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TRASPLANTE DE STEM CELLS
HEMATOPOYÉTICOS
Dr. Jorge Alfaro Lucero
Laboratorio de Terapia Celular
Banco de Sangre
Hospital Clínico Universidad de Chile
Agosto 2006
POTENCIALES DONANTES PH
Tipo dador
Definición
mHAgs
HLA
Autogénico Paciente es su propio dador
-
-
Singénico
Gemelos univitelinos idénticos
-
-
Alogénico
HLA genotipo idéntico
+
-
+
+++
-/+
-/+
+
+++
++
+++
HLA fenotipo idéntico
Relacionado
No relacionado
HLA no idéntico
Relacionado
No relacionado
1
OBTENCIÓN DE PH
FUENTE DE PH
Médula ósea
Sangre periférica
Cordón umbilical
Otros
Protocolos de movilización
ESHAP
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12 13 14 15 16 17
5
6
7
8
9
10 11 12 13 14
CFM 3gr/m2
1
2
3
4
Etopósido + AraC
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
2
Extracción Teórica CD 34
100
80
60
40
20
0
0
1
2
3
VOLEMIA
f = 50%
f = 80%
Reclutamiento de CD34
500
Cantidad CD34 (N° cel x10^6)
Porcentaje residual CD 34
120
450
400
350
300
250
200
150
100
50
0
Pre-aféresis
Recolectado
Post-aferesis
3
Reclutamiento CD34, leucocitos y
plaquetas
4
3.5
3
2.5
2
1.5
1
0.5
CD34
Leucocitos
Plaquetas
0
4
CRIOPRESERVACIÓN PH
CRIOPRESERVACIÓN
Nitrógeno líquido
fase de vapor - 130 ºC
INDICACIONES
ALOGÉNICO
AUTOGÉNICO
Enfermedades congénitas
Inmunodeficiencia Congénita
combinada
Ninguna
Aplasia medular de Fanconi
Drepanocitosis
Eritroblastopenia de Blacfan-Diamond
Sindrome de Wiskitt-Aldrich
Osteopetrosis juvenil
Tesaurismosis
Enf, granulomatosa crónica
5
INDICACIONES
ALOGÉNICO
AUTOGÉNICO
Enfermedades Adquiridas
Neoplásicas
Leucemias agudas
Leucemias agudas
Leucemia mieloide crónica
Leucemia mieloide crónica
Leucemia linfática crónica
Leucemia linfática crónica
Linfomas no Hodgkin
Linfomas no Hodgkin
Enfermedad de Hodgkin
Enfermedad de Hodgkin
Mieloma múltiple
Mieloma múltiple
Histiocitosis
Histiocitosis
Amiloidosis
Amiloidosis
Sindrome mielodisplásicos
Sindrome mielodisplásicos
Bone Marrow Transplant 21:1-7, 1998
TRASPLANTE DE PROGENITORES EBMT
1990 / 2001
6
Leucemia Mieloide Aguda
Tabla 12.3. Clasificación pronóstica de LMA según análisis citogenético
Riesgo
Número
Recaída
Sobrevida
(5 años)
Alteración
molecular
Favorable
86
28 %
74 %
t(8:21) o AML1/ETO
t/inv/del (16)(p13;q2)
MYH11/CBFβ
Intermedio
Desfavorable
A
B
RC tardía
Citogenética
desfavorable
17
457
207
70
49 %
50 %
70 %
80 %
18 %
10 %
12 %
9%
citogenética/
o
•
>
3
anormalidades
clonales diferentes.
• -7, -5
• del 5q, del 7q
• Abn 3q
• T(6;9)(q23;q34)
o
DEK/CAN
• Abn 11q23
• T(9;22) o BCR/ABL
A: Riesgo citogenético favorable, pero con leucocitos > 20.000/uL, o alteraciones citogenéticas adicionales.
B: Sin citogenético favorable o desfavorable, pero con RC post inducción.
Dutch-Belgian Hemato-Oncology Cooperative Group HOVON and Swiss Leukemia Group SAKK.
LMA: EORTC Y GIMEMA
Cassileth.
NEJM 332;217-223.
339;1649-56.19981995
Zittoun,
NEJM
7
LMA:Sobrevida según fase de enfermedad
GITMO
Gruppo Italiano per
il trapianto di midollo
osseo
OS
Riesgo
Leucemia Linfoblástica
Aguda
Hunault M.
Blood 2004;104:3028-3027
Alo
Auto
Recaída
Remisión > 4 semanas
30.000 leucocitos
> 35 años
Citogenético t(9;22)
t(1;19)
t(4;11)
Cassileth. NEJM 339;1649-56.1998
8
TRASPLANTE ANEMIA APLASTICA
Deeg H, Amylon et al.
Sobrevida de AA con
TPH no relacionado
según duración enf.
Biol Blood Marrow
Transplant 7: 208-215,
2001.
TRASPLANTE: Mielodisplasia
Internat Progn Score Syst
% blastos: < 5
5 - 10
11 - 20
> 20
0
0.5
1.5
2.0
Citopenias 0 - 1 0
>1
0.5
Citogenet complejo
1
Deeg H et al. Blood 100:1201-1207, 2002
9
TRASPLANTE MIELODISPLASIA
HLA Id
GITMO 1991 -2001
Mortalidad relacionada a trasplante y edad
Alo trasplante
CFM 120 mg /kg +
TBI 10 Gy
Condicionamiento con
Intensidad reducida
Flu - CFM
10
Recaída LMA post alo trasplante según fase
MIELOMA MÚLTIPLE
Auto trasplante
Pacientes < 60 años.
Attal M, Harousseau el al.
NEJM 335:91-97 1996.
11
Enfermedad de Hodgkin en recaída
Sobrevida libre de progresión
Schmitz N y col.
Lancet 359:2065-2071. 2002
Linfoma No Hodgkin en recaída
LNH folicular
Sobrevida libre de
progresión.
Rohatiner AZ et al.
J Clin Oncol
12:1177-1184, 1994
12
Linfoma No Hodgkin en recaída
LNH
Sobrevida libre
progresión.
Armitage et al.
NEJM
330:827-838. 1994
CONCLUSIONES I
La fuente de PH puede ser sangre, médula o cordón,
dependiendo de esto la extracción.
El origen de las células para trasplante pueden ser
auto o alogénica, estableciendo modalidades distintas de
trasplante.
Las indicaciones están orientadas principalmente a
enfermedades hematológicas
El éxito del trasplante depende de la edad, dg, fase y
criterios pronósticos de cada enfermedad.
13
TRASPLANTE DE PROGENITORES
HEMATOPOYÉTICOS
Enfermedad Injerto contra Huésped
Reacción injerto contra tumor
ENFERMEDAD INJERTO CONTRA HUÉSPED
14
INJERTO CONTRA TUMOR
16 mm
11 mm
0 mm
15
INJERTO CONTRA HUÉSPED
1. Inicio de daño tisular.
TNF-ά , IFN-γ , IL-1 →
GM-CSF
→
Proinflamatorio
Molec adhesión y MHC
•
Activación de Linfocitos T del donante
Presentación Antigénica. DCs vía MHC-TCR
•
Fase efectora de daño tisular
CD4, CD8 CTL, NK.
TNF-ά, Fas-Fas-L, Perforina/Grazima, Th1/Th2.
FUNCIÓN T REGULADORA
1. Médula ósea con depleción T.
+ (CD4+CD8+) NK1.1+ → Mínima EICH
Depleción NK1.1+
(IL-4 dependiente)
→ EICH con 70 % letalidad.
2. Tolerancia antígeno específica.
CD4+CD25+ (IL-2 ά R)(mediado por IL-10)
16
Antígenos menores de Histocompatibilidad
•
mHAg.
Ag proteicos polimórficos.
En humanos muy pocos han sido caracterizados.
Poseen genes polimórficos en 1 aa.
El gen autosómoico UDP-glicosil-transferasa. mRNA
Hígado, intestino, colon, páncreas.
2. Células presentadoras de antígeno. (DCs)
Células Dendríticas
17
Reconocimiento antigénico
18
MATERIAL Y MÉTODO 2
Separación x Inmunoafinidad
19
Purificación de linfocitos T sangre periférica
Normal
Gradiente
Inmunobeads
Purificación DCs
Tejido sin marcar
Separación por Gradiente
Inmuno afinidad (1)
Inmuno afinidad (2)
90 % pureza
20
PACIENTE 1
Receptor Pre- TMO
Dador
DCs
LT
Sangre
PACIENTE 2
Donante
N°
Alelos
Don
Rec
LT (sp)
DC (TP)
Pre-TMO
Post-TMO
Receptor
LT CD3+
Post-trasplante
DCs
Post-trasplante
21
CONCLUSIONES
A diferencia de los modelos murinos estudiados,
las células presentadoras de Ag, alogénicas, están
relacionadas con la EICH.
Existe un amplio campo de investigación en la
modulación de la respuesta inmune a través no solo
de LT, sino además de su complemento indispensable
las CPA.
22
Qué es lo que viene?
Depleción Selectiva
23
Depleción Selectiva
Eliminación de linfocitos
Alo – reactivos
CD4+ CD25+
HLA clase I
24
Estructura HLA clase II
25
Linfoma No Hodgkin en recaída
26
Laboratorio de Terapia celular.
Dr. Jorge Alfaro
BQ Claudio Pérez
TQ Alejandra Leiva
Banco de Sangre.
Dr. Milton Larrondo
Servicio Dento Maxilo Facial
Dr. Fermín González
Sección de Hematología
Dr. Néstor González
Dra.
Dra. Paola Aravena.
Aravena.
Dr.
Dr. Daniel Araos.
Araos.
Dr.
Dr. Guillermo Conte
Programa Inmunología. Facultad de Medicina
Dr. Flavio Salazar
Dra. Mercedes López
27