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 RESULTADOS CUANTIFICACIÓN DE FENOLES TOTALES Y ANTIOXIDANTES MEDIANTE METODOLOGIA ORAC ATENCIÓN: Susana Arrendondo S. sarredondo@ceap.cl Laboratorio de Fisiología Frutal ‐ Centro de Pomáceas ‐ Universidad de Talca Av. Lircay s/n. Fono: 071 / 2 200366. pomaceas@utalca.cl http://pomaceas.utalca.cl I.
Metodología El Laboratorio de Fisiología Frutal, del Centro de Pomáceas de la Universidad de Talca, determinó el contenido de Fenoles Totales y Actividad y Capacidad Antioxidante a muestras de Espárragos Verdes y Blancos. La extracción y determinación de fenoles totales se realizó por método de Folin‐Ciocalteu, según Cosetang & Lee (1987)1, con algunas modificaciones. Los resultados se expresan en mg EAC2/100 g de material fresco. La determinación de actividad antioxidante se realizó según los descrito por Von Gadow et al., (1997) 3con algunas modificaciones. Los resultados se expresan en mg EAC4/100 g de material fresco. La capacidad antioxidante se determinó por metodología ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity). El procedimiento corresponde a lo descrito por Huang et al., (2002)5 y Prior et al., (2003)6, con modificaciones. Los resultados se expresan en µmoles ET7/100 g de material fresco. Para ello se empleó un Lector de microplacas para absorbancia, fluorescencia y luminiscencia, BIOTEK SYNERGY HT (Figura 1). Figura 1. Lector de fluorescencia para microplacas. 1
Coseteng, M. & Lee, C.Y. (1987). Changes in apple polyphenol oxidase and polyphenol concentrations in relations to degree of browning. Journal of Food Science, 52: 985–
989. 2
EAC: Equivalente de Acido Clorogénico. 3
Von Gadow, A., Joubert, E. and Hansmann, C. 1997. Comparison of the antioxidant activity of Aspalathin with that of other plant phenols of rooibos tea (Aspalathus linearis) alfa‐tocopherol, BHT, and BHA. J.Agric.Food Chem. 45:632‐638.
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EAC: Equivalente de Acido Clorogénico. 5 Huang D, Ou B, Hampsch‐Woodill M, Flanagan JA, Deemer EK. 2002. Development and validation of oxygen radical absorbance capacity assay for lipophilic antioxidants using randomly methylated beta‐cyclodextrin as the solubility enhancer. 6
Prior RL, Hoang H, Gu L, Wu X, Bacchiocca M, Howard L, Hampsch‐Woodill M, Huang D, Ou B, Jacob R. 2003. Assays for hydrophilic and lipophilic antioxidant capacity (oxygen radical absorbance capacity (ORAC(FL))) of plasma and other biological and food samples.
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ET: Equivalente Trolox. Laboratorio de Fisiología Frutal ‐ Centro de Pomáceas ‐ Universidad de Talca Av. Lircay s/n. Fono: 071 / 2 200366. pomaceas@utalca.cl http://pomaceas.utalca.cl El material a utilizar para la cuantificación de Fenoles totales y antioxidantes por metodología DPPH y ORAC corresponde a muestras de espárragos verdes y blancos, separados en su parte superior ( arriba) media e inferior (abajo). Para cada muestra se hicieron 3 repeticiones de una mezcla de 4 espárragos cada una. II. Resultados Cuadro 1. Cuantificación de Fenoles Totales y de Antioxidantes por metodología DPPH y ORAC. Muestras de Espárragos Verdes y Blancos separados en 3 porciones. Código Fenoles Totales Antioxidantes (ORAC) Antioxidantes (DPPH) Muestra mg EAC/100 g Fresco µmoles ET/100 g Fresco mg EAC/100 g Fresco ESVAR1 166 110
4450
ESVAR2 164
90
4054
ESVAR3 183
103
4164
ESVMER1 126
92
3421
ESVMER2 122
68
3569
ESVMER3 103
54
3088
ESVAB1 92
50
2373
ESVAB2 83
27
3077
ESVAB3 78
31
2186
ESBAR1 130
100
2811
ESBAR2 96
64
3300
ESBAR3 112
62
3497
ESBMER1 60
42
1826
ESBMER2 58
14
1667
ESBMER3 60
24
1779
ESBAB1 42
18
1626
ESBAB2 52
15
1652
ESBAB3 52
11
1619
Laboratorio de Fisiología Frutal ‐ Centro de Pomáceas ‐ Universidad de Talca Av. Lircay s/n. Fono: 071 / 2 200366. pomaceas@utalca.cl http://pomaceas.utalca.cl Cuadro 2. Cuantificación de Fenoles Totales y de Antioxidantes por metodología DPPH y ORAC. Muestras de Espárragos Verdes y Blancos separados en 3 porciones. RESUMEN. Fenoles Totales Antioxidantes (ORAC) Antioxidantes (DPPH) Muestra mg EAC/100 g Fresco µmoles ET/100 g Fresco mg EAC/100 g Fresco Espárrago Verde 171 ± 10
101 ± 10
4223 ± 204
porción superior Espárrago Verde 117 ± 12
71 ± 19
3359 ± 246
porción media Espárrago Verde 84 ± 7
36 ± 12
2545 ± 470
porción inferior Espárrago Blanco 113 ± 17
75 ± 21
3203 ± 353
porción superior Espárrago Blanco 59 ± 1
27 ± 14
1757 ± 82
porción media Espárrago Blanco 49 ± 6
15 ± 4
1632 ± 17
porción inferior Amalia Neira Etcheverry Bioquímico Fisiología Frutal Centro de Pomáceas Facultad de Ciencias Agrarias ‐ Universidad de Talca aneira@utalca.cl Laboratorio de Fisiología Frutal ‐ Centro de Pomáceas ‐ Universidad de Talca Av. Lircay s/n. Fono: 071 / 2 200366. pomaceas@utalca.cl http://pomaceas.utalca.cl