital San Rafael, en el que se observaron 38 casos de ISO en un periodo de 6 meses La mayoría de estos pacientes complicados habían sido sujetos de apendicetomía por apendicitis aguda, proceso patológico que representa un alto riesgo por el hecho de que con frecuencia el apéndice se ha perforado y ha provocado una peritonitis antes de que el paciente sea operado. La situación se complica cuan- Universidad “Dr. José Matías Delgado” do la infección se asocia a resistencia de las bacterias a los antimicrobianos, como se observó en este grupo de pacientes y como se observa cada vez con mayor frecuencia en todos los hospitales del mundo (2.4,10,13), lo que dificulta el tratamiento de los pacientes e incrementa los costos hospitalarios, ya de por sí aumentados por los requerimientos del tratamiento de la infección del área operatoria(7). El personal del hospital debe estar consciente de este problema y tratar de prevenirlo mediante la vigilancia rigurosa de las infecciones y los cuidados del paciente operado, en particular el lavado de manos y la asepsia en la curación de las heridas. Estudios previos realizados en el Hospital San Rafael en 1998, en pacientes con laparotomía exploradora de urgencia, mostró una índice de infección de 12.5% (9). En otro estudio similar, en pacientes con cirugía electiva realiza 18 Órgano de Difusión de la Red Docencia-Investigación da por el staff de cirujanos del mismo hospital, en el año 2001(5), el índice de infección reportado fue de 9.5%. En el año 2004, en pacientes con ambos tipos de cirugía, se encontró un índice de infección de 9%, superior a lo reportado en otros países (1). Todos estos estudios mostraron una tendencia a la reducción del número de ISO, pero lamentablemente no incluyeron un estudio bacteriológico apropiado de las secreciones de las heridas, debido a limitaciones técnicas. En este estudio, en el mismo ámbito, se realizó examen directo y cultivo de las secreciones y fue notable la variedad de microorganismos aislados, pero sobre todo el hecho de que muchas de las bacterias aisladas son reconocidas como nosocomiales, con un alto grado de resistencia bacteriana(3,7,8,12,13), lo cual pudo comprobarse en la mayoría de cepas aisladas. Pudimos apreciar que aunque prácticamente todos los pacientes habían recibido tratamiento con antibióticos, eso no había resuelto el problema al momento del estudio. Sería muy recomendable dar seguimiento a estos pacientes, para comprobar si al final hubo respuesta terapéutica y solución de la infección. Éso está en nuestros planes para futuros estudios de monitoreo de ISO en el Hospital San Rafael. El examen directo coincidió en buen número de casos con la bacteria aislada, lo cual nos indica que puede ser un procedimiento de ayuda en el manejo, sin embargo no hubo total concordancia en los resultados ya que en muchos casos se observaron cocos gran positivos y bacilos gram positivos que no fueron aislados en cultivo. Es posible que estas bacterias no recuperadas representen poblaciones de bacterias inhibidas por el uso previo de antibióticos o bacterias anaerobias, las cuales es sabido que son muy abundantes en el intestino(8,12), localización de la intervención 19 quirúrgica en la mayoría de casos de este estudio y para las cuales no se proporcionó una atmósfera apropiada de crecimiento. Lo anterior apunta a la necesidad de colectar las muestras antes de iniciar el uso de antibióticos y de implementar condiciones apropiadas para el cultivo de anaerobios, para obtener así un mejor conocimiento de la etiología de estas infecciones, así como para poder estudiar en estas bacterias su respuesta a los antibióticos y de esa manera poder manejar mejor el tratamiento del paciente. CONCLUSIONES Las ISO continúan siendo un problema de salud en el Servicio de Cirugía del Hospital San Rafael, por lo que es necesario aumentar la vigilancia epidemiológica de estas infecciones y extremar las medidas de asepsia para su prevención. La multirresistencia a los antibióticos de las bacterias responsables de ISO hace indispensable realizar cultivos de todos los casos de ISO y estudiar su sensibilidad a los antibióticos y en base a los resultados, racionalizar el uso de estos medicamentos en los pacientes del hospital. Debe iniciarse la investigación de bacterias anaeróbicas en estos pacientes, ya que con certeza tienen un papel muy impor- Centro de Investigaciones en Ciencias y Humanidades tante en la etiología de las ISO, y estudiar en ellos también el fenómeno de multirresistencia 6- BIBLIOGRAFÍA 1- Acuña Urrutia MV y Menjívar Hernández AT. “Infección del sitio operatorio y bacteriología aeróbica de los pacientes de cirugía general del Hospital Nacional San Rafael, Julio a septiembre 2004”. Tesis doctoral. Escuela de Medicina, Universidad “Dr. José Matías Delgado”. 2004 2- Anaya Sáenz D y col. “Herida e Infección quirúrgica”. Publicación de la Federación Latinoamericana de Cirugía. Santafé de Bogota. Colombia. 1999. 3- Baron EJ, Peterson LR and Finegold SM. “Bailey & Scott’s Diagnostic Microbiology”. 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