Download Primer reporte de un brote por Klebsiella pneumoniae productora

163-E
Primer reporte de un brote por Klebsiella pneumoniae
productora de NDM-1 en Colombia y Suramerica
Escobar Pérez Javier 1, Olarte Escobar Narda2, Castro-Cardozo Betsy 1, Valderrama Márquez Alberto2, Garzón
Aguilar Martha2, Martinez de la Barrera Leslie2, Barrero Barreto Rocio2, Marquez-Ortiz Alejandro 1,
Moncada Victoria 1, Vanegas Natasha 1, 3.
1 Laboratorio de Genética Molecular Bacteriana (LGMB), Universidad El Bosque; 2 Hospital El Tunal E.S.E, Bogotá
Colombia; 3 i3 Institute, Faculty of Science, University of Technology; Sydney, Australia
labgenmolecular@unbosque.edu.co , javiesco21@yahoo.com
Introducción y objetivo
Los aislamientos Gram-negativos resistentes a carbapenémicos son un problema de salud pública a nivel mundial. Esta resistencia esta asociada
principalmente a la producción de carbapenemasas, entre ellas la metalobetalactamasa de Nueva Delhi (NDM) que confiere resistencia a todos los
antibióticos beta-lactámicos, excepto a aztreonam (4). NDM fue primero identificada en un aislamiento de Klebsiella pneumoniae y otro de Escherichia coli
recuperados de un paciente sueco que fue transladado desde India en 2008 (2). Desde entonces han sido reportados aislamientos NDM positivos en
Europa, Asia, Norte América (4,6) y recientemente Guatemala (5). El objetivo de este trabajo fue caracterizar desde el punto de vista clínico, microbiológico,
genético y molecular, un brote de infección por K. pneumoniae, en una unidad de cuidado intensivo neonatal, ocurrido entre agosto de 20011 y enero de
2012; con el fin de generar información útil para la prevención y control de las infecciones y de la resistencia bacteriana.
Resultados obtenidos
Actividades y métodos
Actividad:
Características clínicas
Tabla 1. Características
clínicas y evolución de los
pacientes
Métodos:
Revisión sistemática de historias
clínicas y diligenciamiento de
fichas epidemiológicas
Actividad:
Caracterización microbiológica de
los aislamientos
Sexo F: femenino, M: masculino, EG: Edad
Gestacional en semanas, Peso al Nacer en gramos,
TZP: Piperacilina Tazobactam, GM-. Gentamicina,
AMP:
Ampicilina,
AMK:
Amikacina,
CAR:
Carbapenemicos, CIP: Ciprofloxacina
Figura 1. Ensayos de sinergia y prueba de Hodge
Métodos:
• MIC
por
sistema
automatizado, dilución en
agar y E-test. (CLSI 2012).
• Ensayos de sinergia y prueba
de Hodge. (CLSI 2012).
Actividad:
Caracterización molecular de los
aislamientos y localización del
gen blaNDM.1
IPM: imipenem, MEM: Meropenem,ERT: Ertapenem, TZP: Piperacilina-tazobactam, SAM: Amplicilina- Sulbactam,
CTX:Cefotaxma. CAZ:Ceftazidima, FEP: cefepime, ATM:Aztreoman
cepa CAG12177 de E. coli
Actividad:
Determinación de relación
genética de los aislamientos y
entorno genético del gen blaNDM.
Figura 3. Perfil de plásmidos de los aislamientos de K pneumoniae
y las trans-conjugantes de E. coli
Figura 2. Detección del gen blaNDM en los
aislamientos de K. pneumoinae
aislamientos
PM (+) 1
Métodos:
• Detección y secuenciación del
gen blaNDM. por PCR
• Ensayo de transconjugación
Todos los aislamientos fueron
resistentes a los β-lactamicos
incluyendo imipemen, meropemen,
ertapenem, excepto a aztreonam.
Adicionalmente, fueron resistentes
a
trimetoprim-sulfametoxazol,
gentamicina,
amikacina
y
susceptibles
a
ciprofloxacina,
tetraciclina, tigeciclina y colistina.
100pb
2
3
4
5
21.226pb
6
4973pb
4268pb
NDM
2027pb
1904pb
(80pb)
50pb
NDM
positivas
Los aislamientos amplificaron el gen NDM, la secuenciación confirmó la variante NDM-1; se detectaron los genes qnrA,
presentaron además mínimo dos plásmidos de ~20kpb y ~3kpb. Las transconjugantes de E. coli con el plásmido de
~20Kpb fueron positivas para el gen NDM-1. El plásmido pertenece al grupo de incompatibilidad incA/C.
Figura 5. Esquema del entorno genético de los aislamientos
de K pneumoniae y otros aislamientos reportados.
Figura 6. Relación genética de los aislamientos de
Colombia (ST1043) con los reportados a nivel mundial.
A. pittii, A. iwoffi,
A. haemolitycus,
A. Baumanni
E. Coli 102337
Métodos:
• Ensayos de PFGE restricción
16Kpn1
Colombia
E. Coli DVR22
de DNA genómico con XbaI.
• Tipo de ST (MLST) y análisis
• Entorno genético por mapeo
por PCR.
P. stuartii
Kp7
ISEc33
Kp pTR3
NDM-1
Todos los aislamientos fueron clonalmente relacionados genéticamente y
pertenecen a un nuevo ST (1043), no relacionado con los ST de
aislamientos NDM positivos reportados a nivel mundial. El entorno
genético del gen blaNDM tiene mayor similitud con los encontrados en
aislamientos de Acinetobacter spp. que con aislamientos de
Enterobacterias.
Conclusiones:
Este es el primer reporte brote por K. pneumoniae productora de NDM 1 en Colombia y Suramérica y el primer reporte de brote
en neonatos. El ST diferente de los aislamientos colombianos respecto a los reportados a nivel mundial, sugiere que clones autóctonos están adquiriendo
localmente los plásmidos que transportan el gen NDM-1, como se ha reportado en Europa (3). Para contener la diseminación de microorganismos con este
tipo de resistencia se de fortalecer la vigilancia epidemiológica y las medidas de prevención de infecciones.
Referencias:
1. Diancourt L, et al. 2005. Multilocus sequence typing of Klebsiella pneumoniae nosocomial isolates. J Clin Microbiol 43:4178-4182.
2.Kumarasamy KK, et al. 2010. Emergence of a new antibiotic resistance mechanism in India, Pakistan, and the UK: a molecular,
biological, and epidemiological study. Lancet Infect Dis 10:597-602.
3.Nordmann P, et al. 2012. Emergence of an autochthonous and community-acquired NDM-1-producing Klebsiella pneumoniae in
Europe. Clin Infect Dis 54:150-151.
4.Nordmann P, et al. 2011. The emerging NDM carbapenemases. Trends Microbiol 19:588-595.
5.Pasteran F, et al. 2012. Emergence of NDM-1-producing Klebsiella pneumoniae in Guatemala. J Antimicrob Chemother 67:1795-1797.
6.Poirel L, et al. 2010. Global spread of New Delhi metallo-beta-lactamase 1. Lancet Infect Dis 10:832.
Agradecimientos:
Al equipo de enfermería de la unidad neonatal, a Lisa
Galindez y Diana Bejarano del Hospital El Tunal. A Diana
Cruz y Leidy Rojas del LGMB por su apoyo técnico. A la
división de investigaciones de la Universidad del Bosque
y al Hospital por la financiación de este estudio.