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AVANCES EN LA CARACTERIZACIÓN DE MICROORGANISMOS SOLUBILIZADORES DE FOSFATOS(1) Elsa L. Ulla(2); Eduardo E. Ulla(3); Héctor H. Sánchez(3) 1) Trabajo financiado por CIUNT: A 329. 2) Facultad de Agronomía y Zootecnia – UNT, elsaulla@hotmail.com. 3) Facultad de Ciencias Agrarias – UNCa. RESUMEN Los microorganismos solubilizadores de fosfatos desempeñan un importante papel en el suplemento de fósforo para las plantas. La solubilización del fósforo inorgánico por microorganismos del suelo ha sido estudiada por numerosos investigadores quienes postularon diversos mecanismos para explicar este fenómeno. El objetivo del presente trabajo es caracterizar morfológicamente los microorganismos solubilizadores de fosfatos aislados de la rizósfera de orégano (Origanum sp) cultivado en la provincia de Catamarca. Para el aislamiento de los microorganismos solubilizadores de fosfatos se tomaron muestras compuestas de suelo rizosférico de orégano (Origanum sp), se prepararon diluciones decimales y se sembraron por triplicado en medios de cultivo sólidos. Se incubó a 28°C durante 5 días. La individualización se realizó, en una primera etapa, por las características de las colonias en el medio de cultivo, observación microscópica y coloración de Gram Nicolle. Palabras clave: microorganismos, fosfatos, solubilización, suelo. SUMMARY Phosphate solubilizing microorganisms play a central role in the supplement of phosphorus for the plants. The solubilization of the inorganic phosphorous by microorganisms has been studies by many researchers who postulated diverse mechanisms to explain this phenomenon. The aim of the present work is to characterize morphologically the phosphate solubilizing microorganisms isolated of the rhizosfpheric soil of Origanum sp cultivated in Catamarca. For the isolation of the this microorganisms, serial dilution of rizospheric soil was plated by triplicate on solid culture media. They were incubated at 28°C for 5 days. Phosphate solubilizing bacteria were characterized according to colonies characteristic in culture media, microscopic observation and Gram Nicolle coloration. Key words: microorganisms, phasphate, solubilization, soil. INTRODUCCIÓN Los compuestos inorgánicos insolubles de fósforo no están disponibles totalmente para los vegetales, aunque muchos microorganismos pueden solubilizar fosfatos. Esta propiedad no es rara ya que los conteos de las bacterias que solubilizan este elemento pueden variar de 105 a 107 por gramo de suelo (Barroti y Nahas, 2000). Los microorganismos no solo asimilan el elemento sino que también hacen soluble a una gran porción, liberándolo en cantidades superiores a sus propias demandas nutricionales. La solubilización del fósforo inorgánico por microorganismos del suelo ha sido estudiada por numerosos investigadores quienes postularon diversos mecanismos para explicar este fenómeno. En general se concede gran importancia a la acción solubilizante de los ácidos orgánicos que por una parte son exudados por las raíces y por otra son formados por los microorganismos heterótrofos del suelo como productos terminales e intermediarios de la degradación de la materia orgánica. Además, estos microorganismos producen estimulación del crecimiento vegetal por la presencia de citoquininas, giberelinas y ácido indol acético y protección fitosanitaria debido a la producción de antibióticos y presencia de sideróforos en la cepa (Rodríguez y Fraga, 1999). Los microorganismos solubilizadores de fosfatos desempeñan un importante papel en el suplemento de fósforo para las plantas. Este factor viene despertando la atención para la utilización AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA. 2005 - 2007 | 130 de esos microorganismos como inoculante comercial o el manejo de sus poblaciones como forma de promover una mejor utilización del fósforo existente en el suelo o el adicionado como fertilizante (Nunes Silva Filho, 1998). Estos microorganismos han sido estudiados en muchos países; en cultivos tanto de gramíneas como de leguminosas y se han mostrado resultados favorables en relación a la producción. En investigaciones realizadas en el NOA, en la FAZ-UNT, en ambiente de rizósfera de tabaco, se han aislado algunos hongos con capacidad solubilizadora de fosfatos. El objetivo del presente trabajo es caracterizar morfológicamente los microorganismos solubilizadores de fosfatos aislados de la rizósfera de orégano (Origanum sp) cultivado en la provincia de Catamarca. MATERIALES Y MÉTODOS La experiencia se llevó a cabo en el laboratorio de Microbiología Agrícola de la FAZ – UNT. Para el aislamiento de los microorganismos solubilizadores de fosfatos se tomaron muestras compuestas de suelo rizosférico de orégano (Origanum sp), se homogeneizaron y tamizaron por malla de 2 mm. Se prepararon diluciones decimales y se sembraron por triplicado en los siguientes medios de cultivo sólidos: Pikovskaya (Nautiyal, 1999), Katnelson (Monzón de Asconegui et al), Valarini ( Shiraishi Frighetto y Valarini, 2000), y GEL modificado (Nunes Silva Filho, 1998). Se incubó a 28°C durante 5 días. La purificación de los aislados se realizó en placas con medio GEL, incubando cada repique, 24 h a 28°C. La individualización se realizó, en una primera etapa, por las características de las colonias en el medio de cultivo, observación microscópica y coloración de Gram. RESULTADOS Los microorganismos solubilizadores de fosfatos, se identificaron por la formación de un halo alrededor de las colonias (fig.1). Los medios de cultivo de Katnelson y Valarini fueron los que permitieron una mejor visualización de las mismas. Con respecto a la caracterización, se observaron colonias de tonalidad cremosa brillante, de forma irregular y bordes lisos (fig. 2). El examen microscópico permitió observar bacterias móviles, de forma bacilar. Con respecto a la reacción de Gram, se distinguieron individuos Gram positivos y Gram negativos con una mayor proporción de estos últimos (figs. 3 y 4). Fig. 1: Microorganismos solubilizadores de fosfatos en medio de cultivo. 2007. AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA. 2005 - 2007 | 131 Fig. 2: Caracterización de colonias de las bacterias aisladas. 2007. Figs. 3 y 4: Coloración de Gram Nicolle de las bacterias aisladas. 2007 BIBLIOGRAFÍA Barrotti, G. e E. Nahas. 2000 Populacao microbiana total e solubilizadora de fosfato em solo submetido a diferentes sistemas de cultivo. Pesq. Agropec. Bras. V 35, n 10: 2043-2050. Monzón de Asconegui, M. A.; A. H. Merzari y D. H. Tomasini. Estudio cuantitativo de bacterias solubilizadoras de fósforo en rizósfera de maíz. IDIA – Suplemento/7a Reunión de Suelos. Nunes Silva Filho, G. 1998. Solubilizacao de fosfatos pela microbiota do solo. Tese doutorado, Universidade Federal do Rio Grande do sul: 140 p. Rodríguez, H; R. Fraga. 1999. Phosphate solubilizing bacteria and their role in plant growth promotion. Biotechnology Advances 17: 319-339. Shiraishi Friguetto, R. T.; P. J. Valarini. 2000. Indicadores Biológicos e Bioquímicos da Qualidade do Solo, Manual Técnico. EMBRAPA, Jaguariúna, SP. AVANCES EN LA PRODUCCIÓN VEGETAL Y ANIMAL DEL NOA. 2005 - 2007 | 132