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Impacto del estudio molecular de los genes PROC, PROS1 y SERPINC1 en pacientes con trombosis venosa A. Cristina Oliveira, P. Martinho, T. Fidalgo, C. Silva Pinto, E. Gonçalves, D. Marques, T. Sevivas, R. Salvado y M. L. Ribeiro Serviço de Hematologia Clínica, Centro Hospitalar e Universitário de Coimbra (CHUC) EPE – PORTUGAL www.hematologia-chuc.org; hematologia@chuc.min-saude.pt INTRODUCCIÓN MATERIAL Y POBLACIÓN ESTUDIADA La trombosis venosa es una enfermedad multigénica y multifactorial siendo las deficiencias de proteína C (DPC), S (DPS) y antitrombina (DAT), importantes factores de riesgo. La prevalencia de estos déficits es baja (3-5% - DPC, 1,5% DPS y 1-3% - DAT), siendo probablemente subdiagnosticados. Las pruebas funcionales disponibles son poco sensibles a déficits ligeros o a ciertas mutaciones asociadas a niveles plasmáticos normales. El estudio molecular de los genes PROC, PROS1 y SERPINC1 aumenta la capacidad diagnóstica de estas deficiencias, permite una correlación genotipo/fenotipo y la identificación de portadores en riesgo. Fueron estudiados 172 individuos (128 mujeres): 67,4% con historia personal de trombosis: • TEP (8,1%) • TV (33,7%) • TA(7%) • y complicaciones obstétricas (18,6%) 32,6% tenían una historia familiar de trombosis. Estudios funcionales: PSL, PCact y ATact - niveles comparados con valores de referencia ajustados a la edad, confirmados en 2 muestras diferentes. Estudios moleculares: ASPCR, secuenciación directa Sanger y MLPA. OBJETIVOS Estudiar los genes PROC, PROS1 y SERPINC1 en individuos con: i. déficits o niveles plasmáticos en el límite inferior de la normalidad de PC y/o PS y/o AT ii. niveles plasmáticos normales, con historia de trombosis venosa significativa. RESULTADOS 1. ESTUDIOS FUNCIONALES – Déficits de PC, PS e AT Normales AO DPC/DPS DAT 34 7 20% • n=172 n 18 1 0,6% FENÓTIPO p.Arg199* Severo 17 p.Ser501Pro (PS Herleen) Ligero 5 p.Val191Cysfs*6, p. Ala307Cysfs*22, p.R451* Severo 4 p.Cys639Phe Severo 2 p.Pro76Leu + p.Ala307Cysfs*22 Htz compuesta Severo PROS1 6 65 DPC 59 38,3% 34,3% 2. ESTUDIOS MOLECULARES PROS1 + PROC TIPO DE MUTACIÓN 1 PROC n = 65 172 Individuos MUTACIÓN PROC 4% DPS • GENÓTIPO vs FENÓTIPO PROS1 n = 95 SERPINC1 [PROS1 p.N166H ;p.A307Cfs*22] + PROC -13A>G (La Jolla IV) Htz compuesta/doble Sen mutación n = 70 Con mutación n = 102 n = 19 Promotor (8) Missence (67) 26 mutaciones diferentes: Nonsence (19) PROC (n=12) Small delection (4) Small duplication (7) SERPINC1 PROS1 (n=11) 1 p.YTyr95Serfs*18 1 Severo 1 p.Ser114Asn Severo 4 p.Val30Glu, p.Glu227Lys e p. Ala296Pro Normal mutación no descrita SERPINC1 (n=5) DISCUSSION El estudio del gen PROC, PROS1 y SERPINC1 ha permitido identificar mutaciones en casi todos DPC en los DPS y DAT el éxito es menor, sobre todo en los déficits ligeros. El estudio de varios genes mediante secuenciación masiva (NGS) incluirá otros genes candidatos y aumentará la capacidad de diagnóstico de estos déficits. Se detectaron mutaciones en los pacientes con niveles plasmáticos normales - fallo en la detección de cambios cualitativos por los ensayos funcionales disponibles. La prueba molecular debe ser considerada para: 1. identificar pacientes con antecedentes personales/familiares significativos de trombosis, con niveles "normales/borderline“ de estas proteínas. 2. La integración de los datos clínicos juega un papel crucial en la correlación genotipo/fenotipo para evaluar la necesidad de profilaxis primaria o secundaria y medidas profilácticas en situación de riesgo. LVIII SEHH XXXII SETH REFERENCIAS: Familial thrombotic risk based on the genetic background of Protein C Deficiency in a Portuguese Study. Eur J Haematol. 2015 Oct;95(4):294-307. Prevalence of hereditary antithrombin mutations is higher than estimated in patients with thrombotic events. Blood Coagul Fibrinolysis. 2013 Jun;24(4):444-8. Puzzling questions on antithrombin: Diagnostic limitations and real incidence in venous and arterial thrombosis. Thromb Res. 2015 Jun;135(6):1047-8. 414--P SETH - TROMBOSIS Ana Cristina Oliveira Silva DOI: 10.3252/pso.es.58SEHH.2016 Colaboración limitada a la impresión, gestión y acceso on-line de los posters, sin derivarse responsabilidad alguna sobre los contenidos u opiniones vertidas en ellos por sus autores
