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TERAPIAS BIOLÓGICAS DESDE
EL LABORATORIO
Javier Gonzálvez Aracil MIR-3
ÍNDICE
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INTRODUCCIÓN.
CITOQUINAS.
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TERAPIAS ANTI-CITOQUINAS.
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Funciones.
Acciones.
Medición.
Antagonistas de los receptores solubles.
Anticuerpos monoclonales(mAb).
Antagonistas de los receptores de la superficie celular.
INMUNOGENICIDAD DE LAS TERAPIAS BIOLÓGICAS.
DETECCIÓN DE LA INMUNOGENICIDAD.
CONCLUSIONES.
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS BIOLÓGICAS.
INTRODUCCIÓN
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Las terapias biológicas, bioterapias o biofármacos son
tratamientos dirigidos contra dianas biológicas, quepermiten de
manera precisa atacar una molécula o una célula clave en el
proceso de la enfermedad, y están basadas en la
administración exógena de diversos tipos de moléculas
sintéticas, relacionadas con la respuesta inmunitaria
(anticuerpos, receptores solubles, citoquinas o antagonistas de
citoquinas).
Las indicaciones terapéuticas actualmente aprobadas para el
uso de las terapias biológicas se centran enenfermedades
reumáticas, enfermedades inflamatorias del aparato digestivo y
de la piel y algunos tipos decáncer
INTRODUCCIÓN
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Tienen un elevado coste sanitario, por lo que su
elección debe estar justificada por criterios clínicos,
perfil/comorbilidades del paciente y seguridad.
También es necesario implantar la determinación
analítica de los niveles del fármaco y anticuerpos
frente a los distintos principios activos, ya que la
existencia de estos últimos evita escaladas de dosis y
facilita un rápido cambio de tratamiento.
Las terapias biológicas incluyen anticuerpos
monoclonales, citoquinas, vacunas terapéuticas, el
bacilo de Calmette-Guérin, los virus dirigidos contra
células tumorales, la terapia génica y la transferencia
adoptiva de linfocitos T.
CITOQUINAS
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Las citoquinas son un grupo de proteínas o
glucoproteínas de bajo peso molecular, secretadas
por células del sistema inmune principalmente.
Dentro de la inmunidad innata, los macrófagos son
las células más comprometidas en su síntesis,
mientras que en el sistema inmune adquirido son los
linfocitos T colaboradores (Th), ya que sus
citoquinas son esenciales para la respuesta inmune.
CITOQUINAS: FUNCIONES
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Funciones de las citoquinas
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Diferenciación y maduración celular
Inflamación y respuesta inmune local y sistémica
Reparación tisular
Hematopoyesis
Apoptósis
CITOQUINAS: ACCIONES
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El perfil de las citoquinas secretadas por los linfocitos Th
determina el tipo de respuesta inmune, y estos a su vez son
estimulados por otras citoquinas.
Si predominan citoquinas Th1 Interferón gamma (INF-γ),
Interleucina2 (IL-2), y factor de necrosis tumoral (TNF) la
respuesta es pro-inflamatoria, citotóxica o antitumoral, mientras
que si predominan las citoquinas Th2 (IL-4, IL-9, IL-10) es antiinflamatoria o pro-tumoral.
estas respuestas son antagónicas entre sí, creando una
regulación cruzada particular; ya que las citoquinas que
favorecen la inmunidad humoral inhiben las acciones de las
citoquinas que ayudan a la inmunidad celular y viceversa .
CITOQUINAS:MEDICIÓN
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Se usan dos tipos de ensayos: biológicos e inmunológicos.
Ensayo biológico: es a menudo la prueba más sensible para una citoquina
particular. Este tipo de ensayo implica examinar el efecto de una muestra de
prueba en una línea celular. La proliferación, producción de anticuerpos, o
cambios en el fenotipo de la superficie celular son ejemplos de las respuestas
que se pueden medir. los bioensayos a menudo sufren de falta de
especificidad y pueden ser difíciles de realizar. Además algunos inhibidores de
la actividad de citoquinas, pueden interferir con estos ensayos.
Inmunoensayo: estos emplean anticuerpos para capturar y detectar una
citoquina específica. Hay muchas técnicas que se pueden utilizar, pero el
método más común es el ELISA tipo sandwich. La cantidad absoluta de
citoquinas puede calcularse usando una curva de calibración, obtenida al medir
varias soluciones con concentraciones conocidas de citoquina recombinante.
Los inmunoensayos son Más simples y reproducibles que los ensayos
biológicos, aunque anticuerpos con reactividad cruzada pueden dar lugar a
falsos positivos, al igual que la presencia de factor reumatoide.
CITOQUINAS: MEDICIÓN
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Otros artefactos que pueden interferir con los ensayos son:
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La degradación de las citoquinas por proteasas o su incorporación por los receptores en
las células activadas
Los receptores solubles en la muestra pueden interferir con la actividad biológica de la
citoquina o bloquear los epítopos reconocidos por el anticuerpo.
Las citoquinas también pueden ser absorbidas por proteínas de la matriz, y no serían
detectadas mediante ensayos estándar.
Para llevar a cabo una correcta interpretación de los niveles de citoquinas, deben
considerarse los perfiles Th1 y Th2, la fisiopatología de la enfermedad en la que
estén siendo estudiados y el conocimiento del ensayo usado con sus posibles
interferencias.
TERAPIAS ANTI-CITOQUINAS
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Estás moléculas pueden actuar:
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a) Como antagonistas de los receptores solubles
b) Como anticuerpos monoclonales de citoquinas y/o de sus receptores
c) Como antagonistas de los receptores de la superficie celular
Los sufijos empleados en los nombres de los agentes terapéuticos,
transmiten información específica relacionada con su estructura.
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cept: se refiere a la fusión de un receptor en la porción Fc de la IgG1 humana
mab: indica un anticuerpo monoclonal (mAb).
ximab: indica un mAb quimérico (mAb con porciones murinas y humanas)
xumab: indica un mAb humanizado.
TERAPIAS ANTI-CITOQUINAS
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Las ventajas de la humanización incluyen la mejora en la
interacción de la Fc con los receptores en las células efectoras,
una menor inmunogenicidad y la prolongación de la vida
media.
Antagonistas de los receptores solubles
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Son formas truncadas de los receptores de superficie que carecen
de los dominios intracitoplasmáticos y transmembrana. Sin
embargo, conservan afinidades de unión comparables a las de los
receptores de membrana de longitud completa. Se unen a sus
citoquinas objetivo en el suero, inhibiendo la unión de la citoquina
con sus receptores de superficie
Las proteínas de fusión solubles deben permanecer en la
circulación semanas para tener efecto terapéuticos.
TERAPIAS ANTI-CITOQUINAS
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Anticuerpos monoclonales (mAb)
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Los mAb están diseñados para tener una mayor afinidad
por una citoquina dada, uniéndose a ésta, tanto si está libre
en el suero como si se encuentra unida a la superficie
celular.
Antagonistas de los receptores de la superficie
celular
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Son proteínas inactivas que compiten con una citoquina
para unirse a su receptor. Estos antagonistas deben unirse
a más de un 90 por ciento de los receptores de superficie
para que el tratamiento sea eficaz.
INMUNOGENICIDAD DE LAS
TERAPIAS BIOLÓGICAS
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Hay una mejoría inicial en el 60-70% de los pacientes con diversas
patologías, pero hay un número significativo de pacientes que no
responden (resistencia secundaria) o sufren efectos adversos.
Esta variabilidad en la respuesta se explicada por varios mecanismos:
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Que se trata de enfermedades con diferentes fisiopatologías.
Que existen fluctuaciones intra e inter individuales de las concentraciones
efectivas del biofármaco a las dosis habituales.
Estas fluctuaciones son consecuencia de
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La neutralización del sitio activo donde actúa el biofármaco por
anticuerpos anti-fármaco (ADA), que no necesariamente causa eventos
adversos, pero puede conllevar a pérdida de eficacia, neutralización de la
contraparte endógena o efectos generales en el sistema inmune como
reacciones anafilácticas.
Aceleración del aclaramiento independiente de la presencia de ADA.
Alto aclaramiento de la molécula independiente de la presencia de ADA.
INMUNOGENICIDAD DE LAS
TERAPIAS BIOLÓGICAS
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La inmunogenicidad de las terapias biológicas se traduce en el
desarrollo de anticuerpos contra esas moléculas. Las
consecuencias clínicas varían según el tipo de anticuerpo
presente:
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Anticuerpos neutralizantes son aquellos que se unen al sitio
activo de la proteína terapéutica y por lo tanto inhiben su función,
neutralizándola. A títulos altos se observa una reducción en la
respuesta al tratamiento, llegando al fracaso terapéutico.
Anticuerpos no neutralizantes son aquellos que no afectan su
actividad intrínseca, ni al sitio receptor. Aparentemente no tienen
efectos biológicos, pero pueden formar inmunocomplejos que
pueden alterar la farmacocinética de la proteína administrada Los
anticuerpos presentes pueden ser de varios isotipos (IgM, IgG,
IgE) y varias sub-clases (IgG1).
INMUNOGENICIDAD DE LAS
TERAPIAS BIOLÓGICAS
INMUNOGENICIDAD DE LAS
TERAPIAS BIOLÓGICAS
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El desarrollo de ADA varía según el fármaco y la patología del
paciente, sin asociación entre la formación de anticuerpos y la
disminución de la respuesta clínica.
Esto puede ocurrir desde etapas tempranas (cuatro semanas) hasta
etapas tardías (dos o más años) ya que es un proceso dinámico, por
lo que la determinación de la frecuencia de inmunogenicidad en los
ensayos clínicos (de corta duración) está infraestimada.
La presencia de ADA no siempre supone la ausencia de acción del
fármaco, ya que ésta depende del equilibrio entre los niveles del
fármaco y los del ADA, así como los de fármaco necesarios para
obtener resultados. De igual forma depende de si el ADA es
neutralizante o no.
En general, los ADA detectables reducen la tasa de respuesta hasta
en un 68%.
Los pacientes con ADA contra un primer biofármaco tienen mayor
riesgo de desarrollar anticuerpos contra un segundo.
DETECCIÓN DE LA
INMUNOGENICIDAD
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Las pruebas se realizan con poca frecuencia debido
a la limitada disponibilidad, pero la necesidad de
monitorización de estos tratamientos se debe a que:
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1. Son medicamentos utilizados a largo plazo para
enfermedades que tienen un patrón de
reagudización/remisión variables, para los cuales es difícil
evaluar la efectividad del fármaco sólo con la clínica.
2. Los medicamentos biológicos son muy costosos, y una
individualización de la dosis pudiera reducir los costos de
manera significativa.
DETECCIÓN DE LA
INMUNOGENICIDAD
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Los ensayos validados para la medición de concentraciones de fármacos
biológicos son fiables y pueden ser comparados entre laboratorios, pero los
resultados de los ensayos para ADA deben ser interpretados con precaución,
ya que deben ser validados de forma cruzada entre los laboratorios y deben
utilizar las mismas muestras de referencia para permitir una comparación
directa de los resultados.
Los resultados de los ensayos de anticuerpos también dependen del tiempo y
de la frecuencia de la toma de muestras de sangre, del tiempo trascurrido entre
la última inyección del biofármaco y la toma de la muestra, y es importante
considerar la sensibilidad y la especificidad de los métodos utilizados para
determinar la presencia de anticuerpos.
Las unidades no están estandarizadas y no están reportadas, por lo que es
imposible hacer cualquier comparación entre diferentes pruebas de laboratorio.
Adicionalmente, el desarrollo de ADA parece que varia entre las distintas
enfermedades.
La toma de la muestra para la detección de los niveles de fármaco y los títulos
de ADA se debe hacer antes de la siguiente infusión del fármaco (nivel valle).
DETECCIÓN DE LA
INMUNOGENICIDAD
Algoritmo de evaluación y seguimiento
CONCLUSIONES
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Los componentes inmuno-específicos, que desempeñan un papel
central en la patogénesis de la enfermedad, se prestan a la terapia
biológica dirigida.
Las terapias biológicas teóricamente pueden diseñarse contra un
número ilimitado de dichos componentes.
El objetivo de la terapia biológica es modificar el curso de la
enfermedad, limitar las complicaciones de los tratamientos
convencionales y ofrecer opciones para enfermedades refractarias al
tratamiento convencional.
Estos agentes son costosos y no están exentos de riesgo, por lo que
la realización de una cuidadosa selección de los pacientes es crucial.
La monitorización debe implementarse de forma rutinaria en los
pacientes que reciban dichos tratamientos.
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS
ANEXO: ALGUNAS TERAPIAS
BIOLÓGICAS