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Pastos y Forrajes, Vol. 13, No. 1, 1990 EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA CONSERVACION EN FORMA DE ENSILAJE DE Panicum maximum cv. Likoni Lissette Luis y Marisol Ramírez Estación Experimental de Pastos y Forrajes "Indio Hatuey" Matanzas, Cuba Con el objetivo de conocer el efecto de la temperatura sobre la conservación, se ensiló a nivel de laboratorio guinea likoni de 8 semanas de rebrote. La temperatura fue controlada en estufa a valores de 25-30°C para el control (A); 45°C (B) y 55°C (C), hasta los 30 días en que se determinó el contenido de microorganismos, los ácidos grasos volátiles individuales, el nitrógeno amoniacal, el nitrógeno total, el pH y las pérdidas de MS. Como resultado se obtuvo que la elevación de la temperatura influyó directamente sobre el crecimiento de las bacterias entéricas y de las levaduras, así como sobre la producción de ácido acético (P<0,05) y de nitrógeno amoniacal (P<0,01) e incidió además en el incremento de las pérdidas de MS, lo que provocó que se obtuviera un ensilaje de peor calidad en los tratamientos B y C. Palabras claves: Temperatura, fermentación, Panicum maximum A laboratory silage with guinea grass having 8 weeks of regrowth was made in order to determine the temperature effect upon conservation. Temperature was controlled in a dryingchamber at 25-30°C for the control (A); 45°C (B) and 55°C (C) up to 30 days when microorganisms, individual volatile fatty acid, ammonia nitrogen, total nitrogen, pH and DM losses were determined. The increment of temperature resulted to influence directly upon the growth of enteric bacteria, yeasts, acetic acid (P<0,05) and ammonia nitrogen (P<0,01) production. An incidence upon the increment of DM losses was detected which gave rise to the obtainment of a poor quality silage in treatments B and C. Additional index words: Temperature, fermentation, Panicum maximum El troceado, el apisonamiento y el sellado tienen gran importancia, pues de ellos va a depender el bloqueo rápido de la respiración vegetal que origina el catabolismo de los carbohidratos solubles y el calentamiento de la masa La conservación en forma de ensilajes ha sido y es una práctica muy utilizada para la alimentación del ganado y el éxito de la misma está condicionado por muchos, factores, entre los cuales se destaca la tecnología de fabricación. 89 Pastos y Forrajes, Vol. 13, No. 1, 1990 diferencia entre el peso inicial y final del ensilaje (Gouet, Ph., comunicación personal). Se realizó un análisis en bloques al azar con tres réplicas por tratamiento. ensilada la cual puede alcanzar altas temperaturas, lo que propicia la multiplicación de gérmenes indeseables (Gouet, Fatianoff y Bousset, 1968). En nuestro país ha quedado establecido que el tiempo de apisonamiento debe extenderse hasta tanto el ensilaje haya alcanzado una temperatura de 42°C o menos (MINAGRI, 1988), lo cual indica que en nuestras condiciones se elevan las temperaturas de los ensilajes muy por encima de ese valor. Este hecho nos indujo a estudiar el efecto de ese indicador sobre el proceso fermentativo que tiene lugar durante la conservación y sobre la flora microbiana responsable del mismo. RESULTADOS Y DISCUSION En el experimento realizado se observó que el crecimiento de las bacterias entéricas y de las levaduras (fig. 1) fue estimulado por el aumento de la temperatura y que las mismas alcanzaron su mayor desarrollo cuando esta fue de 55°C (P<0,05). Las bacterias ácido lácticas, sin embargo, disminuyeron significativamente (P<0,05) bajo este efecto. MATERIALES Y METODOS Tratamientos. Se estudiaron los tratamientos: (A) Control (25-30°C); (B) ensilaje a 45°C y (C) ensilaje a 55°C. Procedimiento. Para confeccionar los ensilajes se utilizó guinea likoni de 8 semanas de rebrote, fertilizada con 60 kg de N/ha/corte. El forraje se troceó en máquina troceadora estacionaria hasta obtener fracciones de 2 cm aproximadamente y se introdujo en frascos de cristal de 200 g de capacidad, hasta los 30 días de conservación en que se efectuaron los análisis. Los ensilajes fueron colocados en estufa a temperatura controlada, lo que permitió garantizar la estabilidad térmica durante el experimento. El crecimiento de los microorganismos fue determinado en medios de cultivo específicos para cada grupo (Luis y Ramírez, 1985) y los ácidos grasos volátiles, individuales por cromatografía gaseosa según Jouany (1981). Los indicadores de nitrógeno amoniacal, nitrógeno total y pH se obtuvieron utilizando la metodología descrita por Luis y Ramírez (1988). Durante el período analizado se calcularon las pérdidas de MS por a,b Valores con superíndices no comunes difieren a P<0,05 Fig. 1. Efecto de la temperatura sobre el crecimiento microbiano. El comportamiento de la flora microbiana está relacionado con el efecto directo de la temperatura sobre su velocidad de crecimiento y la selectividad de esta sobre diferentes especies 90 Pastos y Forrajes, Vol. 13, No. 1, 1990 bacterianas, lo cual ha pido probado por varios autores (Stainer, Adelberg e Ingraham, 1985). Cuando la temperatura sobrepasa los valores óptimos de crecimiento bacteriano, se produce una desnaturalización de las proteínas y reacciones destructivas en las estructuras celulares, lo que limita lógicamente la proliferación de los microorganismos. Cuando se analizó el efecto de la temperatura sobre la producción dé los ácidos grasos volátiles, se pudo observar que el ácido acético (fig. 2) aumentó su concentración cuando se incrementó la temperatura a 55°C, lo que se correspondió con el crecimiento de las bacterias entéricas, señaladas por Dulphy (1984) como las máximas responsables de la producción de dicho ácido. En este resultado pueden haber influido además las levaduras y los clostridios, a quienes se les atribuye este tipo de metabolismo. Del resto de los ácidos grasos volátiles sólo SG produjeron trazas y no existió diferencia significativa entre ellos. Aunque se ha encontrado que a temperatura de 43°C la acidificación es menor que a 30°C (Lesins y Shulz, 1968), en nuestro caso no sucedió así, ya que no existió variación significativa entre los tratamientos cuando se estudió el pH (tabla 1), lo que se relaciona con la presencia en el ensilaje de este forraje de una mayor cantidad de bacterias ácido lácticas heterofermentativas (Luis, L., datos no publicados) que producen ácido láctico, pero además pueden producir otros ácidos que neutralizan el efecto del primero. El aporte de ácido acético que hacen las levaduras, las bacterias entéricas y los clostridios, también tiene su influencia sobre este resultado. Tabla 1. Efecto de la temperatura sobre las pérdidas en forma de CO2 y el pH. Tratamientos 30°C 45°C 55°C DP (g) b 1,19 b 1,31 a 6,87 1,84* pH 3,55 3,70 3,98 0,68 ES± a,b Valores con superíndices no comunes difieren a P<0,05 (Duncan, 1955) * P<0,05 DP Diferencia entre el peso inicial y final del ensilaje El nitrógeno total no sufrió alteraciones significativas bajo el efecto de la temperatura; sin embargo, la producción elevada de nitrógeno amoniacal a 55°C (fig. 3) reflejó el desarrollo de las bacterias clostrídicas, ya que ellas son estimuladas por la elevación de la temperatura, lo que .facilita que actúen sobre los aminoácidos con la producción de CO2 y de NH3 (Dellaglio y Santi, 1984). a,b Valores con superíndices no comunes difieren a P<0,05 Fig. 2. Acido acético producido en ensilaje de guinea likoni a diferentes temperaturas. 91 Pastos y Forrajes, Vol. 13, No. 1, 1990 De los resultados anteriores se puede llegar a las siguientes conclusiones: las bacterias ácido lácticas se desarrollan mejor a temperaturas cercanas a 30°C, lo que debe favorecer la producción de ácido láctico; mientras que los microorganismos indeseables productores de ácido acético, nitrógeno amoniacal y CO2, son estimulados por el aumento de la temperatura. Por ello recomendamos que para obtener un ensilaje de calidad, debe garantizarse la utilización de una adecuada tecnología que permita un control rápido y eficaz sobre la respiración celular, causante del sobrecalentamiento de la masa y de innumerables pérdidas de carbohidratos solubles y de proteínas. a,b Valores con superíndices no comunes difieren a P<0,05 Fig. 3. Producción de amoníaco a diferentes temperaturas en ensilaje guinea likoni. REFERENCIAS Las pérdidas por desprendimiento gaseoso (tabla 1) fueron mayores cuando la temperatura se elevó (55°C), lo que se explica fácilmente si tenemos en cuenta que las bacterias entéricas tuvieron alta concentración en este tratamiento y que ellas son productoras de CO2 en grandes cantidades (Stainer, 1985). A esto puede sumarse el CO2 producido por las bacterias clostrídicas, que aunque no se determinaron, estuvieron presentes en el material ensilado. La elevación de la temperatura en los ensilajes no produjo resultados satisfactorios, pues estimuló el desarrollo de la microflora indeseable, aumentó la producción de ácido acético y de nitrógeno amoniacal, así como las pérdidas en forma de CO2. DELLAGLIO, F. & SANTI, E. 1984. Microbiologie-Aliments-Nutriction. 2:109 DULPHY, J.P. 1984. La technique de l’ ensilage. Plasticulture. No. 63, p. 2 DUNCAN, D ,B. 1955. Biometrics. 11:1 GOUET, P.; FATIANOFF, NATHALIE & BOUSSET, J. 1968. La conservation des fourrages par voie humide. Bull. tech. No. 226, p. 1 JOUANY, J.P. 1981. C.R.Z.V. Theix. Bull. tech. INRA. No. 46, p. 63 LESINS, K. & SCHULZ, F.H. 1968. Can. J. Anim. Sci. 48:15 LUIS, LISSETTE & RAMIREZ, MARISOL. 1985. Pastos y Forrajes. 8:141 LUIS, LISSETTE & RAMIREZ, MARISOL. 1988. Pastos y Forrajes. 11:249 MINAGRI. 1988. Informe final de la campaña de ensilaje en la provincia de Matanzas. Cuba. Mimeo STAINER, R.Y.; ADELBERG, E.A. & INGRAHAM, J.L. 1985. Microbiología. Versión española actualizada. Editorial Reverté, S.A. España Recibido el 4 de septiembre de 1989 92