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1) MICROBIOLOGÍA MICROORGANISMOS.- Grupo de organismos muy heterogéneo, que tienen en común las siguientes características: • Poseen un tamaño muy pequeño y solo son visibles con ayuda del microscopio, de ahí su nombre. • Tienen un metabolismo muy acelerado. • Se multiplican a gran velocidad. • Debido a su pequeño tamaño, se difunden con suma facilidad, por lo que se les encuentra diseminados por todas las partes. Clasificación de los microorganismos: • Virus. • Reino Monera (Dominio Bacteria) • Reino protoctista = protista (Protozoos + Algas) • Reino Hongos. Los VIRUS son microorganismos ultramicroscópicos, solo visibles con el microscopio electrónico. No tienen organización celular, carecen de metabolismo propio y no pueden reproducirse por sí solos; para poder hacerlo necesitan de otro organismo, por ello se dice que son parásitos obligados. No pertenecen a ninguno de los cinco reinos, se sitúan en el límite entre lo vivo y lo inerte. REINO MONERA: Organismos unicelulares de organización procariota. Pueden ser anaerobios y aerobios. Algunos son autótrofos y otros heterótrofos. Aquí se incluyen las bacterias. • Bacterias gram negativas: Cianobacterias, bacterias rojas y verdes. • Bacterias gram positivas: • Micoplasma. • Arqueobacterias. REINO PROTOCTISTA = PROTISTA: Organismos unicelulares de organización eucariota. Aquí se incluyen: • Algas unicelulares, que son organismos autótrofos con pared celular. • Protozoos, que son organismos heterótrofos, sin pared celular. REINO HONGOS: Organismos unicelulares y pluricelulares heterótrofos, que no forman verdaderos tejidos (talofitas). Sus células tienen una pared celular formada por quitina y, como reserva energética, utilizan glucógeno. Solamente algunos hongos, como las levaduras y los mohos, son considerados microorganismos. 2) TÉCNICAS para el estudio de los microorganismos. Para llevar a cabo el estudio y la clasificación de los microorganismos, se utilizan diversas técnicas, que podemos reunir en tres grupos: técnicas clásicas, técnicas numéricas, y técnicas genéticas o moleculares. TÉCNICAS CLÁSICAS: Constituyen el método utilizado durante más de cien años. Permiten observar características estructurales y morfológicas que sirven para identificar a los microorganismos. También permiten reconocer otras características no morfológicas que servirán para reconocer al microorganismo, tales como la composición de la cápsula, requerimientos nutritivos, fuentes de carbono, nitrógeno y azufre, necesidades gaseosas, requerimientos y tolerancias de temperatura y pH, etc. En este grupo se incluyen entre otras las siguientes: • Microscopía. • Preparación de cultivos. • Técnicas de tinción (tinción simple, diferencial, etc. • Inoculación a animales de experimentación. • Pruebas serológicas. Ejemplo de técnica de tinción diferencial: MÉTODO GRAM • Se prepara un frotis de un cultivo y se fija por el calor. • Se tiñe con solución de cristal violeta durante uno o dos minutos. • Se aplica solución iodo-iodurada (lugol) durante un minuto. • Se lava con alcohol de 95% (decolorante) durante 30 segundos. • Se lava con agua y, luego, se tiñe con un colorante de contraste (safranina de color rojo), durante un minuto. • Se lava con agua, se seca y se observa al microscopio. Este método permite dividir a las eubacterias en dos grupos: gram + (teñidas de color violeta) y gram (teñidas de color rojo). TÉCNICAS NUMÉRICAS.- Tienen en común con la anterior que con ellas se determina sistemáticamente un gran número de características. Pero, en lugar de reconocer los datos más o menos aleatoriamente, se utiliza la base de datos de un ordenador para comparar todas las características del organismo con las de los restantes. TÉCNICAS GENÉTICAS o MOLECULARES.- Se basan en identificar el patrón genético del microorganismo. Estas técnicas comparan las secuencias de bases del ADN del microorganismo a identificar con la de un patrón.