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Análisis micrográfico cualitativo de 8 especies de drogas vegetales empleadas en la medicina popular paraguaya como antiinflamatorias y comercializadas en los mercados de Asunción, San Lorenzo, Luque, Paraguari y Caacupé. Degen de Arrúa, R., González, Y., Delmás de Rojas, G. & González de García, M. Departamento de Botánica, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Asunción; rdegen@qui.una.py RESUMEN: Se estudiaron los caracteres morfológicos y anatómicos que revisten valor diagnóstico, de 8 especies de plantas utilizadas como antiinflamatorias en la medicina popular paraguaya, comercializadas en los mercados. Se presenta un cuadro comparativo con los elementos histológicos de diagnósticos y parámetros de cada especie, para el control de calidad cuando la droga se halle entera o fragmentada. Palabras clave: planta medicinal, antiinflamatorias, control de calidad. SUMMARY: The morfologycal and anatomical characteristics of the 8 species of plants wich is used in folk medicine paraguaian as antiinflamatory commercialised in market have been studied. The micrographic parameters table is presented and it will permit the quality control of the raw material, fragmentary. Key Works: medicinal plant, antiinflamatory, control quality INTRODUCCIÓN La OMS recomienda que se establezcan criterios científicos y métodos que aseguren la calidad y eficacia de las preparaciones obtenidas a partir de plantas medicinales, a través de la aplicación de patrones internacionales y especificaciones de identidad y pureza, y el desarrollo de métodos para un uso seguro y eficaz de los productos fitoterapéuticos. Uno de los pasos iniciales para el control de calidad de una droga vegetal es la definición de características farmacobotánicas con la descripción macro y microscópica de la parte de la planta utilizada como medicinal, y de los grupos de sustancias químicas, a la hora de identificar una materia prima vegetal o un preparado fitoterápico (Souza, T. J., 2005) En nuestro país, al igual que en casi todos los países de América Latina, la falta de herramientas que permitan la identificación de las especies vegetales empleadas por la población, es una constante. Si bien es cierto, en los últimos años ha aumentado la publicación de trabajos tendientes a proporcionar elementos morfoanatómicos, grupos químicos, etc. que ayuden a garantizar a la población la identidad de la planta que está consumiendo; aun queda mucho por hacer en este campo. Como antecedentes se pueden mencionar los trabajos de Ortiz, M. & G. Delmás, 1997 que describen los caracteres anatómicos de tres especies empleadas en la medicina folklórica paraguaya; y González, Y. & R. Degen, 2007 han reportado los caracteres macroscópicos y microscópicos de diagnóstico para la identificación de cuatro especies de la familia Cyperaceae comercializadas con el nombre común de “kapi’i kati”. Podría decirse que para identificar una planta medicinal, las herramientas brindadas por la taxonomía son suficientes, lo cual es cierto cuando se trata de la planta entera provista de flor y/o fruto. Para uso medicinal en Paraguay se emplean plantas frescas y desecadas; estas pueden estar elaboradas en forma de droga cortada o polvo grueso, comercializadas en bolsitas o en saquitos destinados a la preparación en forma de decocción o infusión. (Degen, R. et al. 2004). Por ejemplo; se emplean los rizomas frescos de kapi’i kati como refrescante (González, D., 1992), las hojas de eucalipto, Eucalyptus sp., se emplean como antiasmático (Basualdo, I. et al. 2004) por citar algunas. Al contar solo con una parte de la planta, la taxonomía poco o nada puede aportar para identificar una especie vegetal. Es allí donde la micrografía vegetal cobra gran importancia, ya que no solo aporta los parámetros histológicos que caracterizan a la planta o parte de la planta empleada como medicinal, sino también permite incluso la identificación y caracterización de polvos vegetales, forma en la que también se presentan en el mercado las plantas medicinales. Este artículo se presenta dentro del marco del Proyecto “Un aporte para el control de calidad de drogas de origen vegetal: análisis micrográfico de drogas vegetales empleadas en la medicina popular paraguaya como antiinflamatorias y comercializadas en los mercados de Asunción, Luque, San Lorenzo, Paraguari y Caacupé”, que fuera seleccionado para su financiamiento por la Dirección General de Investigación Científica y Tecnológica, de la Universidad Nacional de Asunción en el año 2008. El objetivo de este trabajo, es aportar parámetros macro y micrográficos cualitativos de 8 especies de drogas vegetales reportadas como antiinflamatorias en el mencionado proyecto. MATERIALES Y METODOS Se realizaron salidas periódicas a los mercados de Asunción, San Lorenzo, Luque, Caacupé y Paraguari para la compra de muestras. En los mismos se consulto con los vendedores cuales son las plantas empleadas como antiinflamatorias. Se registró el nombre de los informantes y se elaboró un listado de las plantas reportadas. Las muestras fueron determinadas taxonómicamente. Aquellas plantas que eran estériles y que se comercializaban en estado fresco fueron cultivadas en el Jardín de Aclimatación de Plantas Medicinales de la Facultad de Ciencias Químicas, para su posterior identificación. De las muestras que se encontraban con flor y/o fruto se realizaron ejemplares de herbario, que fueron introducidos en el Herbario FCQ de la misma Facultad. Todas las muestras obtenidas (estériles, no estériles, frescas, secas o en forma de polvo) fueron acondicionadas en frascos de vidrio, etiquetadas, numeradas e introducidas dentro de la colección de plantas medicinales del Herbario FCQ. Además, una pequeña porción de cada una de las muestras fue fijada en FAA, para su posterior análisis micrográfico. Luego del análisis del listado de muestras obtenidas, y de la consulta bibliográfica, se seleccionaron 8 de las plantas más reportadas como antiinflamatorias, para su estudio morfoanatómico. De las muestras seleccionadas se realizaron observaciones macroscópicas con la Lupa Olympus BHK. Luego se realizaron cortes transversales a mano alzada, y en el caso de las hojas se realizó el levantamiento de la epidermis; se observaron al microscopio y se eligieron los de grosor adecuado para su posterior montado con una mezcla de glicerina-gelatina. Los cortes seleccionados fueron observados al microscopio, fotografiados y posteriormente descriptos. Para la observación microscópica se empleó el microscopio BOECO y las fotografías fueron tomadas con la cámara digital Canon Power Shot A650. RESULTADOS En total se han reportado 35 especies que corresponden a 27 familias, comercializadas como antiinflamatorias en los mercados visitados. De estas se han seleccionado 8 de las más frecuentes, y a continuación se describen los resultados del análisis macro y micrográfico de las mismas: 1- AGRIAL, Begonia cucullata Willd. (Begoniaceae) Caracteres macroscópicos Se emplea la parte aérea de la planta, que se comercializa fresca en macitos que miden entre 15-30 cm . Los tallos son de color rojizo, lisos y brillantes; hojas de color verde claro brillante, de forma redondeada, palmatinervias, borde crenado o entero, pecíolo más o menos largo. A veces se presentan con flores de color blanco y frutos capsulares divididos en 3 partes. Caracteres microscópicos Superficie foliar: células epidérmicas de bordes más o menos ondulados, estomas de tipo anisocítico en ambas epidermis. Sección transversal de la hoja: epidermis superior e inferior uniestratificadas, con cutícula más o menos gruesa. Mesófilo de tipo dorsiventral, con una hilera de células en empalizada. Cristales prismáticos y drusas, abundantes en todo el mesófilo (Fig. 1). Sección transversal del tallo: células epidérmicas uniestratificadas, 2-3 hileras de colénquima. Las células del parénquima cortical y medular son redondeadas, conteniendo cristales de oxalato de calcio de forma rómbica y drusas. Casquetes de fibras esclerenquimáticas sobre los haces vasculares que se disponen en bandas discontinuas unidos por células parenquimáticas poligonales y compactas. Células floemáticas hacia fuera y los vasos xilemáticos dispuestos en forma radiada. 2- AMBA’Y, Cecropia pachystachya Trecúl (Cecropiaceae) Caracteres macroscópicos La parte empleada es la hoja que se presenta en macitos de 10-20 cm generalmente sin el pecíolo. La hoja tiene forma palmada- lobulada de color verde oscuro en el haz y blanquecino en el envés. Levemente coriácea al tacto en el haz por la presencia de pequeñas protuberancias; aterciopelada en el envés por los pelos que presenta. Caracteres microscópicos Superficie foliar: células epidémicas poligonales, de bordes rectos, estomas anomocíticos en la epidermis inferior; tricomas glandulares con 8-16 células basales en la epidermis superior. Sección transversal de la hoja: La epidermis superior presenta por debajo una hipodermis, con células más agrandadas en hojas adultas y casi del mismo tamaño en hojas jóvenes; cutícula gruesa; se observan además tricomas glandulares. La epidermis inferior uniestratificada con abundante cantidad de pelos largos, delgados y ondulados. Mesófilo de tipo dorsiventral, con células en empalizada, compactas, delgadas y alargadas. Abundantes cristales de oxalato de calcio en forma de drusas (Fig. 2). 3- LLANTÉN, Plantago tomentosa Lam. (Plantaginaceae) Caracteres macroscópicos Se emplea la planta entera que se comercializa en macitos de 15-20 cm. La raíz de color marrón claro tipo pivotante con raicillas secundarias, las hojas nacen de la base en forma de roseta, son de color verde claro, paralelinervias, alargadas y aovadas, envainadoras, pecíolo decurrente. Caracteres microscópicos Superficie foliar: en ambas epidermis se observan estomas de tipo diacítico y anomocítico (4-5 células acompañantes) (Fig. 3), células epidérmicas poligonales de bordes más o menos rectos. Sección transversal de la hoja: ambas epidermis uniestratificadas, con pelos eglandulares pluricelulares de gran tamaño en ambas epidermis, con base globosa de forma cónica; pelos glandulares abundantes, de base uni-bicelular y cabeza bicelular en ambas epidermis. Mesófilo de tipo dorsiventral, con empalizada en 2-3 hileras, con espacios intercelulares; parénquima esponjoso con 4-5 estratos de células. Sección transversal de la raíz: súber evidente de color pardo, parénquima cortical con células redondeadas, varias hileras; células esclerenquimáticas presentes, floema separado del xilema por el cambium, vasos del xilema dispuestos radialmente junto con células parenquimáticas; en el centro el parénquima medular de células redondeadas. En corteza y médula gran cantidad de almidón, dispuestos en grupos separados unos de otros. 4- MALVA, Sida cordifolia L. (Malvaceae) A- Sumidad florida Caracteres macroscópicos La parte empleada son las ramas superiores con hojas y flores, se presenta en macitos de 20-35 cm. Los tallos y hojas presentan una abundante pubescencia con pelos de color blanco. Las hojas son de color verde claro, de borde aserrado, ápice acuminado. Las flores con pétalos de color amarillo pálido. Caracteres microscópicos Superficie foliar: estomas de tipo anisocítico. Sección transversal de la hoja: epidermis superior e inferior con una sola hilera de células. Pelos eglandulares unicelulares, estrellados con cistolitos en la base (Fig. 4); pelos glandulares de base y cabeza bicelular, otros de base pluricelular y cabeza unicelular. Mesófilo simétrico, con empalizada superior en 3-4 hileras y la inferior con 2-3, parénquima lagunar 3-5 hileras de células. En todo el mesófilo abundante cantidad de cristales de oxalato de calcio en forma de drusas. Sección transversal del tallo: epidermis uniestratificada, abundantes pelos eglandulares unicelulares estrellados con cistolito en la base, colénquima en 2-3 hileras, parénquima cortical y medular con células redondeadas; los haces vasculares dispuestos radialmente en forma de anillo continuo, con floema hacia fuera y xilema por dentro, con fibras esclerenquimáticas. Abundantes drusas. B- Raíz Caracteres macroscópicos Se comercializa la raíz fresca en macitos de 15-20 cm, o seca en bolsitas de plástico. La raíz es de color marrón claro, delgada y fibrosa; generalmente la corteza se halla desprendida de la médula. Caracteres microscópicos Sección transversal de la raíz: súber, parénquima cortical con gran cantidad de drusas; se observan fibras que corresponden a extensiones de los radios medulares; por debajo floema; en los radios medulares los vasos del xilema dispuestos en forma aislada o agrupada; rodeados por fibras esclerenquimáticas. 5- TAPE KUÉ, Acanthospermum australe (Loef.) O. K. (Asteraceae) Caracteres macroscópicos Se emplea la planta entera, que se comercializa fresca en macitos de 20-30 cm, las hojas son pequeñas de color verde claro, rómbico-ovadas, de bordes aserrados, los tallos delgados y pubescentes, de color verde más claro que las hojas, raíces marrón claro, de poco grosor, con algunas raíces secundarias. Frutos fusiformes espinescentes. Caracteres microscópicos Superficie foliar: estomas de tipo anomocítico, con hasta 5 células acompañantes; células epidérmicas de bordes ondulados. Sección transversal de la hoja: ambas epidermis uniestratificadas, con células más engrosadas las de la epidermis superior; tricomas eglandulares pluricelulares escasos en ambas epidermis, también pelos glandulares de cabeza unicelular, y en forma de copa con cabeza bicelular formando una pequeña depresión, en la superficie foliar. Mesófilo de tipo dorsiventral, empalizada con una hilera de células, parénquima esponjoso con 5-7 estratos celulares (Fig. 5) Sección transversal del tallo: epidermis con tricomas eglandulares pluricelulares, y pelos glandulares de cabeza unicelular; colénquima lagunar con 4 estratos celulares; parénquima cortical y medular con células redondeadas, fibras esclerenquimáticas en la corteza con floema por debajo, luego cámbium y los vasos xilemáticos; estos haces vasculares están dispuestos en bandas discontinuas unidos por el cámbium interfascicular. 6- TORO RATI , Acanthospermum hispidum DC. (Asteraceae) Caracteres macroscópicos Se emplea la planta entera, que se comercializa fresca en macitos de 20-30 cm, las hojas, son pequeñas de color verde claro, ovadas o deltoides ovadas, de ápice agudo, de base cuneiforme, de bordes aserrados, los tallos delgados, de color verde más claro que las hojas, raíz marrón claro, de poco grosor, con algunas raíces secundarias. Frutos cuneiformes, comprimidos, cubierto de espinas ganchudas, de las cuales dos sobresalen en forma divergente a manera de cuernos. Caracteres microscópicos Superficie foliar: ambas epidermis con células de bordes ondulados y estomas de tipo anisocítico. Sección transversal de la hoja: ambas epidermis uniestratas, tricomas eglandulares pluricelulares (Fig. 6), largos y cortos formados por 3-7 células, tricomas glandulares con cabeza unicelular en forma de copa. Mesófilo de tipo dorsiventral, empalizada con una hilera de células, parénquima esponjoso con 5-7 estratos celulares. Sección transversal del tallo: epidermis uniestratificada, tricomas eglandulares pluricelulares largos y cortos formados por hasta 11 células, colénquima lagunar con 3 estratos celulares, parénquima cortical con fibras esclerenquimáticas, floema por debajo, cámbium y xilema en los radios medulares dispuestos en forma discontinua, unidos por el cámbium interfascicular; en el centro parénquima medular. 7- URUSÚ HE’E, Rhynchosia edulis Griseb. (Fabaceae) Caracteres macroscópicos La parte empleada es la raíz, que se presenta fresca en macitos, o seca en bolsitas de plástico. La raíz es de color amarillo, la principal suele ser gruesa y fibrosa, las secundarias delgadas y largas. Caracteres microscópicos Sección transversal de la raíz: súber con células aplanadas en varias capas, parénquima cortical con almidón, fibras esclerenquimáticas, floema, cámbium y radios medulares con vasos del xilema de gran tamaño rodeados por células esclerenquimáticas; radios parenquimáticos secundarios interfasciculares y cristales de oxalato de calcio dispuestos en bandas en las células anexas a los vasos; en el centro grandes células parenquimáticas redondeadas conteniendo gran cantidad de almidón. 8- YSYPÓ PERÉ, Cuphea lysimachioides Cham. & Schltdl. (Lythraceae) Caracteres macroscópicos Se comercializa el xilopodio fresco en macitos de 6-10 cm, o seco en bolsitas. Es de color negro, amorfo, puede estar en pequeños trozos o un solo trozo grande. Caracteres microscópicos Sección transversal de la raíz: se distingue súber, epidermis, parénquima cortical, floema, cámbium; radios medulares con fibras y células parenquimáticas rectangulares y cuadradas conteniendo abundante almidón; disposición de haces tipo tetrarca; los vasos del xilema se agrupan en el centro rodeados de fibras esclerenquimáticas. Gotas de esencia y drusas en todo el corte. CONCLUSIÓN Las 8 especies seleccionadas para su estudio presentan caracteres exomorfológicos y anatómicos característicos a partir de los cuales es posible identificarlas. Estos se resumen en la Tabla 1. En conclusión, a través del presente trabajo se han aportado parámetros macro y micrográficos como herramientas para la identificación de especies vegetales y como una contribución de los elementos necesarios para la realización el control de calidad de las mismas, garantizando la correcta identidad de la planta medicinal, siendo una contribución por un lado a la población que las consume directamente y por otro lado a las industrias que las emplean como materia prima para la elaboración de productos derivados de ellas o fitoterápicos. AGRADECIMIENTOS Los autores expresan su gratitud al Prof. Dr. A. Amarilla, por el apoyo y estimulo constante en las investigaciones botánicas; a la Dirección General de Investigación y Tecnología-UNA por el subsidio concedido para la realización de este trabajo. BIBLIOGRAFÍA BASUALDO, I. et al. 2004. Plantas medicinales comercializadas en los mercados de Asunción y Gran Asunción. Parte I. Rojasiana Vol. 6 (1):95-114. DEGEN, R. et al. 2004. Comercialización y conservación de especies vegetales medicinales en Paraguay. Revista de Fitoterapia Vol. 4 Nº 2:129-137. GONZÁLEZ T., D. 1992. Catálogo de Plantas Medicinales (y Alimenticias y útiles) usadas en Paraguay. Asunción. 456 pp. GONZÁLEZ, Y. & DEGEN, R. 2007. Morfoanatomía comparativa de las especies empleadas en la medicina popular paraguaya como “kapi’i kati ”. XV Jornadas de Jóvenes Investigadores – Asociación de Universidades Grupo Montevideo (AUGM) 24, 25 y 26 de octubre 2007. ORTIZ, M. & DELMÁS DE ROJAS, G. 1997. Anatomía foliar de tres especies utilizadas en la medicina folklórica paraguaya. Rojasiana Vol. 4(1):1-10. SOUZA, T. J. 2005. Análise Morfo-Histológico e Fitoquímica e Verbena litoralis Kunth. Acta farmacéutica bonaerense 24 (2):209-214.