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Perspectiva general de sistema doble híbrido para identificar y caracterizar interacciones entre una proteína y otra. Se muestran los componentes y la
operación básicos del sistema doble híbrido, originalmente ideado por Fields y Song (Nature 340:245–246 [1989]) para funcionar en el sistema de
levadura para hornear. 1) Un gen reportero, sea un marcador seleccionable (esto es, un gen que confiere crecimiento prototípico en medios selectivos, o
que produce una enzima para la cual existe una valoración colorimétrica de colonia, como β-galactosidasa) que sólo se expresa cuando un factor de
transcripción se une torrente arriba a un potenciador enlazado a cis (barra de color rojo oscuro). 2) Una proteína de fusión “señuelo” (DBD-X) producida a
partir de un gen quimérico que expresa un dominio de unión a DNA (DBD; que suele derivarse de la proteína Gal 4 de levadura o la proteína Lex A
De: Genética molecular, DNA recombinante y tecnología genómica, Harper. Bioquímica ilustrada, 29a edición
bacteriana, ambas proteínas de unión a DNA con afinidad alta y especificidad alta) modular fusionado en cuadro a una proteína de interés, aquí X. En
MurrayseRK,
Bender
DA, si
Botham
Kennelly
PJ,interactuar
Rodwell VW,
P. Harper.
Bioquímica
29a edición;
2013
experimentosCitación:
doble híbrido,
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proteína
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conWeil
la proteína
X. La
proteína Xilustrada,
presa puede
fusionarse
enEn:
su totalidad
http://mhmedical.com/
Recuperado:
June
06,
2017
o a menudo de manera alternativa sólo una parte de la proteína X se expresa en cuadro con el DBD. 3) Una proteína “presa” (Y-AD), que representa una
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fusión de unaCopyright
proteína específica
fusionada Education.
en cuadro con
un dominio
de activación transcripcional (AD; que suele derivarse de la proteína VP16 del virus
del herpes simple o la proteína Gal 4 de levadura). Este sistema sirve como una prueba útil de interacciones entre una proteína y otra entre las proteínas