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Empoasca kraemeri Ross Y Moore EN Phaseolus vulgaris L. EN VILLA CLARA, CUBA Héctor P. Hernández Arboláez1, Jorge Gómez Sousa2, Yordanys Ramos González1, Ray Espinosa Ruiz1. 1. Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad Central de Las Villas. 2. Centro de Investigaciones Agropecuarias, Universidad Central de Las Villas. E-mail: hectorha@uclv.edu.cu RESUMEN: El estudio del salta hojas del frijol en Villa Clara se basó en la identificación de la especie presente, aspectos de interés sobre su incidencia, preferencia varietal, variantes de fertilización y su influencia sobre componentes de rendimiento. Para su identificación se muestrearon campos cultivados en diferentes localidades y para la fluctuación poblacional y preferencia varietal se tomaron cuatro réplicas y seis variedades en correspondencia con las variables climáticas. Se utilizó la variedad BAT-482 en dos tipos de suelos para determinar la respuesta ante la fertilización con Rhizobium, Micorrizas, Compost y Urea. La identificación de los metabolitos se realizó mediante un tamizaje fitoquímico en tejidos foliares y se promediaron el número de vainas y granos por planta. Se determinó E. kraemeri Ross y Moore como especie presente en frijol en la provincia. Los adultos invadieron los campos entre los 4 y 8 días de germinadas las plantas y las ninfas aparecieron 7 días después. Las variedades negras manifestaron mayor tolerancia y fueron más susceptibles Velasco largo y BAT-482. Solamente se presenciaron saponinas, fenoles y taninos en ICA Pijao y no en BAT482. La fertilización con Micorrizas y Compost provocó una menor incidencia en comparación con la Urea en ambos suelos. Los máximos rendimientos se alcanzaron en las variedades ICA Pijao de testa negra con un promedio de 9.32 vainas por planta con un grado de afectación de 3, Velasco Largo y BAT-482 con 3.47 y 2.62 vainas por planta como promedio respectivamente mostraron mayor susceptibilidad con un grado de afectación de 9. Palabras claves: Empoasca kraemeri, fertilizantes orgánicos, frijol común. Introducción El Fríjol común (Phaseolus vulgaris L.) es la leguminosa de mayor consumo en el mundo, siendo en las regiones tropicales es el grano de mayor importancia destinado al consumo directo de la población (Mendoza et al., 1989), ya que constituye la fuente más barata de proteína y un componente indispensable en la dieta, además de ser una fuente importante de ingresos para los pequeños productores (Socorro y Martín, 1998 y Martínez, 2007). El descenso de los rendimientos de este grano en Cuba se origina fundamentalmente por el déficit nutricional así como por la incidencia de plagas y enfermedades. Entre los principales insectos plagas que afectan al cultivo, el saltahojas (Empoasca kraemeri Ross y Moore.) es considerada la plaga más importante del genero Phaseolus según Murguido (1995), ya que puede atacar en cualquier fase fenológica y su incidencia causa mermas considerables en los rendimientos y a veces pérdidas totales. Ross y Moore (1957) explican que su importancia se debe a su amplia distribución y los daños que puede ocasionar al cultivo, tanto adultos como las ninfas, pues ellos succionan la savia por el envés de las hojas, inyectando una toxina a través de la saliva, causando un encrespamiento de las hojas y cuando el ataque es severo causa clorosis, y necrosis en los bordes (King y Saunders, 1984). Materiales y Métodos El presente trabajo se realizó en la provincia de Villa Clara entre enero del 2009 y diciembre del 2010. Los muestreos se efectuaron en áreas de frijol de seis municipios para la identificar la especie presente y se trasladaron al laboratorio de Taxonomía del CIAP, en la UCLV, utilizando las claves de Calwell y Martorell (1950), Ross y Moore (1957) y Langlitz (1964). Los estudios sobre fluctuación poblacional y preferencia varietal, se efectuaron en la época de siembra intermedia según Quintero (1996) y se emplearon seis variedades para el estudio según se muestra en la tabla 1. Tabla 1. Variedades utilizadas para determinar preferencia varietal. Nombre de la Variedad ICA-Pijao Cuba Cueto 25-9 (N) Velasco Largo Delicia 3-64 Cuba Cueto 25-9 (R) BAT-482 Color del Grano Negro Negro Rojo Rojo Rojo Blanco Los muestreos se realizaron con frecuencia semanales y para ello se utilizó el método de Murguido y Beltran (1983) para la evaluación de adultos. Las ninfas se cuantificaron de forma directa sobre las hojas y para ello se tomó en cuenta dos plantas por parcela y se realizaron colectas sobre 2 hojas en la parte superior, intermedia e inferior. Se consideraron las fases fenológicas del frijol según García (1996). Las variables climáticas se tomaron en cuenta según los datos de la estación meteorológica de Caibarien. Para la identificación de metabolitos presentes se realizó mediante un tamizaje fitoquímico según la Norma Ramal de Salud Publica 9. Para ello se tomaron 5 g del material vegetal seco de las variedades ICA-Pijao y BAT-482, se trituraron y se sumergieron en disolventes de Éter dietílico, Alcohol y Agua y se maceraron por 48 horas posteriormente se tomaron alícuotas para su identificación. La influencia de la fertilización sobre la incidencia del saltahojas se realizó en dos tipos de suelos utilizando la variedad BAT-482 y las variantes de fertilización Urea (70 kg / ha), Compost (4 t / ha), Micorrizas (5 kg / 46 kg de semilla) y Rhizobium (1 kg / 46 kg de semilla). La investigación se montó en el Huerto Sandino, Remedios, en un suelo Ferralítico Rojo Típico y en la Estación de Zootecnia de la UCLV con un suelo Pardo Mullido medianamente Lavado según Hernández et al., (1999). Cada parcela tuvo un área de 5 x 1.40 m. Se tomaron 10 plantas y se evaluaron teniendo en cuenta algunos componentes de rendimiento como el número de vainas por planta, granos por vaina y granos por planta durante la fase reproductiva. Las afectaciones se determinaron mediante la escala de Van Shoonhoven (1988). Resultados y Discusión Identificación de la especie de Empoasca predominante en frijol en localidades de Villa Clara Al tomar muestras en distintos agroecosistemas de frijol común, se identificó en todos los casos la especie Empoasca kraemeri Roos y Moore según el Dr. C. Horacio Grillo, coincidiendo con Ross y Moore (1957) y Langlitz (1964) para la especie E. kraemeri Roos y Moore, los cuales pusieron de manifiesto la existencia de diferentes especies dentro de un amplio material colectado en América del norte y Centroamérica, considerado según la literatura como E. fabae. Sergnini (1984) en estudios taxonómicos realizados sobre plantas de frijol en Venezuela detectó la presencia de 3 especies de Empoasca, E. kraemeri y E. bordía, y otra sin identificar, siendo E. kraemerí la especie predominante. Autores como Socorro y García (1986), Socorro y Martín (1989), refieren al saltahojas del frijol en Cuba como E. fabae., mientras Murguido (1995), en colectas efectuadas de ejemplares adultos de saltahojas en frijol, en diferentes localidades del occidente de Cuba determinó que en el 100 % de los lugares muestreados la especie presente fue E. kraemeri. Refiriéndose a esta especie como la más abundante en América del Sur, Centro América y el Caribe (Martínez et al., 2007). Fluctuación poblacional de E. kraemeri sobre diferentes variedades de frijol. Ica pijao (negra) Velasco largo (roja) Cubacueto 25-9 (roja) P ro m .N in fas/h o ja 2 Vc V2 V4 Cubacueto 25-9 (negra) Delicia 3-64 (roja) Bat 482 (blanca) R1 R2 R4 R5 R6 1,5 1 0,5 100 Precip. (mm.) Temp. media (ºC.) 30 25 80 20 60 15 40 10 20 5 0 T e m p e ra tu ra s(o C ) P re c ip ita c io n e s(m m ) Prom. deAdultos/planta 0 16 14 12 10 8 6 4 2 0 0 8/10. 15/10. 22/10. 29/10. 5/11. 12/11. 19/11. 26/11. 3/12. Mue stre os Figura 2. Fluctuación poblacional de ninfas y adultos de E. kraemeri sobre seis variedades de frijol común. Durante el primer muestreo se pudo apreciar que los adultos invadieron a los 7 días de germinadas las plantas y la primera generación ocurrió a los 8 días posteriores al inicio de la aparición de los adultos. En el segundo muestreo, hubo un aumento progresivo de la población en todas las variedades estudiadas hasta alcanzar el máximo valor, para luego descender en dependencia de las condiciones climáticas, evidenciándose un mayor número sobre la variedad Velasco Largo con un promedio de 13 adultos por planta, mostrando el mayor pico poblacional seguido de CC 25-9 y BAT482. En el tercer muestreo las variedades negras ICA Pijao y CC 25-9 mantuvieron el menor pico poblacional, con 7 y 6 adultos por planta respectivamente. A partir del cuarto muestreo hay un descenso en las poblaciones, donde las variedades Velasco Largo, CC 25-9 y BAT-482, mostraron menor cantidad de adultos por planta, para luego estabilizarse hasta el final de las evaluaciones. Las ninfas mostraron el pico poblacional más alto en la variedad Velasco Largo seguido de BAT-482 con un promedio de 1.7 y 1.6 ninfas por hoja respectivamente, manteniéndose estables a partir del 3er muestreo y hasta el final de las evaluaciones. Según Martínez et al. (2007) el ciclo biológico del insecto transcurre entre los 16 y 19 días, el estado de huevo entre 7 a 10 días, el estado de ninfa se completa entre los 9 y 14 días dependiendo considerablemente de la temperatura. Es importante señalar que la fluctuación poblacional de los cicadelidos, varía con la temperatura y la humedad. Sin embargo la aparición de brotes coincide con épocas de baja precipitaciones (Hernández et al. 2009). Estos resultados concuerdan con Murguido (1995) el cual demuestra que el comportamiento de la dinámica de población de E. kraemeri sobre cada una de las variedades estudiadas fue similar, independientemente del color de la testa de grano y en correspondencia con las variables climáticas. Preferencia varietal de E. kraemeri Nodeinsectospromedio Adultos por planta a 8 7 6 5 4 3 Ninf as por hoja b c c ab c 2 1 0 ICA pijao (negra) Cubacueto 25-9 (negra) Delicia 3Velas co 64 (roja) Largo (roja) Varie dade s Cubacueto 25-9 (roja) Bat-482 (blanca) Medias con letras distintas denotan diferencias significativas según Duncan para p ≤ 0.05 Figura 3. Preferencia varietal de Empoasca kraemeri Ross y Moore. En la figura 3 se muestra la preferencia que tiene este cicadelido por las distintas variedades de frijol. Se observa una mayor incidencia de adultos en la variedad VL con un promedio de 6.7 sin mostrar diferencias significativas con la variedad BAT-482 la cual mostró un promedio de 5.3 adultos por planta. Las variedades de testa negra, CC 25-9 y ICA Pijao mostraron la menor incidencia sin diferencias significativas con un promedio de 3.3 y 3.2 adultos por planta, mostrando diferencias significativas con el resto de las variedades. Cardona y Cortes (1991) citan como variedades susceptibles las de grano con color de la testa roja y como tolerantes al daño por salta hojas los cultivares de grano negro. En resultados concuerdan con Murguido (1995), Ramos (2008) y Kone (2010) quienes demuestra que las variedades que presentaban el color negro muestran mayor tolerancia al ataque el E. kraemeri de forma general, siendo las variedades más preferidas por el saltahojas las de testa blanca y roja. Metabolitos secundarios presentes en las variedades ICA-pijao y BAT-482 de frijol común. Tabla 2. Metabolitos secundarios presentes en tejidos foliares de P. vulgaris. Extractos Metabolitos Secundarios BAT-482 (B) ICA Pijao (N) Alcaloides + + Etéreo Ácidos Grasos + + Coumarinas + + Alcaloides Coumarinas + Saponinas Glicósidos Cardiotónicos + Fenoles y Taninos Etanólico Triterpenos y Esteroides + + Flavonoides Aminoácidos libres + + + Carbohidratos Reductores Quinonas Alcaloides + + + Saponinas Acuoso Fenoles y Taninos + + Flavonoides + + Carbohidratos Reductores + + En la tabla 2 se aprecian los resultados obtenidos en el tamizaje fitoquímico a partir de los tejidos foliares de las variedades en estudio, evidenciándose una variación en función del color de la testa del grano. En ambas variedades existen coincidencias en los metabolitos identificados en el extracto etéreo. En el extracto etanólico ambas variedades poseen triterpenos, esteroides y aminoácidos libres y en el acuoso se evidencia la presencia de alcaloides, taninos, fenoles y carbohidratos reductores. En la variedad ICA Pijao existen saponinas, taninos, fenoles y carbohidratos reductores de baja polaridad que no se encuentran en la variedad BAT-482. Así mismo existen saponinas solamente en la variedad de testa negra. Ramos et al. (2011) en estudios realizados en diferentes variedades, demostraron la existencia de estos metabolitos. Olezek, (1999) y Shahidi (2000) identifican a los taninos, fenoles, alcaloides, saponinas, terpenos y esteroides como repelentes de insectos actuando como antipatógenos o pesticidas naturales. Las saponinas, actúan como antinutrientes o tóxicos por ser muy amargo y poco agradable al paladar (Olezek, 1999 y Calvo, 2006). La diferencia entre las variedades en estudio le pudo conferir a ICA pijao, una mayor resistencia ante la incidencia de la plaga aunque la cantidad de estos compuestos en las plantas, explicaría mejor la tolerancia o susceptibilidad de estas ante la presencia del insecto. Influencia de la fertilización sobre la incidencia de E. kraemeri en dos tipos de suelos. A B *Medias con letras distintas denotan diferencias significativas según Duncan para p ≤ 0.05 Figura 8. Influencia de la fertilización sobre E. kraemeri Ross y Moore. A) Sobre un suelo Ferralítico Rojo Típico sobre la variedad BAT-482. B) Sobre un suelo Pardo Mullido Carbonatado medianamente lavado sobre la variedad BAT-482. En la figura 8 se aprecia la influencia que tiene diferentes variantes de fertilización sobre E. kraemeri en un suelo Ferralítico Rojo Típico y pardos con carbonatos sobre la variedad BAT-482. Los resultados mostraron que existió mayor preferencia de E. kraemeri por la variante Urea con 26,8 y 26,75 respectivamente sin mostrar diferencias significativas con respecto al control que promedió 23 individuos por planta, y si con las parcelas fertilizadas con Rhizobium, Micorrizas y Compost con 13,08; 12,08 y 10,02 como promedio respectivamente, siendo el Compost quien mostró la menor incidencia con diferencias significativas con respecto a las demás. Restrepo (1994) en su teoría de la trofobiosis plantea sobre la necesidad de tratar de forma sintomatológica la incidencia de los insectos plagas, a través de la relaciones entre la nutrición, el estado fenológico de las plantas y el comportamiento de los mismos. Además las plantas que se encuentran equilibradas nutricionalmente, aumentan su resistencia al ataque del insecto. Boica Junior et al. (2001) en estudios realizados sobre la influencia del abonado químico sobre E. kraemeri expusieron que las variedades en que se emplearon abonos químicos tuvieron mayor incidencia de saltahojas. Durante el estudio se pudo apreciar que las variantes donde se aplicó Micorrizas y Compost fueron las que presentaron menor grado de afectación (3), en posición intermedia quedó Rhizobium con 7, y le siguen en orden con grado 9, las variantes testigo y Urea. Grado de afectación por la incidencia de E. kraemeri en variedades de frijol común. Tabla 3. Grado de afectación por E. kraemeri sobre algunos componentes del rendimiento en variedades de frijol. Variedades G.A P. v/p *M.R P. g/p *M.R ICA pijao (Negra) 3 9.32 238.18 a 44.45 253.00 a Cuba Cueto 25-9 (Negra) 5 6.92 194.80 a 27.6 199.10 ab Delicia 3-64 (Roja) 7 6.87 187.40 a 25.9 199.20 ab Cuba Cueto 25-9 (Roja) 7 6.35 186.80 ab 22.6 181.50 bc Velazco Largo (Roja) 9 3.47 80.80 cd 7.37 52.20 d BAT-482 (Blanca) 9 2.62 40.80 d 5.72 34.50 d *Medias de Rango según Kruskal-Wallis. Letras desiguales en las columnas denotan diferencias significativas según la Prueba Múltiple de Rangos para p ≤ 0.05. Leyenda: G.A: Grado de afectación, P. v/p: Promedio de vainas por planta, P. g/p: Promedio de granos por planta, *M.R: Medias de Rango. En la tabla 3 se observa que a medida que aumentó el grado de afectación, aumentaron las afectaciones por E. kraemeri sobre los componentes estudiados. Se destacan, ICA Pijao con grado 3 de afectación y CC 25-9 con grado 5, entre las variedades tolerantes, seguido de Delicia 3-64 y CC 25-9 con un grado de 7. Teniendo en cuenta la cantidad de vainas por planta, las tres variedades negras antes mencionadas no presentaron diferencias significativas entre sí, y tampoco con las de granos de testa roja, Delicia 3-64 y CC 25-9. En este aspecto se destacó la variedad ICA Pijao con un promedio de 9.32 vainas por planta, lo mismo sucedió en cuanto a la cantidad granos por planta con 44.45; con diferencias significativas en este último parámetro con respecto a las variedades de testa roja (CC 25-9 y Velasco Largo) y BAT-482 de testa blanca. Las variedades de testa roja no difirieron en cuanto al promedio de granos por vainas, excepto de Velasco Largo que junto a BAT-482, fueron las que mayor menor rendimiento obtuvieron, sin mostrar diferencias significativas. Murguido (1995), Ramos (2008) y Kone (2010) demostraron que las variedades de grano rojo, presentaron una disminución de granos por vainas; sin embargo, se observó un mayor número de vainas por plantas en las variedades de grano negro, en comparación con las rojas y blancas. Conclusiones 1. Se determinó Empoasca kraemeri Ross y Moore como especie presente en frijol en Villa Clara. 2. Los adultos de E. kraemeri a invadieron los campos de frijol cuando las plantas tenían entre 4 y 8 días de germinadas y las ninfas aparecieron 8 días después. Su población se mantuvo fluctuante en las fases vegetativas del cultivo. 3. Las variedades con el grano de color negro mostraron tolerancia a esta plaga y fueron más susceptibles Velasco largo y BAT-482. 4. Solamente en la variedad ICA-Pijao hubo presencia de saponinas, fenoles y taninos, no las hubo en la BAT-482. 5. En los dos tipos de suelo estudiados las parcelas fertilizadas con Micorrizas, Rhizobium y Compost registraron menor incidencia de E. kraemeri, en comparación con la Urea donde se registraron los niveles poblacionales más altos. 6. ICA-Pijao tuvo un grado de afectación de 3 y un promedio de 9.32 vainas por planta, mientras que Velazco largo y BAT-482 tuvieron un promedio de 3.47 y 2.62 vainas por planta respectivamente con un grado de afectación de 9. Referencias Bibliográficas Calvo, M. (2006). Bioquímica de los alimentos. Universidad de Zaragoza. España. En sitio web:htp:milksci.unizar.es/bioquimica/temas/toxico/ Caldwell, J. F. y Martorrell, L. F. (1950). Review of the Achenorhyncous (Homoptera) of Puerto Rico. Part 1. Cicadellidae. J. Agr. Univ of Puerto Rico. (34): 1– 32. Cardona, C y Cortes, Ma L. (1991). Evaluación económica de la tolerancia de variedades de frijol al lorito verde Empoasca kraemeri Ross y Moore (Homoptera: cicadellidade). Rev. Colombiana de Entomología. 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