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EFECTO DE LAS CRISIS CONVULSIVAS INDUCIDAS POR LA
ADMINISTRACIÓN DE 4-AMINOPIRIDINA EN CORTEZA ENTORRINAL, SOBRE
LA EXPRESIÓN DE LOS TRANSPORTADORES EAAT-3 Y GAT-1.
Medina-Ceja L., Sandoval-García F.
Laboratorio de Neuroquímica y Neurofisiología, Centro Universitario de Ciencias
Biológicas y Agropecuarias, Universidad de Guadalajara.
Los transportadores de glutamato y GABA son proteínas de membrana que se
localizan en neuronas y células gliales, encargados de la captura de
neurotransmisores del espacio extracelular con la finalidad de mantener sus
niveles normales. De los cinco transportadores de glutamato identificados, el
EAAT-3 se expresa en neuronas del giro dentado (GD) e hipocampo. Mientras que
el transportador de GABA GAT-1 se expresa en neuronas GABAérgicas de estas
regiones y su inhibición tiene efectos terapéuticos en modelos de epilepsia. Existe
evidencia experimental que demuestra una relación entre niveles altos de
glutamato y cambios en la expresión de estos transportadores. En este trabajo,
evaluamos la expresión de las proteínas EAAT-3 y GAT-1 por la técnica de
inmunofluorescencia a diferentes tiempos (30, 60 y 180 minutos) después de la
administración de 4-Aminopiridina (4-AP, 10 nmoles) en la corteza entorrinal (CE).
Asimismo, registramos de manera continua la actividad EEG de las ratas y
observamos su conducta convulsiva considerando la escala de Racine modificada
para este modelo. Ratas Wistar fueron implantadas con electrodos de registro
superficiales en la corteza occipital binocular izquierda (COBi), la corteza occipital
derecha e izquierda (COd, COi) y una cánula guía en la CE derecha (CEd) que se
utilizó para inyectar 4-AP o NaCl y como electrodo de registro de esa región.
Después de la inyección con 4-AP se observó actividad epileptiforme en la CEd
que se propagó al resto de las regiones estudiadas. El valor máximo alcanzado
por las descargas epileptiformes se relacionó con una conducta convulsiva de 4 en
la escala de Racine modificada. Las ratas del grupo control presentaron una
actividad EEG basal caracterizada por ondas lentas fisiológicas de baja amplitud y
frecuencia sin conducta convulsiva. No se observaron cambios en las células
comarcadas para EAAT-3 y GAT-1 del grupo experimental con respecto al control
a los 30 minutos post inyección de 4-AP. Se observó un aumento en la expresión
de EAAT-3 en el GD del grupo experimental con respecto al control a los 60
minutos posteriores a la inyección con 4-AP (GDd 2931±52/2457±178; GDi
2980±14/2253±42 células co-marcadas/mm3, p˂0.001), y una disminución en la
región de CA1 (CA1d 1145±18/1327±31; CA1i 1059±16/1217±21 células comarcadas/mm3, p˂0.001). Mientras que la expresión de GAT-1 aumentó en GD y
CA1 (GDd 2656±36/2364±42, GDi 2949±24/2058±44; CA1d 1155±23/1055±6,
CA1i 1090±11/1032±10 células comarcadas/mm3, p˂0.05). Finalmente, se
observó una disminución en la expresión de EAAT-3 en CA1 del grupo
experimental con respecto al control a los 180 minutos post inyección de 4-AP
(CA1d 927±14/992±23, CA1i 915±11/956±17 células comarcadas/mm3, p˂0.05) y
una disminución en la expresión de GAT-1 (GDd 2270±19/2329±8, GDi
2224±60/2468±87 células comarcadas/mm3, p˂0.05). El aumento en la expresión
de EAAT-3 observado en GD después de la administración de 4-AP sugiere un
probable mecanismo compensatorio para eliminar los niveles de glutamato
incrementados por el efecto de la 4-AP, mientras que en la región CA1
probablemente este mecanismo no se presenta por ser una región más
susceptible que el GD. Los incrementos en GAT-1 observados pudieran favorecer
el metabolismo del GABA y de esta manera la transmisión inhibidora en respuesta
al estímulo repetido excitador producido por las crisis y el glutamato. Apoyo
otorgado por COECYTJAL-U. DE G. PS-2009-489/558 y CONACYT-CB-106179.