Download Evaluación del efecto antibacteriano de hidrolizados totales y

Evaluación del efecto antibacteriano de hidrolizados totales y fracciones
peptídicas <1 KDa de semillas de Mucuna pruriens
Centeno Flores Valeria1, 2, Ángeles Chimal José Santos.*1, Acevedo Fernández Juan
José.1, Betancur Ancona David Abram3, Chel Guerrero Luis Antonio3 y Arias Castro
Esmeralda4. 1Facultad de Medicina/UAEM. Calle Iztaccíhuatl, esq. Leñeros S/N, Col.
Volcanes, Cp. 62360 Cuernavaca, Morelos. 2Facultad de Ciencias Biológicas/UAEM Av.
Universidad 1001 Col. Chamilpa Cuernavaca, Morelos. 3Facultad de Ciencias
Químicas/UADY Mérida Yucatán, Periférico Nte. Km 33.5, Cp. 97360, Mérida Yucatán.
4
Glaxo Smith Kline México, S.A. de C.V. Calle 21 Este 104, Jiutepec, Cp. 62578
Jiutepec, Morelos.
vale.cenflo@gmail.com
Introducción: El fenómeno de resistencia a los antibióticos expresado en bacterias,
sobre todo en las patógenas para el ser humano, crea nuevas expectativas de alerta
epidemiológica para los sistemas de salud gubernamentales. Diversas líneas de
investigación se integran a la búsqueda de nuevas sustancias que coadyuven en la
solución de este problema, particularmente enfocada en la evaluación de la propiedad
antibacteriana de extractos vegetales. Por ejemplo, algunos péptidos con actividad
biológica obtenidos mediante procesos de hidrólisis. En este reporte, se notifican los
resultados de la sensibilidad de algunas cepas de bacterias contra Biopéptidos (BP)
extraídos de la semilla de Mucuna pruriens, una fabácea introducida a México que
actualmente es fuente importante de compuestos aplicables en el área biomédica.
Material y métodos: Las cepas usadas fueron Staphylococcus aureus ATCC 6538,
Escherichia coli ATCC 8739 y Salmonella enterica Serovar Typhimurium ATCC 14028.
Primero se obtuvo el perfil de sensibilidad/resistencia para cada cepa con multidiscos
combinados de amikacina, ampicilina, cefalotina, ceftriaxona, cloranfenicol,
dicloxacilina, enoxacina, eritromicina, gentamicina, netilmicina, penicilina y trimetropimsulfametoxazol. Posteriormente se obtuvo su perfil de sensibilidad/resistencia contra las
fracciones totales y peptídicas <1KDa de BP, obtenidas por hidrólisis de la harina de
semilla de M. pruriens, usando los sistemas enzimáticos Pepsina-Pancreatina y
Alcalasa-Flavourzima. Se empleó el método de difusión en disco Kyrbi-Bauer con
placas de agar Mueller-Hinton, colocándole a cada placa un control positivo (disco con
Cloranfenicol 30 µg/mL); un control negativo (discos de papel filtro impregnados con 7
µL de agua inyectable) y 3 discos impregnados cada uno con 7µL de BP (250 mg/mL,
125 mg/mL y 62.5 mg/mL, respectivamente). La prueba se hizo por triplicado.
Resultados: Se observó que S. aureus y S. enterica resultaron sensibles para todos los
antibióticos utilizados, mientras que E. coli mostró una sensibilidad intermedia a
ampicilina (halo de 16mm) y una resistencia para dicloxacilina y eritromicina. En la
evaluación de los hidrolizados se observaron halos de inhibición por parte del control
positivo de 32mm, 34mm y 34mm para E. coli, S. enterica y S. aureus respectivamente.
No se observó actividad por parte de los hidrolizados totales ni por las fracciones
peptídicas. Sin embargo se logró visualizar crecimiento bacteriano bajo los discos.
Conclusiones: Los hidrolizados evaluados no tienen actividad antibacterial, sin
embargo, la presencia de crecimiento bajo los discos con BP sugiere que más que
inhibir el crecimiento, pudiesen relacionarse con la estimulación de la proliferación
celular. Se sugiere corroborarlo con pruebas de cinética de crecimiento.