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Virosis, sintomatología y manejo POR MARTA E. RODRÍGUEZ SANHUEZA Ing. Agrónomo Entomología - Prod. Insectos Benéficos mrodriguez@biobichoschile.cl Estatus Sanitario Apícola en Chile Enfermedad Agente Estatus Nosemosis Nosema apis Presente Acariosis + Acarapis woodi Presente Varroasis + Varroa destructor Presente Loque europeo + * Mellissococcus pluton Presente Loque americano + Paenibacillus larvae larvae Presente Pequeño escarabajo de la colmena + Aethina tumida Ausente Acariosis asiática + Tropilaelaps clareae Ausente Fuente SAG 2011: www.sag.cl Virus de las abejas ARN ss Orden Picornavirales •Pequeñas partículas •Bajo microscopia electrónica estos virus aparecen como esferas sin rasgos distintivos, lo que no permite diferenciarlos uno de otro. •Algunos de ellos tienen nombres descriptivos, los cuales sugieren síntomas específicos asociados a la infección lo que puede ser usado para su reconocimiento o diagnostico de campo. Vías internas de transmisión de los virus Principales Virus de las Abejas 1) Virus de la Cría Saciforme (Sacbrood Virus, SBV) 2) Virus de las Alas Deformadas (Deformed Wing Virus, DWV) 3) Virus de Kashemira (KBV) 4) Virus de la Parálisis Aguda (Acute Paralysis Virus, ABPV) 5) Virus de la celdilla Negra de la Reina (Black Queen Cell Virus (BQCV) 6) Virus de la Parálisis Crónica (Chronic Paralysis Bee Virus, CBPV) Virus de la Cría Saciforme (SBV) Ataca a abejas adultas y larvas jóvenes (2 a 3 días) a través de la ingesta de alimento contaminado con partículas virales. SBV afecta a la cría de la abeja, lo que resulta en la muerte de las larvas poco después de ser operculadas y antes de su transformación en pupa. Cambio de color en larvas A temperatura ambiente el virus pierde su poder patógeno en tres semanas, así como en agua caliente (60°C) y en miel (70°C), en diez minutos. Virus de las Alas Deformadas (Deformed Wing Virus, DWV) Inicialmente, este virus fue aislado desde abejas adultas Apis mellifera colectadas desde colonias infestadas con Varroa destructor, en Japón y ha sido detectado también en otras partes de Asia, Europa, África y mas recientemente en Canadá y en los USA. Vías de Transmisión Huevo Larvas Pupas Adultos Síntomas Parálisis y malformación de alas, acortamiento e hinchazón del abdomen y perdida de color. La infección se lleva a cabo durante el desarrollo pupal o cuando el acaro varroa actúa como vector biológico lo que permite que DWV se pueda replicar en tejidos que aun se están formando Virus de la celdilla Negra de la Reina (BQCV) Originalmente fue detectado en larvas y pupas de reinas muertas, y según diferentes reportes, su patogénesis esta muy asociada a la infestación con Nosema apis En Australia, es la mayor causa de mortalidad de larvas. En Francia el virus ha sido detectado en adultos y pupas de colonias de abejas sanas analizadas. También existen reportes de su presencia en apiarios de Austria recientemente en España. Esporas de N. apis Su transmisión puede producirse por la ingesta de partículas virales en abejas adultas y larvas y su replicación se acelera en abejas adultas infestadas con N. apis. Se cree que la infección con este microsporidio incrementa la susceptibilidad del tracto alimentario para la infección de BQCV, indicando que este tejido es un sitio inicial de infección del virus. Virus de la Parálisis Crónica (CBPV) Reportado por primera vez en 1933, y tiene una asociación especifica con el Ácaro de las traqueas: Acarapis woodi. Acarapis woodi Este virus, se presenta en dos síndromes: • Tipo 1, que se caracteriza por que las abejas manifiestan temblor anormal del cuerpo y de las alas las cuales además, se observan extendidas asimétricamente. Las abejas son incapaces de volar y presentan el abdomen distendido. Tipo 2: Síndrome de pelo negro, es reconocido por que el cuerpo de las abejas presenta pelo negro brillante, además se observan abejas arrastrándose en la entrada de la colmena. Abeja enferma Abeja sana •Ataques severos, abejas sanas mordisqueando a las afectadas de su colonia, las cuales tienen dificultades para volar, a menudo se arrastran por el suelo y en los tallos de hierba. •La infección no es detectable y las colonias en general se recuperan espontáneamente de la enfermedad. •Este virus, puede ser transmitido por el ácaro de las traqueas y, además la susceptibilidad de las abejas puede ser hereditaria. •Deficiencias nutricionales, clima frío durante el verano o inviernos severos, pueden favorecer el desarrollo y prevalencia de la enfermedad, debido al confinamiento de las colmenas. •Como los síntomas se pueden confundir con intoxicaciones por pesticidas o por polen contaminado es necesario realizar diagnostico de laboratorio para determinar su presencia. Virus de Kashemira (KBV) • Descubierto como un contaminante en estudios de transmisión del virus de la parálisis aguda utilizando macerados de abejas adultas de la especie Apis cerana colectadas desde Cachemira, India en 1974. • A partir de esta primera descripción, se ha reportado la detección de cepas del virus en abejas de la especie A. mellifera en Canadá, España, India, Australia, Nueva Zelanda, Fiji y los Estados Unidos. • Las infecciones causadas no producen síntomas, ya que incluso la dosis más letal aplicada en abejas individuales causa mortalidad sin ningún signo clínico. específico visible Virus de la Parálisis Aguda (Acute Paralysis Virus, ABPV) • Fue el primero descrito como agente causal de infecciones asintomáticas de las abejas (Bailey, 1963) y se conocía comúnmente por persistir en bajas concentraciones como una infección encubierta en abejas adultas en Gran Bretaña, especialmente durante el verano. • Juega un importante rol en el colapso de colmenas infectadas con el ácaro. • La incidencia de este virus es mayor en verano y otoño y puede matar tanto abejas adultas como crías. Vías de Transmisión Entre abejas adultas por contacto del citoplasma de pelos rotos de la cutícula o a través de secreciones de las glándulas salivales, las cuales a su vez pueden contaminar a las crías por trofalaxis y por contaminación en el alimento almacenado. Vías de transmisión de los virus de las abejas Horizontal Vertical Directa Indirecta Superficie de huevos Aire A. woodi Infección sexual V.destructor (transmisión transovum) Alimento Polen: ABPV, BQCV, DWV, KBV, SBV. Miel: BQCV, DWV DWBV, SBV, BQBV, KBV y ABPV Dentro de huevos (transmisión transovárica) Situación en Chile de enfermedades Virales Rapilermo, Octubre de 2009: Abejas muertas de colmenas con síntomas de virus. Extracción de ARN Viral Muestras de abejas Centrifugación y Purificación Macerado en Nitrógeno liquido y Trizol ARN Puro Resultados de los análisis para detección de: Virus de la Parálisis Aguda (ABPV), Virus de la Cría Saciforme (SBV), Virus de las Alas deformadas (DWV), Virus de la celdilla negra de la Reina (BQCV), N. apis y N. ceranae. Localidad ABPV SBV DWV BQCV N. apis N. ceranae Limavida - - - + (5.01x103) - - Limavida - - + (2.23x103) + (1.32x104) - - Limavida - - - + (5.95x104) - - Rapilermo - - - + (5.63x104) - + Curepto - - - - - - Docamavida - - - - - + Docamavida - - - - - + Rapilermo Alto - - - - - + Rapilermo Bajo - - - + (1.05x104) - - Rapilermo Alto - - - + (4.77x103) - + Docamavida - - - + (58,5) - + Rapilermo Centro - - - + (1.11x102) - - Rapilermo Alto - - - + (3.11x102) - - Limavida - - + (7.05 x106) + (8.03x102) - - Limavida - - - + (2.76x103) - - Docamavida - + (1) - + (2.93x105) - - Rapilermo - - - + (7.36x105) - + Deuca - - + (1) + (12) - + Rapilermo Centro - + (16.3) - + (4.54x103) - + La Orilla - - - + (28.1) - + Docamavida - + (2.83) - + (3.38x102) - + Análisis para detección de DWV de muestras Región del Biobio M Fig. 1. Electroforesis de productos de PCR para abejas con Virus de las Alas deformadas (DWV). Línea M: Marcador de Peso molecular (1001500 bp). +: DWV extracto de DNA. Muestra Localidad DWV 1 Bulnes + 2 Chillán 3 Chillán 4 Contulmo 5 Cañete 6 Los Alamos 7 Lebu 8 Ninquihue 9 San Carlos + + Manejo de las Enfermedades Virales Un programa de manejo integrado de enfermedades virales debe incluir al menos los siguientes tres componentes: 1) Diagnóstico preciso de las enfermedades: PCR 2) Control de vectores: V. destructor y A. woodi. 3) Selección y reproducción de razas de abejas resistentes. 4) Buenas Practicas de Manejo de la Colmena 5) Cambio de reinas MUCHAS GRACIAS