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Efecto de la inoculación con Azospirillum brasilense sobre la germinación y el crecimiento de Nierembergia linariaefolia Puente, M.L.1.; García, J. E.1.; Mata, D.2, Soto, S.2 y Perticari, A1. 1 Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola, CNIA, INTA Castelar. Las Cabañas y Los Reseros s/n (1712), Castelar, Buenos Aires, Argentina 2 Instituto de Floricultura, CNIA, INTA Cautelar E-mail: mpuente@cnia.inta.gov.ar Introducción El género Nierembergia, perteneciente a la familia Solanaceae, está constituido por 21 especies neotropicales distribuidas en Sudamérica (Cocucci et al, 1995). El centro de distribución se encuentra en Argentina, con un total de 15 especies. El género presenta especies herbáceas erectas, decumbentes y postradas, las flores se presentan solitarias o en cimas laxas en la mayoría de las especies abundantes en la estación primavera – verano. En los últimos años este género ha alcanzado una gran importancia económica en el mercado ornamental, encontrando actualmente en el comercio mundial variedades pertenecientes a N. linariaefolia y N. veitichii, provenientes de empresas de origen norteamericano y japonés. En el género Nierembergia se han detectado muchas especies con gran potencial ornamental por presentar características como: amplia distribución geográfica, abundante y largo período de floración, variabilidad en el color de flor y en el hábito de crecimiento y rusticidad para su cultivo bajo condiciones domésticas. Estudios de germinación sobre las variedades comerciales en el género muestran algunas dificultadas en esta etapa por presentar un largo período a germinación (15-30 días; 7075°F), en forma despareja y con un lento establecimiento de plántula (Soto, et al. 2003). Por este motivo, las variedades comerciales en nuestro país no están difundidas. En los últimos años se comenzaron en el Instituto de Floricultura del INTA Castelar líneas de trabajo para la obtención de variedades por semilla, encontrando importante el estudio de manejo en la etapa de germinación y establecimiento de plántula. Las bacterias promotoras del crecimiento vegetal, también denominadas PGPR (Plant Growth Promoting Rizobacteria), son bacterias que habitan en la rizosfera de las plantas y que pueden tener un efecto positivo sobre los cultivos (Puente y Peticari, 2006). En estas se incluyen varios géneros bacterianos entre ellos se encuentran las bacterias del género Azospirillum, reconocidas por su capacidad de promover el crecimiento vegetal. Esta bacteria fue aislada de la rizosfera y de la superficie de las raíces de una amplia variedad de plantas cultivadas y silvestres del mundo. La inoculación con Azospirillum produce un aumento de la masa radicular, debido a la capacidad de producir fitohormonas, estas promueven la elongación radical e incrementan las ramificaciones laterales por lo que aumenta el área radical. Se ha demostrado que las plantas inoculadas con esta bacteria absorben más rápido minerales de la solución y, consecuentemente, acumulan más materia seca, N, P y K en tallos y hojas (Puente y Peticari, 2006). La mayoría de los trabajos están basados en su relación con cereales y gramíneas, pero también se han citado efectos benéficos en otro tipo de cultivos. Objetivo El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de la inoculación de Nierembergia linariaefolia con Azospirillum brasilense sobre el poder y energía germinativa, la velocidad de establecimiento de las plántulas y vigor de las plántulas al momento del transplante y de determinar la dosis de inoculante y la forma de inoculación más adecuada para este cultivo. Materiales y métodos Para definir las dosis de inoculante que se ensayarían sobre el sustrato se llevó a cabo una evaluación previa de la sobrevivencia de la bacteria sobre el mismo. Para ello se inocularon 90 gr. del sustrato con 4 dosis: 1, 3, 5 y 7 ml. Los recuentos se realizaron en placas de petri, con medio selectivo (Rodríguez Cáceres, 1982), utilizando el método de la micro gota. Los momentos evaluados fueron 1, 3 y 5 h desde realizada la inoculación. Las placas se incubaron en estufa a 37º C durante 4 días y se determinó el número de unidades formadoras de colonia por mililitro de inoculante (ufc.ml-1). El ensayo se realizó en plugs de 288 celdas con una capacidad de 5 ml por celda, colocados en mesadas bajo sistema de mist dentro de un invernáculo perteneciente al Instituto de Floricultura (INTA). La temperatura mínima es controlada a 15º C. Se utilizó un sustrato comercial (Fafard Canadian Growing Mix 2, Conrad Fafard Inc., Canadá). El inoculante formulado es en medio líquido a base de Azospirillum brasilense (Az. 39) de la colección INTA-IMYZA, con una concentración de 1x109 ufc.ml-1. Se utilizaron semillas obtenidas del cruzamiento interespecífico entre un genotipo selecto N. scoparia y otro genotipo N. ericoide. Se utilizó un diseño en parcelas divididas de 4 bloques asignando 2 a cada uno de las parcelas principales (sustrato y plántulas) y 6 tratamientos en subparcelas. Los tratamientos son: 1. Sustrato sin inocular 2. Sustrato inoculado: 1ml de inoculante/90 gr 3. Sustrato inoculado: 2ml de inoculante/90 gr 4. Plántulas sin inocular. 5. Plántulas Inoculadas: 20µl/plántula 6. Plántulas Inoculadas: 40µl/plántula Para los tratamientos 2 y 3 la inoculación fue llevada a cabo sobre el sustrato previo a la siembra, mientras que en los tratamientos 5 y 6 la inoculación fue sobre la base del tallo de plántulas a 15 días de la siembra. Las dosis probadas en los tratamientos 2 y 3 equivalen a las correspondientes dosis utilizadas en los tratamientos 5 y 6. Las variables que se evaluarán en cada tratamiento son: 1. Poder de germinación (solamente a los tratamientos 1, 2 y 3) 2. Velocidad de establecimiento de la plántula 3. Altura de la plántula al momento de transplante Resultados y discusión Los resultados obtenidos en el ensayo que se realizó para definir las dosis de inoculante que se ensayarían sobre el sustrato se resumen en el siguiente cuadro: Tratamientos 1h 3h 1 ml/ 90 gr sustrato 6,4x106 ufc ml -1 3x106 ufc ml -1 7 -1 3 ml/ 90 gr sustrato 1,36x10 ufc ml 1,54x107 ufc ml -1 7 -1 5 ml/ 90 gr sustrato 1,68x10 ufc ml 2,08x107 ufc ml -1 7 -1 7 ml/ 90 gr sustrato 3x10 ufc ml 3x107 ufc ml -1 Se observó que utilizando la menor dosis de inóculo, la sobrevivencia de la es óptima, por lo que se eligió ésta para realizar el ensayo. 5h 3x106 ufc ml -1 3x107 ufc ml -1 3x107 ufc ml -1 3x107 ufc ml -1 bacteria sobre el sustrato A la fecha del presente artículo de divulgación no se han realizado determinaciones. Los resultados que se obtendrán en este trabajo pretenden no solo mejorar las dificultades que se presentan en esta etapa, en cuanto a una metodología de manejo para poder ser utilizada por los productores, sino también su utilización dentro de planes de mejoramiento para selección de genotipos con mayor respuesta. Bibliografía Cocucci, A.A. and Hunziker, A.T. 1995. Nierembergia, A.T. Hunziker (ed), Flor Fanerógamica Argentina 15:3-14. Puente, M. y Peticari Alejandro 2006. Promotores del crecimiento vegetal. Características y uso potencial en el agro argentino. Revista de los CREA. Año XXXVI- N° 304-Febrero 2006. Pág.66-69. Rodríguez Cáceres, E. Improved medium for isolation of Azospirillum spp. Applied andEnvironmental and Microbiology. Volumen 44 nº 4. Oct 1982. P 990-991. Soto, S.; Miyajima, I. ;Kobayashi, N.; Bullrich, L.; Mata,D.; Facciuto, G.; Serpa, J.C., Hagiwara, J.C.; y Morisigue, D. 2003 , New clones of Nierembergia linariaefolia obtained from population native to Argentina. "V international symposium on new floricultural crops". 26-30 august, Iguazu Falls, Paraná Brazil