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Efecto de los ácidos grasos en la expresión de genes de virulencia de Staphylococcus aureus y su relación con la internalización en células epiteliales mamarias bovinas Frutis Murillo Minerva, Sandoval Carrillo Marcelo Alejandro, Alva Murillo Nayeli, Ochoa Zarzosa Alejandra, López Meza Joel Edmundo *. Centro Multidisciplinario de Estudios en Biotecnología-FMVZ, Universidad Michoacana de San Nicolás de Hidalgo. Km 9.5 Carretera Morelia Zinapecuaro. Posta Veterinaria C.P. 58893 Morelia, Michoacán Correo: miine_frutiis_m@hotmail.com La mastitis bovina es la principal enfermedad que afecta al ganado lechero a nivel mundial que se caracteriza por una respuesta inflamatoria de la glándula mamaria ante un trauma o infección. Staphylococcus aureus es el principal patógeno relacionado con esta patología y es el responsable de las infecciones crónicas, las cuales se han asociado con su capacidad de internalizarse en las células del epitelio mamario bovino (CEMB). S. aureus expresa un amplio arsenal de factores de virulencia (ej. agrA, sdrC, sarA ,clfB, spA, fnbA y fnbB) que le permiten ser un patógeno exitoso, y algunos de ellos se requieren para su internalización en la célula hospedera. Estudios previos de nuestro grupo de trabajo han demostrado que moléculas inmunoreguladoras, como los ácidos grasos, reducen la internalización de S. aureus en las CEMB al favorecer la respuesta inmune innata. Sin embargo, no se ha evaluado el efecto de estos compuestos sobre la expresión de genes de virulencia de S. aureus y su relación con la internalización, el cual fue el objetivo de este trabajo. Se utilizó una cepa certificada de S. aureus (ATCC 27543) con capacidad de internalizarse en las CEMB. Para evaluar el efecto de los ácidos grasos en la expresión de genes de virulencia de S. aureus, se creció a la bacteria en medio LB con butirato de sodio (BNa, 0.5 mM y 2 mM) y octanoato de sodio (ONa, 0.25 mM y 1 mM), durante 2 y 24 h, luego se extrajo el ARN total y se sintetizó el ADNc. Se evaluó la expresión de los genes agrA y, clfB mediante qPCR, usando como control endógeno el gen 16S. Se observó que el BNa a las 2 h de incubación disminuyó la expresión de clfB (~0.5 veces) en ambas concentraciones; además, la expresión de agrA disminuyó a 2 mM (~0.5 veces). El tratamiento de las bacterias con BNa durante 24 h indujo la expresión de clfB (~2.8 veces), lo cual se relacionó con una disminución en la internalización (40%) en las CEMB. Las bacterias crecidas con ONa 0.25 mM (2 h) incrementaron ligeramente la expresión de clfB (~0.2 veces), lo cual se relacionó con una disminución de 30% en la internalización de la bacteria. Asimismo, a las 24 h de incubación con 0.25 mM se observó un incremento en la expresión de clfB (~2.5 veces) y agrA (~0.5 veces); sin embargo, estos datos no se relacionaron con la internalizacion bacteriana. En conclusión los acidos grasos de cadena corta modulan diferencialmente la expresión de los genes agrA y clfB de S. aureus, y solo la expresión de clfB se relacionó con la internalización de la bacteria en las CEMB.
