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Pruebas para susceptibilidad
de bacterias a antibióticos (PSA)
La determinación de bacterias resistentes a antibioticos es un instrumento
esencial en el tratamiento de pacientes y diseño de nuevos medicamentos.
¿Qué es una prueba de susceptibilidad a
antimicrobianos (PSA) y cómo funciona?
El principal objetivo de las pruebas
de susceptibilidad a antimicrobianos
(PSA) in vitro es el proporcionar una
guía para el manejo terapéutico
de las enfermedades infecciosas a
través de la sensibilidad o resistencia
de bacterias patógenas aerobias y
anaerobias facultativas a diferentes
compuestos antimicrobianos.
Debido a que es imposible predecir
la susceptibilidad de una bacteria
responsable de una determinada
infección a los antimicrobianos, las
PSA efectuadas en el laboratorio
microbiológico se convierten en un
instrumento esencial para el manejo
terapéutico de los pacientes.
Existen
diferentes
técnicas
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de
laboratorio que pueden ser utilizadas
para evaluar in vitro la resistencia de
las bacterias a diferentes agentes
antimicrobianos. Entre estas técnicas,
la prueba de susceptibilidad de
difusión en disco (técnica de KirbyBauer) es las más común, así como las
pruebas de macrodilución en caldo y
agar.1
Para obtener unos resultados
fiables y uniformes, las técnicas
utilizadas, los medios y los
procedimientos empleados deben
estar normalizados. Hoy en día,
el Clinical Laboratory Standards
Institute (CLSI) es responsable de
la actualización y modificación del
procedimiento original de Kirby
y Bauer a través de un proceso
de consenso global. Esto asegura
la uniformidad de la técnica y la
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reproducibilidad de los resultados.2
Este método normalizado implica
la colocación de un disco de papel
cargado de una concentración
conocida de un antibiótico sobre
la superficie del agar en el que
los microorganismos han sido
sembrados. De esta forma, se produce
un gradiente de concentración y la
sensibilidad de los microorganismos
se indica según el tamaño del halo
de inhibición.
El uso de medios de cultivo
estandarizados y el control de las
condiciones durante la prueba son
requisitos fundamentales en el
ensayo microbiológico de antibióticos
a la hora de lograr resultados
satisfactorios.
knowledge. partnership. future.
Medios de CONDA para la prueba de susceptibilidad a antimicrobianos
La elección del medio adecuado es un factor importante para garantizar la
reproducibilidad en los análisis realizados. Laboratorios Conda ofrece una
amplia gama de medios antibióticos que se utilizan para la determinación de
la potencia antibiótica a través de la técnica de ensayo microbiológico.
Laboratorios Conda realiza estrictos controles de calidad de los ingredientes
para asegurar la consistencia y reproducibilidad de las formulaciones de los
medios de cultivo.
En el campo clínico, el estudio de susceptibilidad
a antimicrobianos constituye una herramienta
fundamental para la vigilancia de la resistencia a
antibióticos en diferentes microorganismos. En
efecto, el laboratorio clínico constituye la primera
línea de detección de microorganismos portadores
de mecanismos de resistencia y, en colaboración con
los comités de terapia y de control de infecciones.
Medios para ensayos clínicos:
Mueller Hinton Agar Cat.1058 – El
clásico medio Mueller Hinton es fiable
y ampliamente utilizado en muchas
pruebas de sensibilidad a los antibióticos
y sulfamidas, y para el aislamiento primario
de Neisseria y otros patógenos a partir de
muestras clínicas.
Mueller Hinton Agar II Cat.1055 – La
especificación original del agar MuellerHinton no define el contenido de cationes
(que afecta a las pruebas sobre varios
agentes, en particular los aminoglucósidos)
y los límites de la timidina y el contenido
de timina (que afecta a las pruebas
sobre las trimetoprim y trimetoprimsulfametoxazol). Mueller-Hinton agar II de
Conda está fabricado con bajos niveles de
timidina y timina y niveles controlados de
iones de calcio y magnesio modificando
el agar Mueller Hinton Cat.1058. Este
medio se recomienda para las pruebas
de sensibilidad a los antibióticos y para
el aislamiento primario de gonococos y
meningococos, y otros patógenos a partir
de muestras clínicas.
Mueller Hinton Broth Cat.1214 – Cuando
es necesaria la realización de ensayos
turbidimétricos en tubos de ensayo con la
fórmula Muller Hinton.
ISO- Sensitest Cat.1001 – Cuando todos
los parámetros deben ser controlados en
la realización de la prueba. La fórmula ha
sido diseñada cuidadosamente diseñada
para dar resultados reproducibles y para
asegurar que los parámetros no definidos
se mantengan a un nivel mínimo.
Haemophilus Test Medium Cat.1464 –
Medio indicado para realizar la prueba de
susceptibilidad de Haemophilus influenzae.
Para el desarrollo de nuevos antibióticos y
el estudio de la resistencia de las bacterias
a la presencia de los mismos, las industrias
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farmacéuticas necesitan realizar pruebas en
medios controlados con especificaciones
de Farmacopea de Estados Unidos (USP),
Farmacopea Europea Antibiótico y
AOAC International3. Los antibióticos se
identifican numéricamente con nombres
asignados por Grove y Randall en métodos
de ensayo de antibióticos 4.
Antibiotic Medium Nº1 Cat.1520 – Medio
estándar utilizado para preparar capa
los ensayos de la potencia antibiótica de
preparaciones de bacitracina y penicilina.
Este medio tiene la misma fórmula que el
Antibiotic Medium Nº11 (Cat.1528), con la
diferencia de que el pH del medio se ajustó
a 6,6 ± 0,1.
Antibiotic Medium Nº2 Cat.1002 – Es el
medio estándar utilizado para preparar la
base de la capa en el ensayo microbiológico
de antibióticos. Se utiliza en ensayos
microbiológicos de antibióticos tales como
bacitracina, cloranfenicol y penicilina.
Antibiotic Medium Nº3 Cat.1534 – En el
método de discos en placas, el Antibiotic
Medium N°3 se utiliza para resuspender el
inóculo en el ensayo de la potencia para
la penicilina, eritromicina, neomicina,
clortetraciclina y cloranfenicol. El método
de dilución en serie se utiliza para el
ensayo de la penicilina. Por último, este
medio también puede ser utilizado en
la determinación turbidimétrica de la
potencia de la bacitracina, estreptomicina
y terramicina. El método turbidimétrico se
basa en la inhibición del crecimiento de un
cultivo de microorganismos en un medio
fluido que contiene una solución uniforme
de un antibiótico. El uso de este método es
apropiado sólo cuando las muestras para la
prueba son puras.
Antibiotic Medium Nº5 Cat.1524 – Este
medio puede ser utilizado en el método
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de discos en placas para el ensayo de
estreptomicina, generalmente con Bacillus
subtilis.
Antibiotic Medium Nº8 Cat.1004 – Este
medio se utiliza para preparar la base de
la capa para el ensayo de la tetraciclina y
otros antibióticos. Tiene la misma fórmula
que el Antibiotic Medium Nº2 (Cat. 1002) y
el Antibiotic Medium Nº5 (Cat.1524), con la
diferencia de que el pH del medio final se ha
ajustado a 5,7 ± 0,1.
Antibiotic Medium Nº11 Cat.1528 –
Para uso en el ensayo de la potencia de
neomicina y otros antibióticos. Este medio
tiene la misma fórmula que en el Antibiotic
Medium Nº1 (Seed Agar, Cat. 1520), con la
diferencia de que el pH del medio se ajusta
a 7,9 ± 0,2.
Antibiotic Medium Nº12 Cat.1525 – Se
recomienda para la preparación de las
placas para el ensayo de discos en placas
de la nistatina, los agentes antifúngicos
y anisomicina, usando Saccharomyces
cerevisiae sólo como organismo de ensayo.
Se utiliza para el ensayo de la anfotericina B.
Antibiotic Medium Nº 10 Cat.1537 –
Este medio se utiliza y es recomendado
para realizar el ensayo de la potencia
de Polimixina a través de sus efectos
inhibidores sobre los microorganismos.
1. Jorgensen, J. H., and J. D. Turnidge. 2007. Susceptibility test
methods: dilution and disk diffusion methods, p. 1152–1172. In
P. R. Murray, E. J. Baron, J. H. Jorgensen, M. L. Landry, and M. A.
Pfaller (ed.), Manual of clinical microbiology, 9th ed. ASM Press,
Washington, D.C.
2. Bauer, A. W., W. M. M. Kirby, J. C. Sherris, and M. Turck. 1966.
Antibiotic susceptibility testing by a standardized single disk
method. Am. J. Clin. Pathol. 36:493-496
3 Council of Europe. 2002. European pharmacopeia, 4th ed.
Council of Europe, Strasbourgh, France.
4. Grove and Randall. 1955. Assay methods of antibiotics.
Medical Encyclopedia, Inc. New York, N.Y.
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