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Symborg S.L. Campus de Espinardo, 7 Edificio CEEIM 30100 Murcia España Estudio de la actividad biológica y nematicida de MycoUp Attack en el desarrollo de plantas de Tomate en condiciones de invernadero. Félix Fernández Martín Antonio José Bernabé García Antonio Alarcón Vera Gonzalo Calvo Estudio de la actividad biológica y nematicida de MycoUp Attack en el desarrollo de plantas de Tomate en condiciones de invernadero. Autores: Félix Fernández Martín1 Antonio José Bernabé García1 Antonio Alarcón Vera2 Gonzalo Calvo2 . SYMBORG.SL. Campus de Espinardo 7. Edificio CEEIM. 30100 -Murcia 2 . Escuela Técnica Superior de Ingeniería Agronómica. (ETSIA). Universidad Politécnica de Cartagena (UPCT). 1 Edición: 2012 Índice Introducción. 006 Materiales y Métodos. 008 Resultados y Discusión. 013 Producción. 026 Calidad. 027 Conclusiones. 030 Recomendaciones. 031 Literatura consultada. 032 Estudio de la actividad biológica y nematicida de MycoUp Attack en el desarrollo de plantas de Tomate en condiciones de invernadero Félix Fernández Martín Antonio José Bernabé García Antonio Alarcón Vera Gonzalo Calvo 006 Introducción Symborg Los nematodos formadores de agallas son parásitos biótrofos que han evolucionado y desarrollado estrategias para infestar de manera exitosa diversas especies de plantas. La mayoría de ellos pertenecen al orden Rhabditida. Dentro de este orden, los fitonematodos del género Meloidogyne son responsables de grandes pérdidas en cultivos de importancia económica. Estos fitoparásitos tienen un ciclo de vida complejo. La planta es parasitada por el juvenil de segundo estado (J2) o juvenil infectivo. Durante el parasitismo, el nematodo se establece y mantiene una estrecha relación con el hospedante. Los J2 son atraídos a la zona de elongación, donde penetran la raíz y luego migran intercelularmente, separando las células por la lámina media en el tejido cortical. Este proceso parece incluir fuerzas mecánicas y secreciones enzimáticas del nematodo. El control biológico es una alternativa de manejo de poblaciones de nematodos a través de mecanismos tales como parasitismo, depredación, competencia y antibiosis. Sin embargo, el mecanismo de acción puede suceder por la liberación de compuestos nematicidas o nematostáticos y/o fomentando el desarrollo de organismos antagonistas del nematodo. Muchos de los microorganismos antagonistas presentan actividad quitinolítica o capacidad para degradar la quitina, complejo proteínico presente en la capa media de la pared del huevo del nematodo. Polímeros de hidratos de carbono como quitina y lignina, así como sus productos derivados de su degrada- 007 Symborg ción microbiológica, se emplean como enmiendas para la disminución de nematodos fitoparasíticos. Algunos investigadores encontraron una disminución en el número de juveniles y nódulos radicales de Meloidogyne spp, en plantas sembradas y tratadas con enmiendas en base de quitina. Aplicando restos del exoesqueleto de camarones al suelo antes de la siembra, se lograron reducir los daños de Meloidogyne incognita en plantas de tomate. Por otra parte, algunos autores indican que las micorrizas arbusculares establecen un nivel radical en una relación simbiótica que le posibilita a las plantas una mejor absorción, especialmente de los nutrientes pocos solubles y/o móviles. Las infecciones radicales por nematodos patógenos, son generalmente menores sobre plantas en relación simbiótica con la micorriza que sobre plantas que no tienen esta relación. Sin embargo, las respuestas pueden variar según el tipo de hongo y los mecanismos involucrados son controversiales. El mecanismo por el cual la presencia de micorrizas limita la reproducción de los nematodos y en otras no lo hace, no está aun dilucidado. La empresa Symborg ha desarrollado un nuevo producto, MycoUp Attack, formulado a base de un hongo formador de micorrizas y un complejo órgano metálico (Attack), con lo cual pretende realizar un control efectivo de las poblaciones de nematodos en suelo. Es por ello que el objetivo de este estudio fue conocer el efecto de la aplicación de este producto sobre el control de fitonematodos, actividad biológica y la producción de dos variedades de tomates sensibles al ataque del fitonematodo Meloidogyne incognita. 008 Materiales y Métodos Symborg El ensayo se realizó en una parcela de 120 m2 situada en el paraje conocido como “La Palma”, ubicado en el término municipal de Cartagena, en las instalaciones de la Finca Experimental Agroalimentaria “Tomás Ferro” pertenecientes a la Universidad Politécnica de Cartagena (UPCT). El ensayo se estructura en dos partes: Preventivo y Curativo, divididas en 3 tratamientos: • T1: Tratamiento Control. • T2: Tratamiento con MycoUp Attack (Glomus sp1 + Complejo Attack) • T3: Tratamiento con Nematicida Químico (Ref. V10L.h) Se realizaron 4 repeticiones de cada tratamiento para preventivo y de igual forma para curativo. Cada repetición (unidad experimental) consistió en 2 contenedores de cultivo de 30 L de capacidad, conteniendo 2 plantas cada uno. La extracción de las plantas para la toma de los datos se hicieron seleccionándolas al azar en cada tratamiento, o bien, aprovechando alguna que haya sufrido virosis, percance o anomalía. Las filas y contenedores correspondientes a toda la periferia del ensayo, no forman parte del mismo para evitar el efecto borde. El marco de plantación fue de 1,85 m entre filas separadas lo que hace una densidad de plantación de 1,80 plantas /m2. El riego y fertilización es común en toda la parcela de ensayo. Se establece una descarga de 4 l/h por contenedor de cultivo, distribuida en 2 puntos de descarga para todos los tratamientos. Se dispone de sonda de succión para la recogida de solución nutritiva directamente de la maceta a fin de controlar la conductividad eléctrica y el pH. 009 El agua de riego utilizada en la realización del ensayo procede del trasvase Tajo-Segura con una C.E. (dS/m a 25ºC) de 1,33 dS/m y un pH 7,89. Solución Fertilizante Para la realización de la fertirrigación se utilizó una solución nutritiva con el siguiente equilibrio en mM: N: 12,8; P: 1,4; K:5,5; Ca:4,8 y Mg: 2,4, para un pH final: 5,5 (con la finalidad de obtener alrededor de 6 en el gotero), un consumo estimado de ácido nítrico 59%: 0,07 l/m3. La conductividad eléctrica fue de: 2,1 dS/m. Población de nematodos y momentos de aplicación El inoculo utilizado fue extraído de un lote de turba con raíces de tomate infestadas con nematodos fitoparásitos provenientes de invernaderos de Mazarrón, provincia de Murcia. El inoculo fue homogenizado y multiplicado para garantizar una distribución adecuada de la población de nematodos y garantizar una población suficiente para la segunda inoculación. En el análisis previo para la identificación de los nematodos fitoparásitos se identifica una alta población de Meloidogyne, seguido de Heterodera y apenas algún individuo de Globodera. La primera inoculación se hace coincidir con Symborg Material Vegetal Se utilizaron dos variedades de Tomate, Raf del tipo Marmande que destaca por su sabor, textura y elevada tolerancia a aguas salinas y Daniela, variedad de larga vida. Ambas fueron seleccionadas por su baja resistencia a nematodos. 010 la fecha de plantación de la parte curativa del ensayo. La segunda inoculación se hace únicamente en la parte preventiva del ensayo, dos días antes de la primera aplicación de los productos. Plantación e inoculación Las plantas se trasplantaron en Octubre de 2011 y el cultivo se levantó en Julio de 2012, para un total de 9 meses. Inoculación de nematodos La inoculación de nematodos del ensayo curativo se realizó en octubre de 2011 coincidiendo con el trasplante del tomate. La inoculación de nematodos para la fase preventiva se realizó en noviembre de 2011. Aplicación de Glomus sp1 + Attack (MA) y V10L.h La primera aplicación de MycoUp Attack (3kg/ha) y V10L.h (8L/ha) se realizó en noviembre de 2011. La segunda aplicación de MycoUp Attack (2Kg/ha) y V10L.h (8L/ha ) se realiza en Febrero de 2012. Symborg Evaluaciones realizadas Por cada tratamiento se realizaron 2 extracciones al inicio en curativo para evaluar el nivel de infestación y en preventivo al final del cultivo con el mismo fin. Análisis de Raíces Por cada tratamiento se realizan 9 extracciones de suelo y 2 de raíces para evaluar el grosor de las raíces colonización radicular, micelio extramático, microflora total y nematología. 011 Conteo de Nematodos Para determinar la población de nematodos, se extraen los nematodos del suelo a partir de la toma de una alícuota de 250 ml de suelo, según una modificación de la metodología de decantación y tamizado combinado con embudo Baermann descrita por Román (1978). La modificación consiste en disolver la muestra de suelo en agua y posteriormente añadir la suspensión sobre tamices de 200 y 35 micrones. El suelo recolectado en el tamiz más fino (35) se colocó sobre rejillas de metal con un filtro de papel en un embudo Baermann. A las 48 horas las muestras se recolectan en tubos de 8 ml para posteriormente cuantificar e identificar las poblaciones de nematodos. Evaluación del Micelio extramátrico arbuscular Se evaluó a partir de la metodología descrita por Herrara et al, 2005, en donde posteriormente a la centrifugación y decantado de una alícuota de suelo de 50 g, se procede a tomar todo el material colectado en el tamiz de 40 micras, pasarlo por una batidora a 900 Symborg Medidas de colonización micorrízica y contenido foliar de nutrientes Se tomaron muestras de raicillas, que fueron lavadas con agua desionizada y clarificadas con una solución al 10% de KOH durante 10 minutos a 90ºC. Posteriormente se pasaron por HCl 2N, durante 10 minutos y finalmente fueron teñidas con una solución de 0.05 lacto glicerina Azul de tripano, lo que constituyó una modificación del método descrito por Phillips y Hayman (1970). 012 rpm, filtrarlo al vacío y tomar del material colectado hasta 5 replicas cada una de 40 mg y evaluarla bajo microscopio de disección. Se cuentan dos líneas imaginarias horizontalmente y verticalmente y del promedio de micelios contados, se multiplica por el factor de corrección, 0,000745 y se extrapola a mg de micelio por gramo de muestra. Conteo de microflora microbiana asociada a la rizosfera En cada uno de los muestreos realizados con una frecuencia mensual, se hicieron diluciones seriadas de suelo rizosférico, cuantificando a través de la determinación del número mas probable de microorganismos, las concentraciones de bacterias y hongos rizosféricos presentes en los diferentes tratamientos. Para el desarrollo de bacterias, se utilizó el medio agar nutritivo y para el desarrollo de los hongos, Rosa Bengala y Patata dextrosa agar. Symborg Producción y Calidad Se llevo a cabo la valoración de la cosecha por tratamiento y repetición. Los parámetros evaluados fueron los siguientes: • Distribución temporal de la cosecha. • Peso total de la producción con distribución de calidad comercial. • Determinación de los caracteres de calidad de todos los frutos, evaluando peso medio y peso por planta. • Grados Brix y dureza del fruto. 013 Resultados y Discusión Formación de Agallas En la Figura 1 se pueden apreciar la apariencia de las raicillas después de la primera extracción a los 45 días de la inoculación de nematodos y 7 días de la aplicación del producto a ensayar. Se realizó un escaneado de alta resolución, aumentado las raíces vivas sumergidas en agua osmotizada, observando un alto porcentaje de agallas en todos los tratamientos, lo que indica una población elevada de nematodos. La segunda extracción se realizó a los 120 días de la inoculación y 83 días de la aplicación del producto a ensayar (Figura 2). En este momento ya se pudo apreciar claramente una diferencia significativa entre los tratamientos, constituyendo la aplicación de MycoUp Attack la variante con menor número de agallas y mayor número de raicillas activas, atribuyéndose esto a la acción de la simbiosis temprana de las micorrizas con las raíces, junto con el efecto nematicida del producto que proporciona mejores condiciones de desarrollo de las plantas debido a la supresión de los nematodos. Symborg T1 T2 T3 Figura 1. Raicillas del tratamiento Control (T1), MycoUp Attack (T2) y Control químico (T3) a los 45 días posteriores a la aplicación de los productos ensayados. 014 T1 T2 T3 Figura 2. Raicillas del tratamiento Control (T1), MycoUp Attack (T2) y V10L.h (T3) a los 120 días posteriores a la aplicación de los productos ensayados. La tercera extracción se realizó al final del cultivo en plantas pertenecientes a los tratamientos en fase preventiva para estimar el grado de infestación de nematodos en todos los tratamientos. En este caso se observó la misma diferencia en desarrollo y arquitectura radicular que a los 120 días, constituyendo el MycoUp Attack el tratamiento que promovió los mejores resultados, como puede verse en el escaneado de raíces vivas sumergidas en agua osmotizada (Figura 3). T1 T2 T3 Figura 3. Raicillas del tratamiento Control (T1), MycoUp Attack (T2) y Symborg Control químico (T3) al final del ensayo (9 meses). Actividad micorrízica En las siguientes tablas se presentan los valores totales de la colonización micorrízica y micelio extramátrico correspondientes a los datos tomados en las nueve extracciones realizadas a lo largo de todo el ciclo de cultivo. Días Control (%) 015 Colonización micorrízica Tratamientos Curativos. MycoUp Attack (%) V10L.h (%) 0d 11 2 10 30d 15 10 2 60d 18 40 5 90d 16 57 4 120d 9 59 8 150d 15 63 9 180d 33 71 18 210d 20 82 18 240d 18 89 22 Días Control (%) MycoUp Attack (%) V10L.h (%) 0d 13 5 12 30d 4 27 2 60d 10 39 8 90d 2 70 12 120d 22 70 22 150d 28 82 24 180d 22 82,3 16 210 d 28 87 22 240 d 24 89 24 Symborg Tratamientos Preventivos. 016 Tal y como muestran los datos, el tratamiento con MycoUp Attack ha sido el que ha obtenido una mayor colonización de micorrizas, llegando a alcanzar tanto en la parte curativa del ensayo como en la preventiva el 89%. Tanto en condiciones curativas como preventivas se vio afectada la colonización de los hongos micorrízicos arbusculares (HMA) nativos, haciéndose mucho mas negativo en presencia del V10L.h que indiscutiblemente afecta la micorrización nativa. Symborg Micelio extramátrico Tratamientos curativos Días Control (mg.kg suelo) MycoUp Attack (mg.kg suelo) V10L.h (mg.kg suelo) 30 d 223,5 248,3 173,8 60 d 173,8 260,8 223,5 90 d 273,2 422,2 161,4 120 d 223,5 471,8 173,8 150 d 347,7 682,9 173,8 180 d 347,7 720,7 186,3 210 d 173,8 397,3 235,0 240 d 484,3 608,4 183,6 017 Preventivo Días Control (mg.kg suelo) MycoUp Attack (mg.kg suelo) V10L.h (mg.kg suelo) 30 d 223,5 285,6 161,4 60 d 260,8 335,3 186,3 90 d 298,0 434,6 161,4 120 d 322,8 409,8 161,4 150 d 248,3 620,8 149,0 180 d 447,0 645,7 223,5 210 d 235,9 447,0 149,0 240 d 422,7 831,9 322,8 Symborg La evolución del micelio extramátrico fue similar a la colonización micorrízica, al igual que en el porcentaje de colonización, los mayores valores se reportaron para el tratamiento con MycoUp Attack. Las valores de micelio fueron superiores en presencia del complejo Attack, en comparación con el control y el tratamiento químico que disminuyó aun mas la expresión del micelio extramátrico de los hongos nativos. Al igual que el porcentaje de colonización los valores fueron muy similares para las dos condiciones de aplicación, llegándose a producir la mayor estimulación en el tratamiento curativo. 018 Nematología Tratamientos Curativos Juveniles vivos (J2) Días Control (n) MycoUp Attack (n) V10L.h (n) 0 52,5 51,5 55 30 46,5 36,5 15,5 60 61 23 16,5 90 63 42 29,5 120 44,5 30,5 78,5 150 155,5 22,5 33 180 137 31 42,5 210 59 14 23 240 182 19,5 73,5 Symborg Juveniles muertos (J2) Días Control (n) MycoUp Attack (n) V10L.h (n) 0 68,5 54 40 30 31,5 88,5 30,5 60 102 114 86,5 90 65 185 67,5 120 106,5 113 118 150 66 127 49,5 180 82 158,5 33 210 20 41 5,5 240 34 54 38,5 Porcentaje de Mortalidad (J2 Muertos x 100/Total J2) 019 El análisis del control de nematodos se realizó a partir de la valoración de los juveniles vivos y (J2) y el porcentaje de mortalidad de sus poblaciones. Tomando en consideración estos elementos, podemos decir que tanto el tratamiento químico como el de MycoUp Attack, mantuvieron uno niveles de J2 muy parecidos a lo largo del ensayo, demostrando el control por parte de ambos tratamientos, no así para el caso del control absoluto. No obstante, se pudo constatar que la aplicación de MycoUp Attack promovió las mayores tasas de mortalidad, unido a que estas fueron constantes a partir de los 60 dias hasta el final del ensayo, lo que pone de manifiesto su poder como nematicida, debido al efecto promovido de la acción conjunta por una parte del hongo micorrízico, y por otra del complejo Attack, que estimuló la eliminación de nematodos en la zona rizosférica. Symborg 020 El tratamiento testigo químico, solo alcanzó las mayores tasas a los 60 días, pero su efectividad estuvo muy relacionada con los momentos puntuales de su aplicación y no de manera sostenida como con el caso anterior. El control absoluto, como era de esperar, tuvo las peores tasas de mortalidad en suelo. Symborg Tratamientos Preventivos Juveniles vivos (J2) Días Control (n) MycoUp Attack (n) V10L.h (n) 0 70,5 53 53 30 91,5 45,5 14 60 41,5 4,5 3,5 90 143,5 38 49,5 120 52,5 32,5 7 150 45 62 41 180 162,5 108,5 37 210 63 14,5 30,5 240 82 14 65 021 Juveniles muertos (J2) Días Control (n) MycoUp Attack (n) V10L.h (n) 0 119 99,5 116 30 21,5 99,5 30 60 184,5 45 29,5 90 95 212 105 120 109 125,5 47,5 150 108 177,5 140 180 107 179,5 50 210 17 44 43,5 240 17 63,5 54 Symborg Porcentaje de Mortalidad (J2 Muertos x 100/Total J2) 022 Symborg En el caso preventivo, el tratamiento de V10L.h mantuvo unos niveles más bajos J2 que el tratamiento de MycoUp Attack, no obstante, en ambos casos se logró controlar la población de nematodos en comparación con el resto de los tratamientos que mantuvieron niveles muy parecidos a lo largo del ensayo. En este caso, la tasa de mortalidad arrojó resultados muy similares a la condición curativa, resultando nuevamente la aplicación de MycoUp Attack la que promovió las mayores tasas de mortalidad, constantes hasta el final del ensayo a partir de los 60 días. El tratamiento testigo químico, alcanzó las mayores tasas a los 60 y 120 días, disminuyendo después intensamente, con lo cual su efectividad estuvo muy relacionada con los momentos puntuales de su aplicación y no de manera sostenida como en el caso de las variantes con MycoUp Attack. Los restantes tratamientos tuvieron idéntico funcionamiento. Tanto en las condiciones curativas como en preventivas, MycoUp Attack ha demostrado tener una elevada tasa de mortalidad de nematodos, que mantiene en torno al 70-80% a lo largo del ciclo de cultivo. No siendo así en el tratamiento a comparar con materia activa comercial, el cual va dejando de ser efectivo con el paso de los días. 023 Actividad Rizosférica. Condición Curativa. Bacterias totales (ufc.ml suelo) Symborg Hongos totales (ufc.ml suelo) 024 Las gráficas anteriores muestran la evolución microbiana de la microflora total (Bacterias y Hongos) a lo largo del ensayo en los tratamientos curativos. Una vez mas se pone de manifiesto el efecto estimulador que tiene el tratamiento de MycoUp Attack, ya no solo sobre el control de nematodos y la propia colonización y actividad micorrízica, sino también en la estimulación de los microorganismos rizosféricos. Este efecto era esperado, teniendo en cuenta que el complejo Attack ejerce un efecto estimulador sobre la actividad biológica y la estimulación alostérica de sistemas enzimáticos como los complejos Quitinasas, Glucanasas, Peroxidasas, Lacasas, Celulasas, presente en los microorganismos rizosféricos que constituyen verdaderas herramientas antagonistas de los nematodos de suelo. Symborg Condición preventiva. Bacterias totales (ufc.ml suelo) 025 Hongos totales (ufc.ml suelo) Symborg En las gráficas de los tratamientos bajo las condiciones preventivas, se vuelve a poner de manifiesto el mismo efecto encontrado en las otras condiciones. Es bueno destacar la baja actividad microbiana encontrada en el tratamiento control y en el del V10L.h que no solo promueve una parada vegetativa en la planta derivada de su propio modo de acción químico y desinfectante, sino que afecta directamente la microflora rizosférica, disminuyendo drásticamente sus poblaciones. 026 Producción La recolección se dividió en dos condiciones, los tratamientos curativos y los tratamientos preventivos y como tal se cosechó, pesando y contando el número de frutos. Únicamente se tomaron como destrío los frutos que presentaron algún defecto o enfermedad, los cuales fueron descartados. No se descartaron los de pequeño tamaño. Una vez iniciada la recolección (08/02/12) se cosechó aproximadamente una vez por semana hasta el final del cultivo. Los datos totales de cada una de las variedades en Preventivo y en Curativo se muestran a continuación: Curativo Daniela Peso (g) Nº de frutos Peso medio Nº de plantas Frutos/ planta Peso (g/ planta) Control 27113,7 315 101,7 6 52,5 4519,0 MycoUp 49444,2 Attack 390 124,1 4 97,5 12361,1 V10L.h 385 130,5 7 55,0 6667,5 46672,3 Preventivo Daniela Symborg Peso (g) Nº de frutos Peso medio Nº de plantas Frutos/ planta Peso (g/ planta) Control 40625,8 380 118,5 6 63,3 6771,0 MycoUp 64839,1 Attack 414 149,0 5 82,8 12967,8 V10L.h 452 134,4 6 75,3 9603,3 57619,9 027 Curativo Raf Peso (g) Nº de frutos Peso medio Nº de plantas Frutos/ planta Peso (g/ planta) Control 23161,1 229 105,8 7 32,7 3308,7 MycoUp 22626,6 Attack 235 96,7 5 47,0 4925,3 V10L.h 23876 244 105,6 6 40,7 3979,3 Peso (g) Nº de frutos Peso medio Nº de plantas Frutos/ planta Peso (g/ planta) Preventivo Raf Control 27512,8 275 94,5 6 45,8 4585,5 MycoUp 29132,4 Attack 243 114,2 6 40,5 4855,4 V10L.h 253 97,9 7 36,1 3447,0 24129,1 Como se puede observar, se obtuvo un mejor rendimiento en las dos variedades, tanto en la condición de curativo como en preventivo, con el tratamiento MycoUp Attack alcanzando casi los 13 Kg/planta con la variedad Daniela y 5 Kg/planta con la variedad Raf, siendo los frutos de este tratamiento los más grandes, lo que evidencia una mejor asimilación de agua y nutrientes en el fruto. Se tomaron datos de grados Brix y dureza del fruto en recolecciones alternas, cinco ocasiones en total a lo largo de todo el periodo de producción con el fin de evaluar si la calidad del fruto se ve afectada de alguna manera. Symborg Calidad 028 Symborg Los datos medios totales de cada una de las variedades en Preventivo y en Curativo se muestran a continuación: Dureza RAF T1 T2 T3 Curativo 5,5 5 4,7 Preventivo 4,5 5,5 5,1 ºBrixRAF T1 T2 T3 Curativo 7,7 8,1 7,8 Preventivo 7,4 8,1 7,5 Dureza Daniela T1 T2 T3 Curativo 4,8 5 5,6 Preventivo 4,8 5,1 4,9 ºBrix Daniela T1 T2 T3 Curativo 6,2 6,4 6 Preventivo 6,1 6,1 5,9 No se apreciaron cambios importantes en los grados Brix provocados por la población de nematodos ni por las aplicaciones de los productos. Los valores son normales para las dos variedades alcanzando los máximos grados Brix a mitad de ciclo (8,1 ºBrix medidos en la variedad Raf y 6,4 ºBrix en la variedad Daniela, ambos datos pertenecen al tratamiento T3). La dureza del fruto tampoco se ve afectada de manera significativa ya que los valores del penetrómetro son los normales para cada variedad. En Raf los valores están entre 4,5 y 5,5 para todos los tratamientos y en Daniela de 4,8 a 5,6. Por lo que no podemos decir que los frutos hayan ganado o perdido consistencia. El producto MycoUp Attack ha demostrado tener una alta eficiencia como nematicida. 029 Symborg A modo de conclusión podemos decir que el tratamiento con MycoUp Attack mostró un desarrollo inicial más vigoroso que se mantuvo durante todo el ciclo del cultivo. El hecho más relevante es que todos los tratamientos experimentan un acusado descenso productivo a partir de aproximadamente el día 140 desde trasplante, mostrando las plantas un decaimiento severo con el envejecimiento natural y la subida térmica propia de las fechas, que favorecen la proliferación de colonias de nematodos, provocando la obtención de frutos muy pequeños sin valor comercial. Con la segunda inoculación del producto MycoUp Attack y la aplicación del producto a comparar (V10L.h), se reactiva de nuevo la producción y el desarrollo vegetativo de las plantas de una manera general en todos los tratamientos, siendo las plantas tratadas con MycoUp Attack los que muestran un mayor vigor y pronta recuperación. Esto es debido a la rápida acción de esta especie que provoca en la planta la aceleración de la actividad radicular, mostrando un mejor comportamiento que el V10L.h con el que se comparo, llegando con mejor aspecto hasta el final del ensayo, tanto en la parte curativa como en la preventiva. Para evitar este brusco descenso en la producción se recomienda realizar la segunda inoculación de MycoUp Attack aproximadamente a los 120 días para bloquear la proliferación del nematodo y fomentar de nuevo el desarrollo radicular. 030 Conclusiones • El tratamiento con MycoUp Attack, alcanza los mayores valores de colonización micorrízica y actividad de micelio extramátrico arbuscular en las dos condiciones estudiadas. • La actividad del complejo Attack en unión de la especie HMA, Glomus sp1, alcanzó los mayores valores de mortalidad de nematodos Juveniles, así como el menor número de individuos en suelos, tanto en la condición preventiva como curativa. • La actividad del MycoUp Attack generó una elevada actividad microbiana en la rizosfera, estimulando tanto poblaciones bacterianas como de hongos beneficiosos, en las condiciones estudiadas. Symborg • Con la aplicación de MycoUp Attack no solo se produjo un control efectivo de las poblaciones de nematodos, sino que las plantas de tomate de las dos variedades estudiadas alcanzaron incrementos productivos importantes en las dos condiciones, no obstante los mayores rendimientos se alcanzaron en la condición preventiva. • La aplicación del V10L.h controló las poblaciones de nematodos, pero a expensa de una disminución de la microflora rizosférica y una menor productividad en comparación con la aplicación de MycoUp Attack. 0031 Recomendaciones Symborg Aplicar MycoUp Attack a razón de dos aplicaciones de forma preventiva: 1ª: 3 Kg/ha 7 dias después de plantado y 2ª: 2kg/ha a los 120 días para bloquear la proliferación del nematodo y fomentar de nuevo el desarrollo radicular. 032 Literatura consultada Arias, F., F. Blanco y R. Vargas. 1999. Evaluación de la infectividad de micorrizas arbusculares en plantas micropropagadas de banano (Musa AAA, cv. ‘valery’) durante fases de invernadero y vivero. Corbana 25(52):173-188. Azcón-Aguilar C, Jaizme-Vega MC, Calvet C. 2002. The contribution of arbuscular mycorrhizal fungi to the control of soil-borne plant pathogens. In: Gianinazzi S, Schüepp H, Barea JM, Haselwandter K, editors. Mycorrhizal Technology in Agriculture: from Genes to Bioproducts. Birkhäuser Verlag, Switzerland; p. 187-197. Barbosa, R., E. Ribeiro y F. Acosta. 2002. Arbuscular mycorrhrzal and organic matter on the acclimation of banana-tree seedling, cv. Nanicao. Bragantia 61(3):1-9 Barea JM, Azcón R, Azcón-Aguilar C. 2002. Mycorrhizosphere interactions to improve plantfitness and soil quality. Antonie van Leuwenhoek.;(81):343-351. Benhamou, N., P.J. Lafontaine y M. Nicole. 1994. Induction of systemic resistance to Fusarium crow and root rot in tomato plant by seed treatment with chitosan. 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Campus de Espinardo, 7 Edificio CEEIM 30100 Murcia España Estudio de la actividad biológica y nematicida de MycoUp Attack en el desarrollo de plantas de Tomate en condiciones de invernadero. Félix Fernández Martín Antonio José Bernabé García Antonio Alarcón Vera Gonzalo Calvo