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Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B BENEMÉRITA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE PUEBLA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS LICENCIATURA: QUÍMICO FARMACOBIÓLOGO ÁREA ESPECÍFICA DE: ANÁLISIS CLÍNICOS MANUAL DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO ASIGNATURA DE: HEMATOLOGÍA III CÓDIGO: LQF 410 L FECHA DE ELABORACIÓ: MARZO DEL 2006 NIVEL EN EL MAPA CURRICULAR: TERMINAL TIPO DE ASIGNATURA: CP PROFESORES QUE PARTICIPARON EN SU ELABORACIÓN: M.C. SILVIA GARCÍA GONZÁLEZ M.C. MIGUEL ANGEL VILLEGAS GONZÁLEZ M.C. .GONZALO GARZON GARCIA M.C. NORMA ELOINA LARA ROSANO HORAS PRÁCTICA. 3 TOTAL DE CRÉDITOS: 0 1 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B OBJETIVOS GENERALES: El alumno sea capaz de llevar a cabo diversas pruebas de laboratorio que sean útiles en la evaluación Vascular, Plaquetario, de los Factores de la coagulación y la Fibrinólisis tanto en estado de salud así como en el diagnóstico de alteraciones en la hemostasia, la interpretación de los resultados, para colaborar así con el personal del área de la salud en el adecuado diagnóstico, prevención y tratamiento de diversas enfermedades. Conocerá y aplicará la NOM-003 SSA2-1993 sobre los requisitos básicos, las pruebas obligatorias efectuadas en el Banco de Sangre, a los donadores y receptores de tejido sanguíneo, y así poder aprender a resolver los problemas que se presentan en la medicina transfusional. SISTEMA GENERAL DE EVALUACIÓN: Se deberá cumplir con el 100% de asistencia al laboratorio. Participación: Seminario Desempeño Pre-reportes y Reportes (equipo) Entrega problemas Resueltos Total 20 % 30 % 60 % 100 % NOTA: Una calificación aprobatoria corresponderá al 20% de la calificación final en la materia. 2 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B DESCRIPCIÓN DE LAS SESIONES DE LABORATORIO: No. 1 SEMINARIO: DIAGNÓSTICO DE LABORATORIO EN LOS DESORDENES DE LA COAGULACIÓN. OBJETIVO: La finalidad de este seminario es que los alumnos conozcan los fundamentos de las pruebas de escrutinio vasculo plaquetarias, y de los factores de la coagulación, su importancia en todos los procesos quirúrgicos. También será importante que tengan conocimiento sobre pruebas especiales para la función plaquetaria, para factores de la coagulación e incluso para la evaluación de la fibrinólisis para el diagnóstico de diferentes alteraciones tanto congénitas como adquiridas y que coadyuvan en el diagnóstico y tratamiento de los pacientes que las padecen. 3 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No. 2 y 3 INVESTIGACIÓN DEL SECTOR VASCULO-PLAQUETARIO EN LA HEMOSTASIA. OBJETIVO: Que el estudiante realice diferentes determinaciones que le proporcionen información acerca del estado vasculo-plaquetario del paciente. INTRODUCCIÓN: El mecanismo de la hemostasia puede considerarse como una serie de factores sucesivos puestos en juego y conducentes por último a la detención de la hemorragia. Estos factores se hallarían representados por: sector vascular, plaquetas, factores plasmáticos de coagulación e inhibidores de la coagulación. 4 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No. 4 y 5 EVALUACIÓN DE LOS FACTORES DE LA COAGULACIÓN OBJETIVO: Efectuar diversas pruebas de escrutinio y especiales para detectar alguna falla en los factores de la coagulación. INTRODUCCIÓN: Entre las pruebas de utilidad para evaluar los diferentes sistemas o mecanismos se encuentra el Tiempo de Tromboplastina Parcial (TTP), que involucra a los sistemas intrínseco y común exceptuando a las plaquetas y Ca, o bien que depende de la totalidad de factores de coagulación involucrados en las etapas 1, 2 y 3 excepto Ca, plaquetas y factor VII. El Tiempo de Protrombina (TP), que mide los factores de mecanismos extrínseco y común con excepción de III y Ca, o bien que evalúa los niveles de factores I, II, V, VII y X.. El Tiempo de Trombina (TT), se basa sólo en el pasaje de fibrinógeno a fibrina, o sea la fase 3. En esta fase, interviene también el factor XIII, estabilizando a la fibrina. En esta fase, interviene también el factor XIII, estabilizando a la fibrina. 5 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No.6.- PRUEBAS DIAGNÓSTICAS EN TRASTORNOS DE LA FIBRINÓLISIS OBJETIVO: Que el alumno efectúe pruebas de laboratorio para llegar a detectar alteraciones en la fibrinólisis. INTRODUCCIÓN: La fibrinólisis es la destrucción de la fibrina. La función de este sistema es diametralmente opuesta a la de la formación del coágulo; se caracteriza por producir una enzima proteolítica, la plasmina. Esta enzima se forma a partir de un precursor inactivo del plasma, el plasminógeno. La activación del plasminógeno se produce fundamentalmente por un activador hístico. También la fibrinólisis posee inhibidores frente a sus productos de transformación: antiplasminas y antiactivadores. 6 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No.7.- SEMINARIO. LA IMPORTANCIA DE LAS PRUEBAS DE LABORATORIO EN EL CAMPO DE LA MEDICINA TRANSFUSIONAL. No. 8 y 9 VALORACIÓN INMUNOHEMATOLÓGICA DE LOS SISTEMAS ABO Y Rh. OBJETIVO: Que el alumno efectúe las pruebas directa e inversa de los los sistemas sanguíneos ABO y Rh. INTRODUCCIÓN: En la membrana del eritrocito se encuentra una gran cantidad de antígenos (alrededor de 400). Los grupos sanguíneos tienen su origen en la existencia de estos antígenos eritrocitarios. Se llama sistema de grupo a un conjunto de antígenos que conservando su independencia, se transmiten como una unidad. Los grupos sanguíneos son aloantígenos que se heredan bajo control genético siguiendo las leyes de la herencia originalmente establecidas por Gregorio Mendel. El sistema ABO comprende los antígenos (Ag) presentes en lal membrana de los eritrocitos y sus correspondientes anticuerpos (Ac) presene en el suero. Este sistema fue el primero de los grupos sanguíneos descubiertos y continúa siendo hasta el momento el más importante con relación a la transfusión sanguínea. En 1900 Landsteiner postuló que cada persona podía tener 1, 2 o ningún aglutinógeno (actualmente conocidos como Ag A y B) en 7 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B los glóbulos rojos. Cuando uno de estos aglutinógenos no se encontraba en los eritrocitos de una persona, su correspondiente Ac estaba presente en el suero o plasma. Esta relación recíproca entre el Ag y su correspondiente Ac es lo que se conoce como Ley de Landsteiner. En 1939 reiniciaron Levine, Stetson, Landsteiner y Wiener una nueva fase en el estudio de grupos sanguíneos estableciendo las bases para el conocimiento de un nuevo sistema (Rh), el cuál es después del ABO el más importante de los sistemas de grupos sanguíneos, por sus implicaciones clínicas en el transfusión sanguínea y en la etiopatogenia de la enfermedad hemolítica del recién nacido. 8 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No. 10.- EVALUACIÓN A LOS DISPONENTES DE SANGRE SEGÚN ESTABLECE LA NOM-003 SSA2-1993 OBJETIVO.- El Alumno aplicará la normatividad establecida en el país de carácter obligatorio para la aceptación de los posibles donadores y le realizará las pruebas previas. INTRODUCCIÓN: La NOM-003 tiene por objeto uniformar las actividades, criterios estrategias y técnicas operativas del Sistema nacional de salud, en relación con la disposición de sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos. No. 11.- PRUEBAS DE COMPATIBILIDAD OBJETIVO: El alumno conocerá las pruebas adecuadas que se efectúan para conocer si existe compatibilidad serológica entre la sangre de un donador y un receptor. NO. 12.-DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS IRREGULARES. OBJETIVO: El alumno conocerá las pruebas de Anticuerpos irregulares, que se efectúan a pacientes que han sido politransfundidos y que generalmente presentan incompatibilidad. INTRODUCCIÓN: Para asegurar la compatibilidad entre donante y receptor y evitar accidentes, es imprescindible la realización de pruebas pretransfusionales. La prueba cruzada o de compatibilidad es una prueba de laboratorio que permite conocer si existe compatibilidad serológica entre la sangre de una persona donante y la de un receptor. Es la prueba más importante efectuada en un servicio de transfusión. Por lo tanto, es necesario ser sumamente cuidadoso en su procedimiento y realizar las pruebas más sofisticadas que permitan asegurar el máximo beneficio al paciente. Los objetivos de la prueba de compatibilidad son: 9 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B -Procurar que el paciente reciba el máximo beneficio de la transfusión. -Prevenir una reacción hemolítica transfusional. -Detectar anticuerpos irregulares en el suero del paciente conta los glóbulos rojos del donante, en la prueba cruzada mayor, y detectar anticuerpo en el suero o plasma del donante contra los glóbulos rojos del receptor, en la prueba cruzada menor. -Detectar errores en la determinación del sistema ABO. -Detectar errores en la identificación de las muestras de donantes y de receptores. La prueba cruzada comprende dos pasos: a) Prueba cruzada directa o mayor. Es la más importante. En ella se ponen en contacto los glóbulos rojos del dador con el suero del receptor. Detecta anticuerpos en el receptor que puedan dañar los glóbulos rojos que se van a transfundir. b) La prueba cruzada indirecta o menor. Detecta anticuerpos en el plasma o suero del donante que puedan afectar los hematíes del receptor. Debido a que los anticuerpos presentes en el donante se van a diluir en la volemia del receptor, el daño que puedan ocasionar es escaso, a menos que se encuentren en una elevada concentración. La Asociación Americana de Bancos de Sangre recomienda que las pruebas de compatibilidad se deben emplear métodos sensibles que demuestren la presencia de anticuerpos completos o aglutinantes, e incompletos o bloqueantes, y deberá incluir la prueba de Coombs. En el campo de la inmunohematología se ha comprobado que existen distintos tipos de anticuerpo en base a su tamaño, pero, temperatura óptima de reacción, medio de reacción, etc. Los anticuerpos, en cuanto a estas propiedades, han sido clasificados en dos grupos: Anticuerpos fríos y Anticuerpos calientes. Los Anticuerpos fríos reaccionan mejor en un rango de temperatura de 20º C a 30º C. No son importantes desde el punto de vista transfusional, pues generalmente no son activos a temperatura corporal. Sin embargo, pueden influir o interferir en la clasificación sanguínea de la persona y en las pruebas de compatibilidad realizada a temperatura ambiente. Estos anticuerpos se denominan IgM, es decir, inmunoglobulina M, cuyo P.M. es de 900 000 y su medio de reacción es el salino. Los anticuerpos calientes se han denominado así porque reaccionan mejor a 37º C. Son importantes desde el punto de vista transfusional ya que pueden producir una reacción en el paciente transfundido, ocasionándole daño leve o grave. Estos anticuerpos se denominan IgG, cuyo P.M. es de 150 000 y reaccionan mejor en medio proteico (albúmina). 10 Fac. Cs. Qs. Dpto. De ANÁLISIS CLÍNICOS LABORATORIO DE HEMATOLOGÍA III Q.F.B No. 14.- RESOLUCIÓN DE PROBLEMAS REFERENTES A MEDICINA TRANSFUSIONAL OBJETIVO: Dicha sesión se realiza con el fin de que el estudiante se familiarice con diversos problemas que se presentan en el área de medicina transfusional, y pueda enfrentarlos y resolverlos satisfactoriamente. No. 15.- VISITA AL SERVICIO DE MEDICINA TRANSFUSIONAL EN UN HOSPITAL. NO. 16.- EVALUACIÓN. BIBLIOGRAFÍA: • Albarrán C., Albarrán, L.: Manual Técnico de Banco de Sangre, Ed.Prensa Médica Mexicana, S.A. México • Sans-Sabrafen J., Hematología Clínica, Ed. Doyma, Barcelona, España. • Kelton J.G., Heddle N.M., Blajchman M.A., Transfusión Sanguínea. Bases teóricas y aplicación clínica, Ed. Doyma, Barcelona, España. • BBAA.: (1995) Blood Bank. Ed. Masson 11