Download Problemas de preparación de soluciones

Document related concepts
no text concepts found
Transcript
Problemas de preparación de soluciones
1.
Para la extracción de una enzima se necesita preparar la siguiente solución
amortiguadora: 250 mM Sacarosa, 2 mM EDTA, 1 mM ATP, 70 mM Tris/HCl pH 8.0,
BSA 1% y 15 mM -mercaptoetanol. Datos: peso molecular de la sacarosa es 342.3
g/mol, EDTA 368.4 g/mol, BSA 66.43 g/mol. El ATP fue preparado previamente y la
solución está a una concentración de 300 mM pH 7.0 (ya que el ATP se hidroliza
fácilmente a pHs ácidos), Tris o Trizma base (sólido) tiene un pH 9.0 en solución,
peso molecular 121.1g/mol y disponen de HCl para ajustar el pH. El mercaptoetanol es líquido, peso molecular 78.13 g/mol, =1.115g/mL, pureza 99%.
2. Par la detección de fosfatos por el método de Summer se necesita preparar 6.6% de
molibdato de amonio en 7.5 N de H2SO4. Peso molecular H2SO4 49 g/mol, =1.84
g/mL, pureza 99.4%.
3. Se necesita tener lista una solución amortiguadora denominada de transferencia de
proteínas, la cual contiene 25 mM de Trizma Base, 192 mM Glicina, 20% Metanol y
0.02% SDS. Peso molecular glicina 75.07 g/mol.
4. Se necesita preparar una solución 4 M wormanina, tomando en consideración que
el reactivo lo venden en un vial que contiene 0.25 mg y una vez abierto hay que
disolverlo todo:
a. ¿Cuál es el volumen total de la solución que se tendrá que preparar?
b. ¿Cuál será el volumen total de la solución si en lugar de preparar 4 M
wormanina, se hiciera una solución a 400 M? peso molecular wormanina 428.4
g/mol.
c. ¿Qué volumen de wormanina necesitan añadir a 2 mL de una solución en la que
se incuba tejido adiposo de rata, si tienen un stock preparado de 4 M wormanina
y desean que la concentración final sea de 100 M?
d. Y si usarán el stock 400 M ¿qué problemas encontrarían para tener 2mL de
solución 100? Y ¿cómo lo resolverían?
5.
Las soluciones que llevan reactivos susceptibles a procesos redox, generalmente se
preparan justo antes de usarse. Un reactivo caro y que generalmente se utiliza para
medir actividad enzimática es el NAD+. Se necesita preparar una solución que
contenga 5 mM de NAD+, 50 mM de amortiguador de fosfatos pH 7.0 y 1 M de NaCl.
Ya se tiene preparada la solución con todos los componentes excepto NAD +, el cual
para evitar desperdiciarlo se añadirá sólido. ¿Cuánto de NAD+ hay que pesar? Peso
molecular 663.43 g/mol, volumen total de la solución 20 mL.