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XI CONGRESO NACIONAL DE LA CIENCIA DEL SUELO XI CONGRESO NACIONAL DE LA CIENCIA DEL SUELO Los resultados obtenidos indican que el EEP comercial utilizado fue un fungicida efectivo. No obstante, para futuros estudios, debe conocerse su origen botánico y geográfico para poder estandarizar su posterior uso y si los resultados obtenidos en este estudio son reproducibles in situ. INMOVILIZACIÓN DE LA ENZIMA FOSFATASA ÁCIDA EN NANOPARTÍCULAS MINERALES DE ORIGEN NATURAL Roxana López1, Ada López2, Analí Rosas3 Depto. de Producción Agrícola, Universidad de Talca, Casilla 721, Talca, Chile. Laboratorio de Fisiología Vegetal y Genética, Universidad de Talca, Casilla 721, Talca, Chile. 3 Depto. De suelos y Recursos Naturales, Universidad de Concepción, Casilla 537, Chillán, Chile. 1 Agradecimientos Proyecto DIUFRO DI08-0045 y Proyecto Apoyo a Profesores Patrocinantes de Alumnos de Pre y Postgrado UFRO (Ex Convenio de Desempeño II) DI09-2006, ambos financiados por la Dirección de Investigación de la Universidad de La Frontera. El Sr. Vidal agradece Beca UFRO para obtener grado de Magíster. 2 Resumen En el suelo existe una fracción de fósforo (P) orgánico potencialmente biodisponible (500 - 2,330 mg kg-1), a través de la actividad fosfatasa ácida. Este proceso de mineralización natural de P puede ser acelerado por adición de fosfatasa altamente activa. Actualmente existe un amplio campo de aplicación de las enzimas lo que ha generado nuevos soportes para preservar su actividad y estabilidad frente a agentes desnaturalizantes. La inmovilización enzimática en arcillas naturales, orientada principalmente a los filosilicatos, ha resultado en una reducción de la actividad enzimática y propiedades catalíticas. Sin embargo, existen otras arcillas no laminares que no han sido evaluadas como potenciales soportes enzimáticos. El alofán es el constituyente principal de los minerales de arcilla de los Andisoles. Corresponde a una arcilla silicatada no cristalina que presenta un área superficial que varía entre 700 a 1100 m2 g-1 y un tamaño aproximado de 35 a 55. La zeolita pertenece a la familia de los tectosilicatos y son alúminosilicatos cristalinos. La estructura presenta cavidades y canales de dimensiones moleculares. Este tipo de estructura hace que las zeolitas presenten una superficie interna de de 500-1000 m2 g-1 en relación a su superficie externa. El diámetro de poros y el diámetro de cavidades corresponden de 2 a 12 Å y 6-12 Å respectivamente. Considerando estos antecedentes, se realizó un estudio que tiene como objetivo determinar el efecto de la inmovilización de la enzima fosfatasa ácida sobre zeolita comprada con su inmovilización alofán. La enzima fosfatasa ácida se inmovilizó en arcilla zeolita y también en alofán, para lo cual se formaron complejos entre la enzima y cada una de estas nanopartículas. Inicialmente se realizaron isotermas de adsorción entre la enzima y cada uno de las arcillas que se utilizarían como soportes para la inmovilización. Luego se determinó la actividad y parámetros cinéticos de la fosfatasa y se evaluó la estabilidad térmica de la enzima a 60 ºC y distintos intervalos de tiempo por un período de tres horas. Las isotermas de adsorción entre la enzima y cada una de estas nanopartículas, mostraron que ambos soportes presentaron un nivel de saturación de enzima con niveles inferiores a 5 mg de arcilla y 0.0285 mg de proteína. En estudios previos nosotros hemos demostrado que la inmovilización de fosfatasa ácida en alofán genera un incremento de alrededor del 30 %en la actividad y eficiencia catalítica de esta enzima (1). En este estudio la actividad enzimática se incrementó en más del 100% debido a la inmovilización en zeolita y en más del 30 % para la inmovilización en alofán en 240 241