Download Mariano Pérez: Lo nuevo en sistemas de cultivo embrionario

“Sistemas de cultivo embrionario”
Mariano Pérez
FUNDACIÓN FECUNDART
Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción
Congreso ESHRE 2015 Julio 14, 2015
“ Efecto beneficioso de co-cultivo de células
endometriales autólogas sobre desarrollo
embrionario “.
• VENTAJAS DEL COCULTIVO
• CONDICIONANTE NEGATIVO
•
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•
REMOCION DE COMPONENTES DELETEREOS
DISMINUCION DE ESPECIES REACTIVAS AL OXIGENO
DISMINUCION DE HIPOXANTINAS
• CONDICIONANTE POSITIVO
•
•
•
APORTE DE FACTORES EMBRIOTROFICOS (CITOQUINAS Y PROTEINAS)
, GLICOPROTEINAS, ß TGF Y LIF.
POLARIDAD DE CEL. SOMATICAS
• Estudio sobre pacientes con Falla de
Implantación.
• 4 embriones buenos en D3
• Comparación de resultados con sistema
estático de cultivo.
• Transferencia de embrión único. SET
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DISEÑO:
BIOPSIA ENDOMETRIO = Pico LH + 7 días
Stock - 80C°
Cultivo D2
D5/D6
48 cultivo convencional
84 pacientes
36 co cultivo
• Resultados:
CONTROL
CO CULTIVO
PACIENTES
48
36
EMBRIONES ALTA CALIDAD
D2
269
201
%BLASTULACION D/5 D/6
38.7 % (104/269)
47.8 % (96/201)
N° BLASTOS/PACIENTE
2.2
2.6
EMBARAZO/TRANSF.
47.6 %
51.3 %
NS
• Conclusiones:
• 25.5%
DE BLASTOS PARA TRANSFERENCIA O
VITRIFICACION
•
TASA ACUMULATIVA DE IMPLANTACION Y
EMBARAZO CLINICO.
•
CICLOS DE FIV.
• NO HAY DIFERENCIAS EN TASA DE EMBARAZO
CLINICO EN FRESCO.
• “Efecto del cultivo con single step vs.
Sequential culture medium sobre el embrión”
•
•
•
•
UNO ES MEJOR QUE EL OTRO?
UNO ES MEJOR QUE DOS?
CUAL ES MENOS PERJUDICIAL?
BACK TO NATURE VS LET THE EMBRYO CHOOSE
• GRAN AVANCE EN LOS ULTIMOS AÑOS EN LOS
SISTEMAS DE CULTIVO EMBRIONARIO
• CULTIVO EXTENDIDO
• D2/D3 NO ES BUENO PARA PREDECIR
IMPLANTACION
• META OBTENER EL MEJOR BLASTO PARA
TRANSFERENCIA DE UN SOLO BLASTO
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•
DISEÑO:
1280 CASOS
ICSI + PGS
COMPARAR : TASA DE BLASTOS, ANEUPLOIDIAS,
EMBARAZO Y ABORTO.
• GRUPO A ( MEDIO SECUENCIAL)
• 432 PACIENTES
• GRUPO B ( SINGLE STEP)SIN RENOVACION
438 PACIENTES
• RESULTADOS:
GRUPO A (SECUENCIAL)
GRUPO B (SINGLE STEP)
N° PACIENTES
432
438
N° EMBRIONES
1782
1930
N° BLASTOS
766
877
% BLASTOS
43% (766/1782)
45.3% (877/1930)
• RESULTADOS:
GRUPO A (SECUENCIAL)
GRUPO B (SINGLE STEP)
N° EMBRIONES PGS
457
550
% ANEUPLOIDIAS
58.6%
61.8%
% IMPLANTACION
49.4%
48.6%
% ABORTO
8%
7%
• CONCLUSIONES:
• CON SINGLE STEP
•
BUENA MORFOLOGIA D3
•
CANTIDAD DE BLASTOS D5
• = TASA DE ANEUPLOIDIAS
•
MANIPULACION DEL EMBRION.
• “ Efecto de la tensión de O2 sobre el
desarrollo embrionario y nacidos vivos”
• [𝑂2 ] ATMOSFERA 20.5%
• [𝑂2 ] FISIOLOGICO 5%
• MEJORARIA LA TASA DE NACIDOS VIVOS Y
CALIDAD EMBRIONARIA UNA [𝑂2 ] MAS
FISIOLOGICA?
• [𝑂2 ] ELEVADAS, AUMENTAN RADICALES
LIBRES, RUPTURA DE DNA , ESTRÉS OXIDATIVO
•
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•
•
•
DISEÑO:
840 PAREJAS
PRIMER O SEGUNDO FIV
< 42 AÑOS
419 5%[𝑂2 ]
840 PAREJAS
421 20 %[𝑂2 ]
• RESULTADOS:
5% 𝑂2
20% 𝑂2
N° PACIENTES
419
421
N° OVULOS/ PAC.
13.2
13.5
2PN
7.4
7.7
4-7 CÉLULAS
2.9
3.4
> 8 CÉLULAS
4.4
3.8
ET
90.9%
93.6%
D2
2.3
2.5
D3
2.3
2.3
D5
1.4
1.5
D3
• RESULTADOS:
5% 𝑂2
20% 𝑂2
TASA DE PARTO
36.5%
35.9%
TASA NACIDOS VIVOS
40.4%
38.3%
TASA DE IMPLANTACION 32.4%
27.7%
% UTILIZACION DE
BLASTOS
20.2%
14.8%
BLASTOS VITRIF./
OVULOS RECOLECTADO
7.7%
5.5%
•
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•
•
CONCLUSIONES:
CULTIVO AL 5% DE 𝑂2 :
=TASA DE NACIDOS VIVOS
=TASA EMBARAZO CLÍNICO Y EVOLUTIVO
TASA DE IMPLANTACION
CANTIDAD DE BLASTOS PARA USAR
CANTIDAD DE BLASTOS PARA VITRIFICAR
NO HAY DIFERENCIAS EN TASA DE ABORTO
PESO NEONATAL Y SEMANAS DE GESTACION
• “Determinación de Ploidía en embriones
hermanos cultivados en single step vs
sequential culture medium con time lapse y
PGS”
• METODOLOGIA:
• 349 EMBRIONES HERMANOS SEPARADOS EN
RADIO 1:1
• CULTIVO EN SIGLE STEP VS SECUENCIAL
• TIME LAPSE MICROSCOPIE
• PGS Y VITRIFICACION
• RESULTADOS:
SECUENCIAL
SINGLE STEP
OVOCITOS
244
243
TASA DE BLASTOS
47.7%
61.6%
46.6%
41.2%
NS
• TASA DE EUPLOIDIA
• CULTIVO EN SINGLE STEP:
CANTIDAD DE BLASTOS EN SINGLE STEP
• = CANTIDAD DE BLASTOS EUPLOIDES UTILIZABLES
• MAYOR VELOCIDAD DE FORMACION DE BLASTOS
• NO VEN DIFERENCIA DE VELOCIDAD ENTRE BLASTOS
EUPLOIDES Y ANEUPLOIDES
MUCHAS GRACIAS !!!!!
Mariano Pérez
FUNDACIÓN FECUNDART
Jornada de Actualización en Biología de la Reproducción
Congreso ESHRE 2015 Julio 14, 2015