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VIROLOGÍA 2012
Teórico 16
Enterovirus
Relaciones filogenéticas
entre cepas prototipo del
género enterovirus, basadas
en la región codificante de P1
(proteínas de cápside)
Estructura
Virus pequeño (30 nm) desnudo
Simetría icosaédrica
Resistentes a bajos pH y a solventes orgánicos
RdRp NO estructural
RNAss polaridad positiva
Proteín VPg unida covalentemente al genoma
Ciclo de multiplicación
Adsorción
Penetración y desnudamiento
Traducción
Traducción dependiente de
5´Cap
Traducción dependiente del
Sitio interno de entrada al ribosoma:
IRES
Regulación de la traducción celular
Traducción y procesamiento de proteínas
Síntesis de RNA
Asociada a membrana
RdRp viral
ARN viral
(poliovirus)
Proteínas celulares
Proteínas virales
Síntesis de RNA
RdRp viral
Primer dependiente
VPg pUpU
ARN viral
(poliovirus)
Sitio de entrada, replicación y diseminación
Mucosa orofaríngea/intestinal
Agmídalas/Placas de Peyer
Nodulos linfáticos
cervicales
Rta inmune innata
Rta inmune adquirida
celular citotoxica
Nodulos linfáticos
mesentéricos
Viremia
Rta inmune adquirida
humoral AC
SRE
Rta inmune innata
SNC
Infecciones por poliovirus




Infección asintomática (90%).
Poliomielitis abortiva (5%).
Poliomielitis no paralítica (3-4%).
Poliomielitis paralítica (1-2%):

Poliomielitis espinal.

Poliomielitis bulbar.
Diabetes
Conjuntivitis
hemorrágica
: Enterovirus
DIAGNOSTICO
Recolección y conservación de las muestras
MUESTRAS
RECOLECCION
LCR
Tubo estéril
Materia Fecal
Frasco limpio
Hisopados
Tubo c/medio de transporte viral
Rectal, faríngeo.
Biopsias,
Necropsias
Tubo c/medio de transporte viral
Líquido
Pericárdico
Tubo estéril
Diagnostico por cultivo
Diagnostico molecular
capsid
VP
4
VP2
VP3
VP1
2A
2B
2C
3A 3B
3C
3D
PCR1
Semi-nested PCR PCR2
►
►
5'NTR
◄
Hypervariable
region
BEVspecific
duplicatio
n
3'NTR
An
Identificación de los enterovirus
LCR
RT-PCR
CULTIVO
ENTEROVIRUS
SECUENCIACION GENOMICA
PARCIAL DE VP1
NEUTRALIZACION
CON POOL LBM
TIPO VIRAL
Serología
FIJACION DE COMPLEMENTO
TEST DE NEUTRALIZACION
•
•
Respuesta tipo-específica
Se mantienen de por vida
•
•
•
Respuesta de Grupo
Baja sensibilidad
Desaparecen en 1-2 años.
DETECCION DE IGM ENTEROVIRAL
• Poco sensible
• Puede persistir por muchos meses después de una infección
enteroviral y puede detectarse en individuos sanos asintomáticos
• La presencia de IgM enteroviral no puede siempre establecer
la causalidad de la enfermedad en cuestión
Vacunas
atenuada e inactivada
IPV
Comparación de los tipos de respuesta inmune inducida por
virus replicativos vs inactivados
Killed polio vaccine
(Salk)
Serum
IgG
Serum
IgG
512
Reciprocal virus antibody titer
Live polio vaccine
(Sabin)
128
32
Serum IgM
Serum IgM
Nasal IgA
Serum IgA
8
Serum IgA
2
Duodenal IgA
Nasal and
duodenal IgA
1
Vaccination
4
8
96
Days
48
Vaccination
9
6
Vacuna atenuada: Ej. Polio 3 - Sabin
Investigación de las bases genéticas de su atenuación
Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin
Bases genéticas de su atenuación
VIRUS
P1 Sabin
MUTACIÓN
(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCLEOTÍDICA)
5´UTR (480)
VP1 (1106)
VP1 (1134)
VP3 (3225)
VP4 (4065)
P2 Sabin
5´UTR (481)
VP1 (1143)
P3 Sabin
5´UTR (472)
VP3 (3091)
Regiones no codificantes
Regiones reguladoras
Replicación
Transcripción
Traducción
Vacuna atenuada: Ej. Polio 1, 2 y 3 - Sabin
Bases genéticas de su atenuación
VIRUS
MUTACIÓN
(LOCALIZACIÓN/POSICIÓN NUCL EOTÍDICA)
P1 Sabin
5´UTR (480)
VP1 (1106)
VP1 (1134)
VP3 (3225)
VP4 (4065)
Regiones codificantes:
Proteínas de cápside
P2 Sabin
5´UTR (481)
VP1 (1143)
P3 Sabin
5´UTR (472)
VP3 (3091)
Otras proteínas?
Reducción de la incidencia de poliomielitis
Países endémicos
Países No endémicos
Países libres de Polio salvaje
1988
1994
2000
2003
Casos de Polio - 2011
Brote Polio en Isla Hispaniola
Vigilancia de Poliovirus
Clasificación de poliovirus de acuerdo al porcentaje de similitud en
VP1:
- 0.0-0.9% Poliovirus Sabin relacionado.
- 1.0-14.9%. Poliovirus Sabin derivado (VDPV).
- mayor a 15%. Poliovirus Salvaje.
VDPVs se dividen en:
− iVDPV: asociados a personas inmunodeficiencias primarias.
− cVDPV: asociados a transmisión sostenida persona a persona y pueden
causar brotes.
-aVDPVs: ambiguos, no se pueden definir como iVDPVs o cVDPVs.
Recuperados del medio ambiente.
Tratamiento antiviral
PLECONARYL
Bibliografía
•
•
•
Fields Virology. David M. Knipe and Peter M. Howley. Fifth edition.
Lippincott Williams and Wilkins. 2007.
Principles of Virology. Molecular Biology, Pathogenesis, and Control of
Animal Viruses. S.J.Flint, L.W.Enquist, V.R.Racaniello, A.M.Skalka. Third
edition. ASM PRESS. Washington, D.C. 2009.
Kew OM, Wright PF, Agol VI, Delpeyroux F, Shimizu H, Nathanson N,
Pallansch MA. Circulating vaccine-derived polioviruses: current state of
knowledge. Bull World Health Organ. 2004 Jan;82(1):16-23