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Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas
PRACTICA 2
Tinción de Gram
Introducción
Las bacterias son incoloras y se observan con dificultad al microscopio
óptico. Los cocos y los bacilos se pueden identificar por su forma, agrupación y
por la afinidad a los colorantes utilizados en la tinción de Gram. Las bacterias
Gram positivas retienen el color azul violeta y las bacterias Gram negativas el
color rojo pálido. En general la tinción de Gram no es aplicable a otros
microorganismos como protozoos y hongos, exceptuando a las levaduras que se
tiñen como Gram positivas.
Objetivos
1. Clasificar algunas especies bacterianas en Gram positivas o Gram
negativas de acuerdo a esta tinción.
Materiales de laboratorio por equipo
1 Asa bacteriológica de aro
Fucsina
1 Microscopio
Cristal violeta
2 Mecheros
Lugol
6 Portaobjetos y cubreobjetos Alcohol-cetona
Cultivos bacterianos
Papel para lente
Aceite de inmersión
Pinzas para tubo de ensaye
Cronómetro
Material del equipo
Cerillos
Colores
Marcador indeleble o lápiz graso
Cloro
Franela
Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas
Actividad de la práctica
Preparación del frotis
Se realizará el mismo procedimiento de la práctica 2
Fijación del frotis
Se realizará el mismo procedimiento de la práctica 2
Tinción diferencial de Gram.
1. Cubrir el frotis con dos gotas de cristal violeta durante 30 segundos a 1
minuto.
2. Lavar cuidadosamente el frotis con agua de la llave o destilada para
eliminar el exceso de colorante.
3. Sacudir un poco y dejar secar, cubrir el frotis con dos gotas de lugol por 30
segundos.
4. Repetir el paso 2
5. Inclinar el portaobjeto y aplicar gota a gota el decolorante dejando que
escurra hasta que no fluya más tintura.
6. inmediatamente repetir el paso 2.
7. aplicar dos gotas de safranina durante 30 segundos.
8. repetir el paso 2, eliminar cuidadosamente el exceso de agua con una toalla
de papel y dejar secar al aire.
9. observar al microscopio.
Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas
Resultados.

Reportar las observaciones de forma, agrupación color y tamaño relativo tal
como se indica en el cuadro de resultados. Hacer los dibujos de la
morfología de cada uno de los microorganismos y colorearlos.

Comparar las observaciones realizadas con las reportadas en la literatura.
Tinción de Gram
Escherichia coli
Esquema
Descripción
Forma:
Agrupamiento
de
células:
Reacción Gram
Cuestionario
1. Explique en forma completa la teoría que explica la tinción de Gram.
Investigue otros dos ejemplos de tinción diferencial.
2. ¿Cuáles son las fuentes de error más comunes en la tinción de Gram?
Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas
Fichas catolográficas del material bibliográfico sugerido que se encuentran
en la biblioteca de la UMAR
Ficha No. 2014
CLASIFICACION 579 T759 1996
ISBN: 84-458-0371-9
Título: Tratado de microbiología / Bernanrd D. Davis ... (et.al.), trad. Diorki, S. L.
Autor:
Editorial: Barcelona : Masson, 1996
Descripción: 1145 p.
TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - FISIOLOGIA - GENETICA \ 2. INMUNOLOGIA VIROLOGIA - BACTERIAS \ 3. MICROBIOLOGIA - VIRUS Y MICROBIOS ESTUDIO Y ENSEÑANZA \ 4. PATOLOGIA - MICROORGANISMOS VIRALES –
Ficha No. 2194
CLASIFICACION 579 S713m
ISBN: 84-282-1030-6
Título: Microbiología general / Hans G. Schlegel
Autor: Schlegel, Hans G.
Editorial: Barcelona : Omega, 1997
Descripción: 654 p.
TEMAS: 1. BACTERIOLOGIA - METABOLISMO CELULAR \ 2. HONGOS MICROBIOS - BACTERIAS \ 3. BACTERIAS - ESTRUCTURA CELULAR GENETICA
Ficha No. 2295
CLASIFICACION 616.01 B150m 2005
ISBN: 970-729-136-2
Título: Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg / Geo F. Brooks, Janet
S. Butel, Stephen A. Morse, trad. Francisco Sánchez Fragoso
Autor: Brooks, Geo F.
Editorial: México : El Manual Moderno, 2005
Descripción: 786 p.
TEMAS: 1. INMUNOLOGIA - BACTERIOLOGIA - VIROLOGIA \ 2. MICOLOGIA PARASITOLOGIA - DIAGNOSTICO \ 3. CLINICA BACTERIOLOGICA MICROBIOS - BIOLOGIA MOLECULAR \ 4. MICROORGANISMOS - CULTIVO CRECIMIENTO
Practicas de Laboratorio Biología de Procariotas
Ficha No. 2761
CLASIFICACION 579 C159m 1979
ISBN: 968-25-0205-5
Título: Microbiología / Philip L. Carpenter, trad. José Rafael Blengo, Roberto
Espinosa Zarza, Alberto Folch Pi.
Autor: Carpenter, Philip L.
Editorial: México : Interamericana, 1979
Descripción: 518 p.
TEMAS: 1. MICROORGANISMOS - MORFOLOGIA - IDENTIFICACION \ 2.
BACTERIAS - VIRUS - METABOLISMO Y MECANISMOS GENETICOS \ 3.
PROTISTAS - PROTOZOARIOS - ALGAS \ 4. MOHOS - LEVADURAS ECOLOGIA \ 5. ENFERMEDADES INFECCIOSAS - MICROBIOLOGIA
AMBIENTAL E INDUSTRIAL
Notas: Incluye índice, glosario y referencias bibliográficas
Ficha No. 2284
CLASIFICACION 636.089 692 T759
ISBN: 84-200-0766-8
Título: Tratado de microbiología veterinaria / Editado por Ernst L. Biberstein, Yuan
Chung Zee, Trad. Manuel Ramis Vergés
Autor: Biberstein, Ernst L.
Editorial: Zaragoza : Acribia, 1994
Descripción: 673 p.
TEMAS: 1. PARASITISMO - PATOLOGIA ANIMAL - MICOBIOS \ 2. BACTERIAS
Y HONGOS - VIRUS - ANALISIS \ 3. MICROBIOLOGIA VETERINARIA