Document related concepts
no text concepts found
Transcript
XI CONGRESO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA Y BIOINGENIERÍA MORTALIDAD EMBRIONARIA EN OVEJAS RECEPTORAS DE EMBRIONES TRATADAS CON GnRH EN EL DIESTRO Julio Ramón Ugalde1*, Eugenia González Parra2, Victor Meza Villalvazo2, Luis Navarrete Sierra1, Alvar Cruz Tamayo4, Alfonso Aguiar Loría3, Sergio Erosa Denis3, Álvaro Domínguez Rebolledo2 1 Profesor-Investigador SIGA-ITA 2, 2Tesistas SIGA-ITA 2, 3Técnicos del CeSyRO, 4Investigador CeSyRC-SLP jramon@itaconkal.edu.mx Palabras clave: GnRH, Bisección, Transferencia de embriones la ME en etapas tempranas, probablemente al inevitable daño Introducción. En los ovinos, la transferencia de embriones que se ocasiona a algunas células al momento de realizarse la permite acortar los intervalos entre generaciones y duplicar el bisección que se considera como el principal factor de las bajas número de ejemplares de alto valor genético o en vías de tasas de gestación después de transferir medios embriones (1), extinción, por otra parte, la bisección embrionaria es una en este sentido se reporta que pueden llegar a perder hasta 6.4 técnica que permite duplicar el número de embriones originales % del total de sus células ya que entre mayor sea el número de y obtener gemelos idénticos (1), eliminando la variabilidad células viables el reconocimiento materno de la gestación será genética entre individuos. Sin embargo, la mortalidad mayor (7). Otro punto de discusión puede deberse a que los EB embrionaria (ME) es un factor limitante en la aplicación requieren un ambiente uterino diferente a los EE (1). Sin sistemática de las técnicas de micromanipulación embrionaria, embargo, no podemos descartar el importante papel que juega siendo necesario estudiar estrategias para aumentar la el CL, ya que en muchas ocasiones estas perdidas embrionarias supervivencia del embrión. En este sentido, la GnRH se deben a la regresión prematura del CL y la incapacidad de (Hormona liberadora de gonadotropinas), permite inducir y las ovejas para mantenerlos, lo cual ocurre más frecuentemente sincronizar la ovulación mejorando la fertilización y el en la gestación de EB que en la de EE (3;7). La prolificidad desarrollo embrionario (2), aumentando la supervivencia media al parto de los EB fue de 1.38 (11/8). embrionaria (3), particularmente en embriones enteros, aunque en embriones biseccionados no se sabe aún cual sería su posible efecto. Cuadro 1. Fertilidad (12 y 40 días postransferencia) y mortalidad El objetivo del presente trabajo fue evaluar la viabilidad de embrionaria (ME) de embriones enteros y biseccionados transferidos embriones enteros y biseccionados transferidos en ovejas en ovejas receptoras de embriones tratadas con GnRH en el diestro. tratadas con GnRH en el diestro. Metodología. El trabajo se realizo en el Centro de Selección y Reproducción Ovina (CeSyRO) – SIGA-ITA No. 2 de Conkal, Yucatán. Se utilizaron 40 embriones ovinos frescos en estadio de mórula compacta de los cuales 20 fueron biseccionados (EB) y 20 quedaron intactos (EE), siendo transferidos en 40 ovejas receptoras previamente sincronizadas mediante la inserción de esponjas vaginales impregnadas con 40 mg de acetato de fluorogestona (FGA; Cronogest, Intervet) durante 14 días, aplicando a la retirada de las esponjas una dosis intramuscular (IM) de 200 UI de gonadotropina coríónica equina (eCG; Foligon, Intervet). La transferencia de los embriones biseccionados (2 demi-embriones/oveja) y enteros (1/oveja) se realizó a los 7 días de la retirada de las esponjas mediante la técnica descrita por Ramón et al (4). Al momento de la transferencia 20 ovejas (10 EE y 10 EB) recibieron una dosis de GnRH decapéptida (100 µg IM; Fertagyl, Intervet). A los 12 días postransferencia (5.5 edad embrión) se tomaron muestras de sangre (5 ml) para determinar la concentración plasmática de progesterona mediante radioinmunoanálisis (RIA; estuche comercial DPC No.Catál TKPGX), siendo el coeficiente de variación intra e inter ensayo de 6.64 y 2.94%, respectivamente. A los 40 días postransferencia se realizó un diagnóstico de gestación por ultrasonido (Aloka, mod 500 SSD, sonda transrectal de 7.5 MHz). La prolificidad media (no. de corderos nacidos/no. de partos) de los EB se midió al parto. Los resultados fueron analizados mediante la prueba de Chicuadrada (5) Resultados y discusión. Los resultados de gestación y ME se pueden observar en el cuadro 1. En el se aprecia que a los 12 días de vida, existe una tasa de gestación que muestra la no existencia de diferencias entre grupos aunque se presentan algunas tendencias positivas (P<0.1) (EEGnRH vs EBGnRH; EET vs EBGnRH; y EBGnRH vs EBT), resultado de una fertilidad (70%) similar entre EEGnRH vs EBT. Sin embargo, los resultados a los 40 días postransferencia ya existen diferencias entre grupos, principalmente entre EEGnRH vs EBGnRH (P<0.01) y EET vs EBT (P<0.05). Los resultados obtenidos con EEGnRH fueron similares a los reportados por Ramón et al., (3). En este sentido, se sabe que la GnRH prolonga la vida media del cuerpo lúteo (CL) mediante la luteinización de folículos que deberían normalmente causar luteólisis y/o inducir un CL accesorio de ahí que la sobrevivencia embrionaria podría ser mejorada por el incremento de la vida media del CL permitiendo al conceptus estar sujeto a desarrollo más tiempo y secretar la señal embrionica necesaria para establecer la gestación mejorando la fertilidad (6). Por el contrario, el resultado en EB fue debido a FERTILIDAD (%) ME (%) 12 días** 40 días 10 70 70a 0 EEGnRH 10* 54 45c 16 EET 10 30 10b 33 EBGnRH 10 70 40d 42 EBT ME: ovejas no paridas / ovejas diagnosticadas gestantes x 100 * Una oveja murió a la semana de transferida. ** P<0.1 Literales diferentes en la misma columna indican diferencia significativa: a, b= P<0.01; c, d=P<0.05. TRATAMIENTO n Conclusión. Los resultados indican que la gestación y supervivencia embrionaria se ven afectadas por el proceso de bisección y que ovejas receptoras de embriones tratadas con GnRH en el diestro muestran una mayor tasa de fertilidad como consecuencia de una mayor supervivencia embrionaria. Agradecimientos. Financiado parcialmente por Intervet y Distribuciones Agropecuarias del Sureste. Bibliografía. 1. Shelton JN. 1992. Factors affecting viability of fresh and frozen thawed sheep demi- embryos. Theriogenology. 37: 713-721. 2. Karsh, FJ., Moenter, SM. and Caraty, A. 1992 The provulatory surge of gonadotropin releasing hormone. In: Modes of action of GnRH and GnRH analogs. Serono Symposia USA. 241 p. 3. Ramón, JP; Molina, L; Cruz, A; Navarrete, L; Aguiar, A; Erosa, S; Ortiz, J; González, E. 2004. Effect of a treatment with GnRH on the embryonic viability in superovulated hair ewes. 15 ICAR. Brazil. 361 4. Ramón JP; Folch, J; Fernandez-Arias, A; Alabart, JL; Cocero MJ;, Echegoyen, E. 1991. La técnica de la transferencia de embriones en el ganado ovino. ITEA. Vol. Extra 11(1):61-63 5. Statistix Versión 1.0 para Windows. 1996. Analytical Software 6. Thatcher, WW; Macmillan, KL; Hansen, PJ; y Drost, M. 1989. Concepts for regulation of corpus luteum function by the conceptus and ovarian follicles to improve fertility. Theriogenology, 31:149-164 7. Skrzyszowska, Z. and Smorag, Z. 1989. Cell loss in bisected mouse, sheep and cow embryos. Theriogenology. 32 (1): 115-122.