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Los virus entomopatógenos, agentes
biológicos promisorios para el
control de las polillas de la papa
Tecia solanivora y Symmetrischema
tangolias
Verónica Chevasco1, Daniela Chevasco1, Alvaro Barragán1,
Gaëlle Mongredien2, Giovanni Onore1, Jean-Louis Zeddam1,2.
1Pontificia
Universidad Católica del Ecuador
2IRD (Institut de Recherche pour le Développement)
REGRESAR
Polillas de la papa en la zona andina
ecuatoriana
1. Tecia solanivora
2. Symmetrischema tangolias
Carchi ¿?
sept 2004
Tungurahua
feb 2000
Loja
feb 2000
Daños por larvas de polillas
Tecia solanivora
Symmetrischema tangolias
4 estadios
5 estadios
Color: blanco transparente.
Dorso: puntos negros y
Color: blanco con franjas longitudinales
rojas en el dorso
pelos. Cápsula cefálica marrón.
Cápsula cefálica marrón obscura
Tamaño: 12 -15 mm
Tamaño 12,5 mm
Duración fase larval: 29 días
Duración fase larval: 38 días
El ciclo completo: aprox. 71 días.
Temp. Prom.: 16ºC y HR: 83%
El ciclo completo dura aprox. 76 días.
Temp. Prom: 16ºC y HR: 83%
Control de las polillas
T. solanivora (grave problema fitosanitario)
Grandes pérdidas ($6 millones/año Carchi)
Utilización de plaguicidas
60
40
20
0
si
Chimborazo
Cañar
no
No pertinente99
Tungurahua
Carchi
Cotopaxi
Fuente: PUCE-PROMSA 103
Reducción de los ingresos económicos (compra
químicos, pérdida cosecha, depreciación del producto)
80
Número de 60
encuestados 40
20
0
alta
media
baja
Antes
Después
Nivel de producción
de papa
Fuente: PUCE-PROMSA 103
Daños a la salud y al medio ambiente
14
12
10
8
Hombres
Mujeres
6
4
2
0
0--5
6--10 11--15 16--20 21--30 31--40 41--50
50
Fuente: Mera-Orcés, 2000
Número de hospitalizaciones por intoxicación con plaguicidas (según edad y
género) desde 1997 hasta 1999 en el Hospital de San Gabriel (Carchi)
Desarrollo de una alternativa de control:
Manejo Integrado de Plagas (MIP)
Conjunto de prácticas (culturales, uso
controlado de químicos, aplicación de
bioplaguicidas )
Aplicación de bioplaguicida (virus
entomopatógenos)
Materiales y Métodos
1. Muestreo de las poblaciones de la plaga (zonas
agroecológicas distintas en diferentes períodos)
2. Multiplicación de virus (inyección, inmersión,
contaminación de tubérculos)
3. Purificación de virus (gradientes sucrosa,
precipitación PEG)
4. Análisis de características físico- químicas y
moleculares de estos patógenos
a. Tamaño y estructura (microscopía óptica y
electrónica)
b. Composición proteínas (electroforesis geles
poliacrilamida)
c. Tipo de material genético (electroforesis geles
agarosa)
d. Organización de genomas virales (cortes
enzimáticos, clonación, secuenciación)
Resultados
1. Granulovirus (GV)
* Virus ocluido
* CI: 500 nm x 300 nm
* Proteína oclusión (≅ 30 kDa)
* ADN circular doble cadena (≅ 120 kpb)
* PhopGV:
Eficaz Phthorimaea operculella
Medianamente T. solanivora
Ineficiente S. tangolias
kDa PM
Virus
97,4
66,2
42,7
31,0
granulina
21,5
Virus (λ DNA EcoRI/Hind III)
21.226 kpb
5.148
4.268
3.530
2.027
1.904
1.584
1.375
1 µm
GV P. operculella
BamH I
* La patogenicidad de
las distintas especies
virales es diferente.
Larva enferma
* Dentro de una misma
especie viral existen
variaciones de
virulencia (1-10 LC50)
Larva sana
* Se están evaluando los
aislamientos más
eficaces
2. “Chiripa”
* Virus no ocluido
* 32 nm de diámetro
* Proteínas de cápside principales > 98 kDa
* ADN circular, simple cadena, tamaño: 3,6 kb
Virus
PM
kDa
148
98
64
50
Patículas virales
36
100 n m
22
16
Amplificación círculo rodante
(ADN polimerasa fago Φ 29)
Escalera 1 kpb
3000
1000
750
500
Hind III
Pvu II
Sal I
3. “Shyris”
* Virus no ocluido
* 30 nm de diámetro
* Proteínas virales entre 36 y 50 kDa
* ARN fragmentado, simple cadena
Virus
PM
kDa
250
Virus
PM
kb
98
64
9,49
7,46
4,40
50
2,37
1,35
36
100 n m
0,24
4. “Anchilibí”
*Virus no ocluido
* 30 nm de diámetro
* Proteínas virales entre 98 y 64 kDa
* ARN fragmentado simple cadena
kDa PM
250
98
64
50
36
30
100 n m
16
Virus
* Muy virulento (actúa
rápidamente)
T. solanivora
* Amplio rango de hospederos
T. solanivora y S. tangolias
P. operculella
* Afectaría:
Galleria mellonella
Tuta absoluta
Larva sana
Pupa sana
* Fácil de multiplicar
* Las larvas muertas se
colectan fácilmente
* Buen candidato para
bioplaguicida
Pupa enferma
Larvas muertas
Conclusiones
Gran biodiversidad viral (tamaño, virulencia,
tipos de organización)
Nuevos datos patología viral de insectos
Perspectivas para el uso de estos patógenos
para el control de las polillas de la papa
Fuente potencial de nuevos genes de interés
para biotecnología