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Estudios previos para la selección asistida por marcadores de la respuesta al fotoperiodo en sorgo Olmos, 1 S.E .; Deninotti 2 J. ; Geremia 2 N. ; Vallejos, 2 F. 1) INTA Pergamino, R.32 km 4.5, CP 2700, Pergamino, Bs As, olmos.sofia@inta.gob.ar; 2) Carrera Ing. Agronómica, UNNOBA, Pergamino, Bs As. Este trabajo explora la transferencia de la selección asistida por marcadores (SAM) para genes de madurez en sorgo al sector privado dedicado al mejoramiento de sorgo en Argentina. En USA, se aplica SAM para lograr híbridos fotosensitivos a partir del cruzamiento de líneas parentales fotoinsensitivas, lo que facilita la producción y cosecha de semillas híbridas (Fig. 1). Los efectos aditivos mayores se deben a los alelos Ma1_ y Ma6_ mientras que la existencia conjunta del alelo recesivo ma5ma5 revierte la fotosensibilidad y acorta el ciclo. Materiales & Métodos: Se consultó la bibliografía y la base de dato Gramene a fin de localizar la ubicación física de los genes Ma1 (SbPRR37) y Ma6 (SbGhd7). Mediante BioMart de Gramene se ubicaron las variantes funcionales que convendría caracterizar para la selección asistida. En la campaña 2014/2015 en INTA EEA Pergamino, se realizó un ensayo bajo riego en BCA con dos rep. en dos fechas de siembra (fecha 1:20/11/14; fecha 2:17/12/14). Se probaron genotipos con variación en su ciclo: BMeRre, NK Facón y NK Talero (forrajeros); TOB Padrillo (silero); TOB Chané, TOB 30 T y TOB 60 T (graníferos). El momento de floración y el tiempo a cada hoja se expresó en base a sumas térmicas diarias acumuladas (°Cd) con una temperatura base de 8°C. m1m1M5M5m6m6 M1 M1m5m5M6M6 días a floración: 75 días a floración: 75 Línea R parental masculino, sorgo forrajero fotoinsensitivo POLINIZADOR) HIBRIDO M1m1M5m5M6m6 días a floración: no florecerá hasta que el fotoperiodo baje de 12 h (e.g. 21 de abril en Pergamino) Fig. 1: Protocolo para la producción comercial de híbridos fotosensitivos (Rooney & Aydin, 1999). Ma1 Ma6 Fig. 2: Variantes en los genes (http://ensembl.gramene.org). 34 Ma1 Ma6 y Fecha de siembra 2 (17/12/14) Fecha de siembra 1 (20/11/14) 34 16 16 32 32 30 30 15 15 28 28 26 26 14 24 22 13 20 BMerre Chané 18 12 16 Facón Padrillo 14 11 12 T30T T60T 10 10 8 Talero Fotoperiodo (h) Nº hojas expandidas acumuladas 1) Ma1 (Sb06g014570) se localizó en el chr 6: 40,280,414-40,290,602 (Fig. 2). Se identificaron tres alelos recesivos: Sbprr37-1 (G/-), Sbprr37-2 [G/T (K162N)] y Sbprr37-3 [C/T + G/T (K162N)]. Ma6 (Sb06g000570) se ubicó también en el chr 6: 670,721-673,363, próximo distal al anterior; se identificó un INDEL (GTCGA/-----) y un Stop responsables de los alelos recesivos: ghd7-1 y ghd7-2. Ante limitantes económicas, convendría relevar estos cuando se genotipe el panel de líneas del programa de mejoramiento. 2) Se observó gran variación fenotípica entre genotipos y fechas de siembras (Fig. 3). En fecha 1, con fotoperíodos más largos, se logró un incremento de una hoja y 153°Cd a floración. En ambas fechas, la floración de BMeRre y NK Facón se indujo posterior a la ocurrencia de un umbral fotoperiódico de 12 h. Por otro lado, NK Talero tuvo similar comportamiento que los genotipos graníferos, exhibiendo sumas térmicas a floración de 925 a 1098°Cd. Por último, el genotipo silero resultó intermedio entre el grupo BMeRre/NK Facón y el resto parental masculino línea A (sorgo granífero fotoinsensitivo COSECHA DE SEMILLAS COMERCIALES) Nº hojas expandidas acumuladas Los objetivos fueron 1) caracterizar alelos activos y nulos de los genes Ma1 y Ma6 para diseñar marcadores, 2) estudiar la variación fenotípica de madurez en híbridos, 3) predecir, en base al comportamiento de líneas e híbridos derivados, el modelo de genes presente y validar en estos los marcadores diseñados. parental femenino 14 24 22 13 20 BMerre Chané 18 12 16 Facón Padrillo 14 11 12 T30T T60T 10 10 8 Talero Fotoperiodo (h) 6 6 9 4 antesis 9 4 2 2 0 8 Tiempo termal acumulado desde la siembra (ºC) 0 8 Tiempo termal acumulado desde la siembra (ºC) Fig. 3: Variación del número de hojas y floración según genotipos y fechas de siembra. 3) Debido a la fotoinsensitividad conocida de las líneas parentales de BMeRre/NK Facón y la respuesta cualitativa de ambos, asociado al porte de planta de líneas e híbridos, se presupone en ambos un mecanismo de acción de genes de madurez similar a M1m1M5m5M6m6. Sus parentales constituyen así un material óptimo para la validación de marcadores moleculares. Bibliografía: Murphy, R.L. et al. Coincident light and clock regulation of pseudoresponse regulator protein 37 (PRR37) controls photoperiodic flowering in sorghum(2011) Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 108 (39), pp. 16469-16474. Murphy, R.L. et al. Ghd7 (Ma6) represses sorghum flowering in long days: Ghd7 alleles enhance biomass accumulation and grain production (2014) Plant Genome, 7 (2).