Download KIT PARA EL DESARROLLO DE GENOTECAS

CONSEJO SUPERIOR DE INVESTIGACIONES CIENTÍFICAS (CSIC)
Kit para el desarrollo de genotecas lentivirales de expresión de anti small RNAs
El CSIC ha patentado un kit para el desarrollo de genotecas de expresión de anti small RNAs, basado en la
generación de RNAs esponjas, contra la población completa de small RNAs presentes en una célula, sin
necesidad de sintetizar individualmente cada uno de ellos. La expresión de la genoteca permite la realización de
escrutinios genéticos funcionales masivos para la determinación de los small RNAs críticos en un proceso
biológico o patología y con ello la identificación de los genes implicados en los mismos.
Se buscan socios industriales para la licencia de la patente
Resumen de la tecnología
En los últimos años, los miRNAs han sido objeto de numerosos estudios que
muestran su estrecha relación con diferentes procesos biológicos. La tecnología
utilizada para los estudios está basada en la pérdida de expresión de los miRNAs
principalmente mediante el uso de inhibidores sintéticos y de shRNAs.
El desarrollo actual de genotecas contra miRNAs que hacen uso de inhibidores
sintéticos o de shRNA presentan inconvenientes como 1) el alto coste del
desarrollo de la misma, 2) sólo comprenden los miRNAs ya identificados como
tales, obligando a continuas actualizaciones que, incluso nunca pueden garantizar
que las nuevas genotecas contengan todos los miRNAs de interés para un estudio
en concreto, 3) no comprenden inhibidores de otros posibles small RNAs con
capacidad reguladora similar a los miRNAs y no caracterizados todavía.
Como alternativa, se diseñaron las denominadas esponjas de small RNAs, RNAs
con secuencias dianas capaces de inhibir la expresión de cualquier small RNA. Sin
embargo, en la actualidad no existen genotecas de esponjas principalmente
porque su generación exigiría la construcción individualizada de cada uno de los
clones e incluiría sólo aquellos correspondientes a miRNAs caracterizados.
Con la finalidad de superar estos inconvenientes, se ha desarrollado un novedoso
procedimiento que, mediante la generación de RNAs esponjas, permite la
obtención de anti-small RNAs contra la población de small RNAs presentes en las
células o tejidos de partida. El método se basa en las características funcionales
tanto de la enzima circ-ligasa como de enzimas DNA polimerasa desplazantes de
cadenas.
Principales aplicaciones y ventajas
•
Las genotecas generadas comprenden anti-small RNAs contra cualquier small
RNA presente en la célula, Además los anti-small RNAs no se sintetizan y
clonan individualmente, sino como población completa.
•
La utilización de vectores lentivirales garantiza una alta eficiencia de
transfección en las distintas líneas celulares. El uso de vectores lentivirales
permite adicionalmente llevar a cabo experimentos de larga duración sin las
restricciones que presentan los inhibidores sintéticos.
•
Las genotecas generadas son accesibles a cualquier laboratorio de Biología
Molecular al no requerir infraestructura sofisticada y por su bajo coste
económico.
•
El procedimiento permite obtener genotecas con más de 800.000 clones
independientes.
El uso de las genotecas de expresión
anti small RNAs desarrolladas supone
un avance significativo para la
identificación de genes involucrados en
procesos celulares y patologías.
Estado de la patente
Solicitud de patente española con
posibilidad de extensión
internacional
Para más información
Dr. José Ramón Domínguez Solís,
Vicepresidencia Adjunta de
Transferencia de Conocimiento
Consejo Superior de
Investigaciones Científicas (CSIC)
Tel.: + 34 – 95 423 23 49
E-mail: jrdominguez@orgc.csic.es