Download Slide 1

Transporte Membranal
JA Cardé, PhD
Biol – 4019 -Lab Biología Celular
Molecular
Universidad de Puerto Rico - Aguadilla
Objetivos
• Distinguir los componentes de la membrana
plasmática.
• Diferenciar las proteínas periféricas de las
integrales en términos de su localización y
función.
• Explicar el concepto de permeabilidad de la
membrana.
• Identificar la proteína integral envuelta en el
paso de una sustancia a través de la
membrana plasmática.
Introducción
• Las membranas celulares están compuestas de una
capa doble de lípidos y proteínas (periféricas e
integrales (transmembranales)).
• La doble capa forma un emparedado de lípidos con
los rabos hidrofóbicos hacia dentro y las cabezas
polares expuestas hacia el exterior.
• En estas se incluyen una gran variedad de enzimas,
proteínas adhesivas, receptores, canales, bombas y
acarreadores. En este módulo estudiaremos las
proteínas integrales y su función en la permeabilidad
de la membrana.
Membrana Citoplásmica
Proteínas Integrales
• Forman poros que proveen un pasaje selectivo
de iones y moléculas grandes que no son
capaces de pasar por difusión simple a través de
la doble capa de lípidos de las membranas
celulares.
• Permiten a la célula controlar el tráfico a través
de las membranas, lo que es esencial para
muchos procesos fisiológicos.
• Las proteínas integrales que controlan la
permeabilidad de la membrana se clasifican en
tres clases: bombas, acarreadores y canales.
Proteínas Integrales
• 1. Las bombas son
enzimas que obtienen
energía de diversas
fuentes como lo son el
ATP, la luz y el
movimiento de iones. Las
mismas establecen
gradientes de
concentración entre los
compartimientos.
Proteínas Integrales
• 2. Los acarreadores son enzimas que proveen difusión
facilitada (transporte pasivo) a través de la membrana, en
la mayoría de los casos a favor del gradiente.
• Algunos acarreadores utilizan el movimiento de un
soluto a favor del gradiente para acarrear un segundo
soluto en contra del gradiente.
• Tres clases:
– Unipuerto transporta un solo soluto a favor del gradiente.
– simpuerto transporta dos solutos a la vez y hacia la misma
dirección. Uno de los solutos va a favor del gradiente y el otro
en contra del gradiente.
– antipuerto transporta dos solutos hacia direcciones opuestas.
Uno de los solutos va a favor del gradiente y el otro en contra
del gradiente.
Proteínas Integrales
• 3. Los canales son poros específicos para la difusión de
iones y usualmente abren y cierran rápido. Cuando un
canal esta abierto, el flujo de iones pasa rápidamente a
través del mismo, guiados por un gradiente
electroquímico. El movimiento de iones a través de la
membrana controla los potenciales eléctricos a través
de la membrana.
Electroporación
• La electroporación
produce una
transformación más
eficiente que los métodos
químicos.
• La eficiencia de este
procedimiento depende
de la fuerza del campo
eléctrico, el largo del
pulso eléctrico y la
concentración del DNA.
• Cubreobjetos
Materials
• Escarpelo
•
•
•
•
•
•
•
•
Goteros
Hojas de Elodea
Laminillas de microscopio
Microscopio
Papel absorbente
Solución salina al 10%
Solución de glucosa al 2%
Solución de almidón
Protocolo:
• Obtenga una hoja de Elodea y prepare un montaje
húmedo con ella.
• Observe la misma en el microscopio con el objetivo de 40
X. Asegúrese que observa muy bien la distribución de los
cloroplastos.
• Coloque un pedazo de papel absorbente por uno de los
extremos del cubreobjeto.
• Añada una gota de la solución salina por el extremo del
cubreobjeto opuesto al papel absorbente.
Protocolo:
• Observe con detenimiento el movimiento de los
cloroplastos. Esto es indicativo de la entrada de la
solución a través de la membrana celular. Estime el
tiempo desde el momento en que usted coloca la gota de
la solución salina hasta el momento en que los
cloroplastos comienzan a moverse.
• Repita los pasos 1-4 con la solución de glucosa al 2%, la
solución de almidón y la solución de lisoenzima.
• Anote sus resultados en la tabla provista en la pregunta
1.
Preguntas
• Utilice la tabla en Excel para que compare y contraste los
resultados obtenidos.
• Justifique las contestaciones de la pregunta anterior.
• Para este ejercicio práctico utilizamos hojas de Elodea. Si este
ejercicio se repite con células de ratón, ¿Observará los mismos
resultados? Explique su contestación.
• El peso molecular de la proteína lisoenzima es de 14.4 kda y el de
la proteína BSA es de 66.6 Kda. ¿Cuál de ellas entrará más rápido
dentro de la célula de Elodea? ¿Por qué?
• Si usted fuera a diseñar el procedimiento de este ejercicio. ¿Qué
modificaciones usted sugiere para el mismo? ¿Por qué?
.