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www.biox.com TEST ELISA RESPIRATORIO BIO K 028 Las afecciones respiratorias suponen un problema preocupante para los bovinos dada su frecuencia y el elevado número de animales que las sufren. Estas afecciones se encuentran en todos los países en los que se practica un sistema de ganadería intensivo, el cual implica el agrupamiento de un gran número de animales en espacios muy limitados. La etiología de estas afecciones es multifactorial, lo cual complica la patogenia así como el tratamiento. Los agentes virales y bacterianos, unidos a un estado de estrés provocado por desplazamientos en vehículos sobrecargados, el mantenimiento de los animales en establos mal acondicionados o mal ventilados, juegan un papel importante en la aparición de afecciones respiratorias agudas. Estas afectan más particularmente a los animales jóvenes aunque también pueden aparecer en los adultos. En la mayoría de casos, los animales que padecen afecciones respiratorias albergan varios agentes patógenos, algunos de los cuales actúan en sinergia. Así pues, se reconoce que generalmente los virus son los primeros agentes en intervenir y que las bacterias actúan como segundo invasor, acentuando la patología. La fiebre del transporte, « shipping fever », es un buen ejemplo de la sinergia de acción que puede existir en el árbol respiratorio entre un virus, el PI3, y una bacteria como la Pasteurella. El kit ELISA respiratorio de Bio-X permite evaluar la respuesta inmunitaria humoral de los bovinos contra 5 agentes implicados muy frecuentemente en estas afecciones respiratorias. Estos son el virus de la rinotraqueítis infecciosa bovina (IBR o BHV-1), el virus de la enfermedad de las mucosas (VDVB), el virus respiratorio sincicial bovino (BRSV), el virus Parainfluenza 3 (PI3) y el adenovirus tipo 3. Protocolo 1 – El anticuerpo monoclonal está fijado en la microplaca y captura el virus inactivado. 2 – Añadir las muestras séricas y el control postivo. Incubar 1 hora a 21°C +/-3°C. Lavar la placa. 3 – Añadir el conjugado. Incubar 1 hora a 21°C +/3°C. Lavar la placa. 4 – Añadir la mezcla cromógeno + Substrato. Esperar 10 minutos. Añadir la solución de interrupción. Leer a 450 nm. Utilización del kit El kit está concebido para seguir las seroconversiones en sueros pareados. Fiabilidad de los resultados La utilización de un anticuerpo monoclonal como conjugado garantiza una especificidad excelente y la obtención de resultados muy fiables. La utilización de anticuerpos monoclonales para purificar los virus en la placa permite obtener también una excelente especificidad. Facilidad de uso Se requiere poca manipulación. Incubación a temperatura ambiente. Resultados disponibles en un máximo de 140 minutos. Anticuerpo monoclonal anti-IgG1 bovinos acoplado a la peroxidasa Suero de bovino Virus Anticuerpo monoclonal de captura Bio-X Diagnostics Site du complexe des Postes 49, rue Joseph Wauters BE-5580 Jemelle BELGIUM (Europe) Tel: +32 (0)84.32.23.77 Fax: +32 (0)84.31.52.63 E-mail: info@biox.com http://www.biox.com www.biox.com Ejemplo de resultados – BHV1 BHV1 vaccination 3000 Optical density Un grupo de 9 terneros de aproximadamente 5 meses de edad se ha dividido en 2 grupos. El primero (n = 4) no está vacunado. El segundo (n = 5) está vacunado con una vacuna inactiva comercial. Antes de la vacunación, se ha extraído sangre a los 9 terneros. Tras la segunda vacunación, se les ha vuelto a extraer sangre. Los sueros pareados han sido analizados con el kit BIO K 028 de Bio-X Diagnostics. Control Vaccinated 2500 2000 before 1500 after 1000 500 0 Calf Calf Calf Calf 1 2 3 4 Calf Calf Calf Calf Calf 5 6 7 8 9 Calves number Ejemplo de resultados –BVDV Naturally contaminated group 3000 Optical density Debido al contacto con un animal inmunotolerante infectado de manera persistente, un grupo de 4 terneros de 3 a 5 meses de edad presenta una seroconversión natural. Un grupo centinela de 6 animales de 3 a 9 meses de edad ha servido como grupo de control. Los sueros de los 10 terneros se han extraído con un intervalo de 3 semanas. Los sueros pareados se han analizado con el kit BIO K 028 de Bio-X Diagnostics 2500 2000 Before 1500 After 1000 500 0 Calf 7 Calf 8 Calf 9 Calf 10 Calves numbers Control group Optical density 3000 2500 2000 Before 1500 After 1000 500 0 Calf 1 Calf 2 Calf 3 Calf 4 Calf 5 Calf 6 Calves numbers Bio-X Diagnostics Site du complexe des Postes 49, rue Joseph Wauters BE-5580 Jemelle BELGIUM (Europe) Tel: +32 (0)84.32.23.77 Fax: +32 (0)84.31.52.63 E-mail: info@biox.com http://www.biox.com www.biox.com Ejemplo de resultados –BRSV Vaccinated group 2500 Optical density Un grupo de 12 terneros de unos 8 meses de edad se ha dividido en 2 grupos. El primer grupo ha sido vacunado con una vacuna inactiva comercial. El segundo no ha sido vacunado. Antes de la vacunación se les ha extraído sangre a los 12 terneros. Después del recuerdo de vacunación, se les ha extraído sangre nuevamente. Los sueros pareados se han analizado con el kit BIO K 028 de Bio-X Diagnostics. 2000 1500 Before After 1000 500 0 Calf 7 Calf 8 Calf 9 Calf 10 Calf 11 Calf 12 Calves numbers Control group 3000 Optical density 2500 2000 Before 1500 After 1000 500 0 Calf 1 Calf 2 Calf 3 Calf 4 Calf 5 Calf 6 Calves numbers Bio-X Diagnostics Site du complexe des Postes 49, rue Joseph Wauters BE-5580 Jemelle BELGIUM (Europe) Tel: +32 (0)84.32.23.77 Fax: +32 (0)84.31.52.63 E-mail: info@biox.com http://www.biox.com www.biox.com Ejemplo de resultados – PI3 Vaccinated group 3000 Optical density Un grupo de 12 terneros de unos 6 meses se ha dividido en 2 grupos. El primer grupo ha sido vacunado con una vacuna inactiva comercial. El segundo no ha sido vacunado. Antes de la vacunación se les ha extraído sangre a los 12 terneros. Después del recuerdo de vacunación, se les ha extraído sangre nuevamente. Los sueros pareados se han analizado con el kit BIO K 028 de Bio-X Diagnostics 2500 2000 Before 1500 After 1000 500 0 Calf 7 Calf 8 Calf 9 Calf 10 Calf 11 Calf 12 Calves numbers Not vaccinated group Optical density 3000 2500 2000 Before After 1500 1000 500 0 Calf 1 Calf 2 Calf 3 Calf 4 Calf 5 Calf 6 Calves numbers Ejemplo de resultados – Adenovirus 3 Naturally contaminated group 3000 Optical density 2500 2000 Before After 1500 1000 500 0 Calf 1 Calf 2 Calf 3 Calf 4 Calf 5 Calf 6 Calves numbers Bio-X Diagnostics Site du complexe des Postes 49, rue Joseph Wauters BE-5580 Jemelle BELGIUM (Europe) Tel: +32 (0)84.32.23.77 Fax: +32 (0)84.31.52.63 E-mail: info@biox.com http://www.biox.com (BHV1 - BVDV - BRSV - PI3 - Adenovirus 3) 2 2 1 1 1 1 1 1 placas de 6 varillas con un total de 32 tests frascos de suero positivo de referencia frasco de conjugado botella de solución de lavado botella de tampón de dilución frasco cuenta-gotas de cromógeno botella de solución substrato botella de solución de interrupción 1 año de estabilidad a 4°C Bio-X Diagnostics Site du complexe des Postes 49, rue Joseph Wauters BE-5580 Jemelle BELGIUM (Europe) Tel: +32 (0)84.32.23.77 Fax: +32 (0)84.31.52.63 E-mail: info@biox.com http://www.biox.com www.biox.com Control Adeno 3 PI3 BRSV BVDV BHV-1 Control Adeno 3 PI3 BRSV BVDV BHV-1 BIO K 028 KIT ELISA RESPIRATORIO