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BIOPRODUCTO A BASE DE TRICHODERMA CONTROLA EL CARBÓN DE MANÍ Y AUMENTA DE RENDIMIENTO DEL CULTIVO Pastor N.A., Ganuza M., Reynoso M.M., Folguera J., Rovera M., Torres A.M. Departamento de Microbiología e Inmunología. FCEFQyN. Universidad Nacional de Río Cuarto. atorres@exa.unrc.edu.ar Introducción El carbón del maní es una enfermedad que ha adquirido gran importancia en los últimos años debido a que pasó de ser un problema local a una enfermedad generalizada sobre el área núcleo manisera de la provincia de Córdoba. En la campaña agrícola 1994/95 se detectaron por primera vez en la Argentina frutos de maní de los cultivares Colorado Irradiado INTA y Florunner afectados por carbón, cuyo agente causal fue identificado como Thecaphora frezii. Desde entonces, se continuó detectando la presencia de esta enfermedad. Los relevamientos de los lotes de maní manifiestan incrementos sostenidos en las pérdidas durante los últimos años, con daños de hasta el 60%. La enfermedad inicia cuando los clavos de las plantas penetran en el suelo, allí las teliosporas del patógeno germinan sobre la superficie del tejido vegetal formando un pro-micelio con basidosporas que darán origen a un micelio infectivo. Este micelio infecta a los clavos penetrando desde el exterior y atravesando las paredes de los frutos para colonizar las semillas donde incrementa notablemente la formación de hifas y la esporulación. Además, este patógeno sobrevive por más de un año en el suelo formando teliosporas. Se han probado diferentes herramientas para el control del carbón del maní, como rotaciones, labranzas y control químico de semillas. Sin embargo, ninguna de ellas ha logrado hasta el momento disminuir significativamente la intensidad de la enfermedad. Ante este escenario desfavorable, deben implementarse estrategias de manejo alternativas para proteger los cultivos y así mantener y expandir los mercados de exportación de los productos vegetales. Los hongos del género Trichoderma son muy utilizados en la agricultura actual, ya que más del 60% de los biofungicidas registrados en todo el mundo presentan un bioformulado a base de estos hongos. Son hongos filamentosos, no patógenos, distribuidos ampliamente en todos los suelos del mundo y colonizan las raíces de muchos cultivos comportándose como oportunistas, avirulentos y simbiontes. El éxito de las cepas de Trichoderma usadas como agentes de control biológico se debe a su alta capacidad reproductiva, a su fuerte agresividad contra hongos fitopatógenos y a su eficiencia en la promoción del crecimiento de las plantas. En el presente estudio se propuso evaluar a campo la capacidad de Trichoderma harzianum ITEM 3636 para controlar el carbón del maní y aumentar el rendimiento del cultivo. Materiales y métodos El ensayo se realizó en un campo comercial de la zona de General Cabrera (Provincia de Córdoba) con alto inóculo en suelo del patógeno en estudio Thecaphora frezii. La aplicación del bioformulado a base de T. harzianum ITEM 3636 se realizó mediante peleteo luego del tratamiento de las semillas con carboximetil celulosa (CMC) al 2% como adherente. Las semillas control se trataron con CMC al 2% y agua destilada estéril. 2 Los ensayos se realizaron en el mes de Noviembre del 2014, en parcelas de 28 m (4 surcos de 10 m x 2,8 m) en un diseño de bloques completamente al azar, con 3 tratamientos y cuatro réplicas por tratamiento; en un espacio entre surcos y entre plantas de 70 y 8 cm, respectivamente, con una densidad de siembra de 120 kg -1 ha y una profundidad de 5 cm. Se utilizaron las dosis recomendadas de fertilizantes y para evitar el efecto de malezas y plagas sobre el crecimiento y el rendimiento del cultivo, se aplicaron plaguicidas a las dosis recomendadas para mantener a las mismas por debajo del nivel de daño económico. A los 75 días de la siembra se tomaron al azar diez plantas por parcela para evaluar peso fresco total, peso seco aéreo, peso seco radicular, peso seco de los nódulos, altura de la planta y longitud de la raíz. A cosecha, 2 se tomó 1m de plantas de cada unidad experimental (parcela) para determinar los componentes directos del rendimiento y calidad comercial de maní: peso de vainas, peso de granos y granos calidad confitería (tamaño superior a zaranda 7,5 mm), siendo este último parámetro muy importante por el precio diferencial del maní confitería respecto al de industria. 2 La intensidad de la enfermedad se evaluó a cosecha sobre la totalidad de las plantas obtenidas a partir de 1 m de cada parcela. El carbón por T. frezii se cuantificó a través de incidencia (% de vainas enfermas) y severidad de la enfermedad a través de una escala de 0-4, donde, 0: vainas sin carbón, 1: vaina normal, una semilla con pequeño soro, 2: vaina deformada o no, una semilla mitad afectada, 3: vaina malformada y toda una semilla carbonosa, 4: vaina malformada y las dos semillas carbonosas (Fig. 1). Los análisis estadísticos se realizaron utilizando InfoStat Professional V2009 (Universidad Nacional de Córdoba, Argentina) y Sigma Stat para Windows V 2.03 (SPSS Inc.). Todos los datos se evaluaron a través de análisis de varianza (ANOVA). En todos los casos los residuales fueron testeados para normalidad utilizando el test de Holm Sidak. Para testear la diferencia entre medias se utilizó el test LSD con un nivel de significancia de P ≤ 0.05. Resultados A los 75 días post siembra se evaluaron parámetros de crecimiento. Se observó que las plantas que emergieron a partir de semillas inoculadas con T. harzianum 3636 mostraron un incremento en peso seco radicular, en comparación con las plantas control. Sin embargo, esta diferencia no resultó estadísticamente significativa (P ≤ 0.05). Por otra parte, los valores obtenidos de peso fresco total, peso seco aéreo, peso seco de los nódulos, altura de la planta y longitud de la raíz a partir de ambos tratamientos a los 75 días tampoco resultaron significativamente diferentes. A cosecha (120 días), se observó un incremento significativo en el peso de granos/planta en las plantas del tratamiento de inoculación con T. harzianum 3636, en comparación con el tratamiento control (Fig. 2). Dicho incremento fue de 12,9 gramos por planta en promedio, o sea del 29%. Además, las plántulas que emergieron a partir de semillas inoculadas con T. harzianum 3636 mostraron un incremento significativo en el número de granos de calidad confitería, en comparación con el tratamiento control. Dicho incremento fue de 12 granos calidad confitería por planta en promedio, o sea de aproximadamente el 24% (Fig. 3). Por otra parte, se monitoreó la incidencia del carbón de maní, cultivar Granoleico, a los 120 días post siembra. La incidencia de la enfermedad resultó moderada ya que < 20 % de las vainas de plantas del tratamiento control se vieron afectadas por el carbón causado por T. frezii. Sin embargo, la inoculación con T. harzianum 3636 redujo la incidencia del carbón en un 3%, en comparación con el control de infestación. Finalmente, la severidad del carbón de maní también se registró a los 120 días post siembra; como resultado, observamos que la inoculación con T. harzianum 3636 redujo la severidad del carbón de maní en un 17% (0,54 de severidad), en comparación con el control de infestación (severidad de ~ 0.65) (Fig. 4). 75 a 70 Peso granos (g) Fig. 1. Granos de maní exhibiendo diferentes valores de la escala utilizada para cuantificar el carbón por T. frezii. 90 85 80 75 70 65 60 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 N° de Granos calidad confiteria 65 a 60 b 55 50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0 Control b Inoculacion Fig. 3. Efecto de la inoculación con T. harzianum 3636 sobre el crecimiento de plantas de maní a campo en presencia de T. frezii. El número de granos calidad confitería se registró a cosecha. 0,80 0,75 a 0,70 Control 0,65 Inoculacion b 0,60 0,55 0,50 0,45 MSI Fig. 2. Efecto de la inoculación con T. harzianum 3636 sobre el crecimiento de plantas de maní a campo en presencia de T. frezii. Los pesos de los granos de cada planta se registraron a cosecha. 0,40 0,35 0,30 0,25 0,20 0,15 Conclusiones: Este es el primer trabajo que demuestra la capacidad de una cepa de T. harzianum para incrementar el rendimiento de plantas de maní en presencia del patógeno causante del carbón, T. frezii. T. harzianum ITEM 3636 tiene el potencial para ser empleado en sistemas integrados de manejo de enfermedades de maní, protegiendo el ambiente natural. Actualmente se están desarrollando ensayos para determinar el impacto de este prometedor agente de control biológico sobre las comunidades microbianas del suelo. 0,10 0,05 0,00 Control Inoculacion Fig. 4. Ensayo de control biológico a campo. El carbón por T. frezii se cuantificó a a través de una escala de 0-4, donde, 0: vainas sin carbón, 1: vaina normal, una semilla con pequeño soro, 2: vaina deformada o no, una semilla mitad afectada, 3: vaina malformada y toda una semilla carbonosa, 4: vaina malformada y las dos semillas carbonosas.