Download polimorfismo génico

Afecta:
 regiones
codificantes
(polimorfismo génico)
 regiones no
codificante
Una variación en los genes
polimorfos ( alrededor de
25.000) una cuarta parte,
determina el polimorfismo
génico.
Se pueden
distinguir dos
situaciones :
Sin efecto
fenotípico
Con alteración
del fenotipo

La causa mas frecuente son mutaciones en el
gen que codifica la enzima galactosa1fosfato uridiltrasferasa (GALT).
 Los niños afectados son homocigotos en
el locus GALT para un alelo mutante.
 La frecuencia de estos alelos varían
mucho dependiendo de la población
considerada.
http://commons.wikimedia.org/wiki/File:Autorecessive-
Imagen: biología molecular de José Luque
http://www.memechef.com/memes/view/771/meme-fraid
Existen regiones del ADN que forman
parte del gen pero no codifican su
producto génico.
Promotores
 Intrones
 Regiones 5’ 3 ’

o
La mayor parte de las mutaciones del
genoma ocurren en regiones del ADN
que no codifican ningún producto.
o Los cambios de base s en este ADN no
tienen efecto fenotípico: es decir no
se altera la secuencia, la
estructura o la función proteica,
por lo que no tiene ningún interés
patológico directo.
hemos determinado que
el arma homicida fue un
cuchillo de sushi..
¿Tendría hambre el culpable? ¿Quizás
no consiguió salmón en su supermercado
y regreso enfadado a casa?
Dejemos las especulaciones para los
escritores de telenovelas mexicanas…
Ahora que tenemos las Evidencias..
Analicémoslas y Acabemos con este
caso.. Me dio hambre tanta
especulación…
o
o
o
Se utilizan distintas estrategias
La forma mas directa es la secuencia de
ADN
Se suele acudir a otras técnicas (ej. RFLP)
Se basa en la detección
de las variaciones de la
secuencia del ADN que
tienen como
consecuencia un
cambio en una diana de
restricción
Restriction Fragment
Length Polymorphism o
Polimorfismo en la
longitud de los fragmentos
de restricción
Me da flojera muchachos…
Estúdiense en capitulo 27
del Luque… y dejémoslo así
Bueno.. Ya nos metimos
con Chávez… Sigamos
investigando a nuestros
sospechosos…
Imagen: bioquímica con aplicación técnica Thomas
Producción de una sonda reactiva
Primero tengamos en cuenta algunas
cosas…
o
o
o
o
o
Solo se puede aplicar en muestras que
estén nucleadas
Se utilizan marcadores (sondas)
Este estudio se basa en la hibridación
Los fragmentos se analizan por el
método de SOUTHERM
Se realiza mediante una electroforesis
Imagen: biología celular y genetica de
B
A
C
1.- Extraemos
la muestra de
Insertamos
endonucleasas
deADN
restricción
o2.-
o
o
ADN
Endonucleasas
de restricción
3.- Realizamos una electroforesis en Electroforesis
gel de agarosa
Papel
Absorbente
o
oLa solución
salina por
capilaridad fluye
hacia arriba a
través de todas
las capas
superiores.
Filtro de
4.- Se coloca el gel sobre papel
Nitrocelulosa
absorbente húmedo con
oUna vez adherido
disolución salina, y sobre el gel un
filtro de nitrocelulosa y luego otrase hibrida con ADN
marcado
capa de papel absorbente.
Gel
Agarosa
Papel
Absorbente
A
B
C
Día
Paso
Descripción
1
1
Se prepara la digestión y se incuba durante unas 2 horas
2
Los productos de digestión se colocan en el gel de
agarosa y se someten a electroforesis durante unas 2
horas
3
Se tiñe el gel, se visualiza con luz ultravioleta u se
fotografía
4
Se lava el gel en hidróxido sódico, se prepara la
transferencia de Southern y se deja transfiriendo toda la
noche
5
Se desmonta la transferencia y se fija el ADN a la
membrana
6
Se marca radiactivamente la sonda
7
La sonda y la membrana se hibridan durante toda la
noche
2
Imagen: biología molecular de José Luque
Imagen: biología molecular de José Luque
Imagen: biología celular y genetica de
imagen:
Consideraciones
Cantidad de ADN
necesario
Tiempo medio
Adecuación a la
automatización
Resultados erróneos
Problemas de
contaminación
Técnica de Southern
Aprox. 5 microg
4 – 5 días
No
Infrecuente
Raro
o
Diagnostico de la paternidad biológica y
seguimiento de arboles genealógicos
o
Identificación de sospechosos en procedimientos
penales, por comparación con el ADN procedente
de diversos restos biológicos (sangre, semen,
saliva, raíces de cabello, tejidos corporales
diversos, piezas dentales, etc.)
o
Identificación post-mortem de individuos, en casos
judiciales o catástrofes
o
Otras aplicaciones de interés diverso. Por ejemplo,
es posible aplicar esta metodología a muestras
clínicas con el fin de comprobar identidad de las
biopsias, posibilidades de trasplante, inestabilidad
genética característica de ciertos tumores, etc.
http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/kidneytransplantat
http://www.enciclopediasalud.com/categorias/terapias/articulos/
Los son fruto de la biología
molecular
la informática,
En el futuro se podrá
disponer yde
están destinados al
marcadores tan fiables y sofisticados
diagnostico molecular del
que pudiese diagnosticarse
futuro precozmente
discriminando de una
la alteración molecular!???
manera mas sencilla, rápida y
automatizada la presencia de
la enfermedad
Se trata de placas de silicio, vidrio u otro material, a
cuya superficie se han adherido de manera ordenada y
conocida, diversas moléculas de ADNc especificas para
un determinado gen y así detectar en que posiciones se
encuentra el marcaje y diagnosticar la enfermedad
Imagen: biología molecular de José Luque
BIEN, YA ANALIZAMOS LA EVIDENCIA
CERREMOS
ESTE CASO
Sospechoso 2
Sospechoso 1
y EL CULPABLE
es……..
ACERTARON.. EL
SOSPECHOSO 1
Imagen: bioquímica Lehninger
Biología
Molecular
José Luis Luque
Bioquímica
con
aplicaciones
clínicas.
Thomas
Devlin
Biología Celular y
Genética.- Mosby
Bioquímica. Lehninger