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CENTRO DE INVESTIGACIÓN Y DE ESTUDIOS AVANZADOS UNIDAD IRAPUATO I.P.N. BIOQUÍMICA ECOLÓGICA Víctor Olalde Portugal Agua Nutrientes - Abióticos Temperatura pH Factores que alteran la salud Plantas - Bióticos Animales Microorganismos Prácticas agronómicas afectan a la microbiota del suelo Labores al suelo Pesticidas Riego Fertilización Actividades microbianas Descomposición de residuos orgánicos Formación de humus Mejoramiento de condiciones físicas Solubilizadores de nutrientes Mejoran la absorción de agua y nutrientes Fijación de N2 Optimizadores del transporte de nutrientes y otras funcione estimuladoras (Micorriza) Control biológico Importancia de la microbiota del suelo en la incidencia de enfermedad Fusarium sp Suelo no estéril Suelo estéril 100 75 50 25 0 0 25 50 75 100 Menor incidencia 5% Mayor incidencia 70 % Bio-Inoculante La aplicación de microorganismos promueve la salud de las plantas Nutrición Fisiología Sanidad de las plantas (Bashan & Holguin, 1997; Sullivan, 2001) Bio-inoculantes Biofertilizantes Bioestimulantes Biopesticidas MZ comercial Fertilizer Productos Microbianos Bacterias Biofertilizates: Azospirillum Azotobacter Fosfobacterias Bacillus subtilis Rhizobium Hongos Biofertilizantes: Endomicorrízicos B C A D F E Bacterias Bio pesticidas: Hongos Biopesticidas: Bacillus subtilis para diferentes hongos patógenos Trichoderma Bacillus subtilis para bacterias patógenas Metarhizum Bacillus thuringiensis Paecilomyces Burkholderia Verticillium Pseudomonas Beauveria RAÍZ ACUMULACIÓN DE RESERVAS ANCLAJE AL SUELO SISTEMA DE COMUNICACIÓN ABSORCIÓN DE AGUA ABSORCIÓN DE NUTRIENTES CREACIÓN DE SUELO SOPORTE DE LA VIDA MICROBIANA FOTOSINTATOS AGUA Y MINERALES 20-30% Fotosintatos MICORRIZA MUTUALISMO ENTRE LAS RAÍCES DE PLANTAS Y HONGOS MICORRÍZICOS Clasificación taxonómica de Glomeromycota (Dirk Redecker & Arthur Schüßler & Herbert Stockinger & Sidney L. Stürmer & Joseph B. Morton &Christopher Walker, 2013) P P P P P P P P P P P P INCREMENTO EN LA SUPERFICIE DE ABSORCIÓN - Aumento en la raíz -Extensión de hifas de hongo micorrízico Agua - Hojas más turgentes -20-200% más eficientes en el uso del agua. - Más tolerancia al agobio hídrico. -Mayor control de la apertura estomática MEJOR CONTROL DE ENFERMEDADES DE LA RAÍZ Nutrientes -Mejora la incorporación de nutrientes: P, N, Ca, Zn, Cu, Mg, Mo Solo fertilizada Con micorriza - Reduce la necesidad de aplicar tanto fertilizante. BENEFICIOS EN LA PARTE AÉREA FISIOLÓGICOS - Incremento en el espesor del tejido fotosintético. - Mejora la asimilación de CO2. - Incremento en la liberación de O2 - Mayor tolerancia a la temperatura por lo tanto menor foto-respiración. - Hojas más turgentes. -Mejor control de la apertura estomática. Planta más productiva y más tolerante a la sequía BENEFICIOS EN LA PRODUCCIÓN EN GRANOS - Incremento en el tamaño de grano. - Mejor peso hectolítrico. - Incremento en rendimientos. FRUTAS Y HORTALIZAS - Mejora la vida de anaquel - Incremento en la firmeza - Colores más intensos. - Mejora los rendimientos FLORES - Mejora la vida de anaquel - Colores más intensos - Tamaños homogéneos Número Spot Descript or Matc h pI (Exp) MM (Exp) N0 accesión Nombre Probable Superóxido dismutasa Glutatión S-transferasa Ascorbato peroxidasa Estrés oxidativo 1 A3 32 6.15 0 16.20 Sb01g035350 .1 2 36 91 6.15 24.29 Sb01g005990 3 37 136 4 A22 159 5.71 6.65 3 27.78 32.13 9 Sb06g017080 Sb01g038760 .1 Ascorbato peroxidasa Síntesis, plegamiento y degradación de proteínas 4 pH 7 4 pH 7 5 40 366 6.49 74.09 Sb06g021850 6 A5 43 6.31 6 17.06 8 Sb04g035130 .1 7 A14 90 8 A15 92 6.42 3 5.84 3 24.47 6 24.50 3 Sb02g029260 .1 Sb02g029260 .1 35.99 9 Sb03g028060 .1 Aldo/ceto reductasa Sb01g003330 .1 Chalcona isomerasa Sb04g001720 .1 Proteínas choque frío domain Sb03g008950 Proteína hipotética kDa 160 80 50 40 30 25 Dominio de unión a RNA Probable 20 kDa proteínas de choque térmico 20 S Proteosoma subunidad beta 20 S Proteosoma subunidad beta Energía 9 A23 192 6.35 2 Metabolismo 20 10 A16 115 5.10 15 24.88 8 Transcripción Plantas estresadas sin micorriza Plantas estresadas con micorriza 500 “Spots” detectados 14 Proteínas aumentaron 11 A12 86 6.28 9 23.93 5 No caracterizadas 12 22 55 13 A17 120 14 A10 76 4.71 4.86 3 4.68 5 19.13 25.62 4 21.84 5 No identificada No identificada Efecto de la inoculación con hongos micorrícicos arbusculares sobre el rendimiento de plantas de trigo consorcio* Kg/ha 0 Fertilización Riegos Rendimiento Kg Infección % 211-69-00 4 5,735 33 1.5 211-34.5-00 3 5,546 20 3 211-34.5-00 3 5,614 8 5 211-34.5-00 3 5,771 7 * 2000 esporas/100 g suelo (Olalde-Portugal y col., 2000) PLANTAS DE CHILE CON PHYTOPHTHORA CAPSICI SIN MICORRIZA CON MICORRIZA (Alejo-Iturvide y col. 2007) Mecanismos de control de enfermedades asociados a la micorriza Competencia por fotosintatos del hospedero Competencia por sitios de infección Incremento en el nivel nutricional del hospedero Compensación de daño de la raíz Cambios morfológicos y fisiológicos de la raíz del hospedero Cambios en la comunidad de la micorrizósfera Antibióticos Activación de mecanismos de defensa Factores que tomar en cuenta en el uso de hongos micorrícicos Contenido de P en suelo Aplicación de urea Calidad del producto Cepa (s) del inóculo Fungicidas Genotipo de planta 22 ppm de P 28.7 µmol CO2 m-2s-1 4.04 X10-3 mmol CO2/mmol USO EFICIENTE DE AGUA 80% colonización 71 % arbúsculos 80 ppm de P 17.3 µmol CO2 m-2s-1 2.04 X10-3 mmol CO2/mmol USO EFICIENTE DE AGUA 53% colonización 0 % arbúsculos Efecto de diferentes dosis de urea sobre maíz con micorriza Tratamiento Peso seco follaje (g) % Arbúsculos Consorcio 2.50 80 Consorcio 25 U 2.54 43 Consorcio 50 U 2.28 33 Consorcio 75 U 2.12 20 Consorcio 100 U 1.79 0 Consorcio de varias especies de HMA Efecto de la cepa del Hongo Micorrízico Glomus intraradices Consorcio Fertilizante Tasa fotosintética µmol CO2 m-2s-1 Peso seco follaje (g) Fósforo ppm 21.3 2.9 0.45 29.8 6.3 1.03 17.1 1.7 0.29 SEMILLA CHAROLAS FERTILIZANTE AL TRASPLANTE COMPOSTAS RIEGOS POR GOTEO - Mejoran la estructura de la raíz. - Incrementan la nutrición de nitrógeno. - Mejoran el desarrollo de la planta. - Reducen la aplicación de fertilizante nitrogenado. FOSFOBACTERIAS Mejoran la solubilidad del fósforo del suelo lo hacen disponible Tri-cálcico Al Fe En suelos con pH entre 6-7 el cultivo toma 15% si se aplica al voleo y 30% en banda. En suelos ácidos o alcalinos el 5% al voleo y 15% en banda. CONSIDERACIONES: - La fertilización con N - Niveles de fósforo - Algunos micronutrientes. - Planta con la que se asocian. - Humedad del suelo. - CONOCIMIENTO DE LA CEPA Si el suelo es deficiente en Mo, Zn, Fe será necesario aplicarlos. Bacillus subtilis MZ Comercial MZ Fertilizado Comercial auxinas síntesis moléculas catiónicas (moléculas señal) Bacillus vías de transducción de señales aminoácidos etileno influjo IAA IAA aminoácidos SAM síntesis ACC sintasa transporte polar ACC eflujo receptor ACC ACC deaminasa ACC oxidasa etileno receptor exu dado aminio y α-ketobutirato PGPR EIN 2 genes de respuesta temprana y tardía elongación de raíz EIN 3 EIL 2 raíz de la planta respuesta Respuesta: disminución en la elongación de la raíz principal. incremento en el número de raíces laterales. incremento en la longitud total de la raíz. modificación en el desarrollo de pelos radiculares. COMPETENCIA POR NUTRIENTES SIDEROFOROS catecol (enterobactin) Hidroxamate (ferrichromo) (Chet 1988, Conn 1997 ) ANTIBIOSIS ITURINA Bacillus subtilis FENAZINA Pseudomonas flourescens AMENSALISMO HCN Pseudomonas fluorecens strain Ps123 Thielaviopsis basicola NH4 + Enterobacter cloacae Pythium ultimum Enzimas líticas rompimiento -1-4 Resistencia sistémica inducida Bacillus mycoides strain Bac J betabel Bacillus subtilis GB03 y IN937a Arabidopsis Pseudomonas fluorescens WCS417 clavel Pseudomonas fluorescens CHA0 tabacco Peroxidasa, quitinasas y β-1,3-glucanas 2,3-butanediol Lipopolisacarido Sideroforos T r i c h o d e r m a CRITERIOS QUE DEBE CUMPLIR UN “AGENTE ANTAGONICO IDEAL” Presentar estabilidad genética. No tener requerimientos nutricionales complejos. Actuar efectivamente a concentraciones bajas. Ser capaz de sobrevivir bajo condiciones ambientales adversas. No producir daño en el hombre y a otros organismos. Ser compatible con tratamientos físicos y químicos. No ser patógeno contra la planta. Enfermedades causadas por hongos • ROYA DE LA HOJA ( Roya café) Puccinia recondita • Roya del tallo (roya negra) Puccinia graminis f. sp. tritici • Roya lineal (roya amarilla) Puccinia striiformis Fusarium graminearum • Manchas foliares causadas por Fusarium (moho blanco) • Calonectria nivalis (Fusarium nivale) Fusarium en raíz APLICACIÓN (INOCULACIÓN) Con microorganismos Convencional CON MICORRIZA SIN MICORRIZA CON Bacillus subtilis para control de Fusarium CUIDADOS EN EL USO DE MICROORGANISMOS BACTERIAS - No aplicar a plena luz del sol. No aplicar con antibióticos. No aplicar con cobres. Se requiere a veces adherente. HONGOS - No aplicar con fungicida. HONGO MICORRÍZICO Contenido de P en suelo Aplicación de urea Calidad del producto Cepa (s) del inóculo