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Trabajo Nº155
Título
IDENTIFICACION DE miRNA-575 COMO POTENCIAL BIOMARCADOR EN ORINA
ASOCIADO A LA ACTIVIDAD DE LA 11BHSD2
Autor Y Coautores
Cristian A. Carvajal1,3, Alejandra Tapia1, Carolina Valdivia1,3, Cristobal Fuentes1,3, Andrea
Vecchiola1,3, Carmen Campino1, Hernán García1,3, Alejandro Martinez1,3, Gareth Owen4,
Carlos E. Fardella1,3.
Lugar De Trabajo
1Endocrinología, Pontificia Universidad Católica de Chile, Santiago, Chile. 2Pediatria,
Pontificia Universidad Católica de Chile. 3Millenium Institute in Immunology and
Immunotherapy, Santiago, Chile. 4Unidad de Reproducción y Desarrollo, Facultad de Ciencias
Biologicas, Pontificia Universidad Catól
Relator
Cristian A. Carvajal
Contenido (2500 Caracteres, Incluye Los Espacios)
La enzima 11B-hidroxisteroide deshidrogenasa tipo 2 (11BHSD2) se expresa abundantemente
en el riñón y su déficit genera hipertensión arterial (HTA). La actividad de esta enzima puede
ser afectada por mutaciones, polimorfismos y modificaciones epigenéticas (metilaciones CpG y
modificaciones por micro-RNA (miRNA)). Los miRNAs son RNAs pequeños no-codificantes
que pueden regular la actividad post-transcripcional de genes. La presencia de RNA de
11BHSD2 o miRNAs específicos en orina, y en especial exosomas, han sido propuestos como
potenciales marcadores específicos de la actividad mineralocorticoidea a nivel renal. Objetivo:
Identificar miRNAs asociados a la expresión de 11BHSD2 e investigar su posible utilidad como
biomarcador clínico. Sujetos y Métodos: Se hicieron análisis bioinformáticos en búsqueda de
potenciales miRNA que unen la región 3’UTR del gen HSD11B2 (NG_016549) mediante
software DianaLab. Se obtuvieron muestras sangre y orina fresca matinal de 40 sujetos (10-60
años). Se aisló DNA genómico, RNA desde leucocitos periféricos, RNA de orina matinal y
RNA de exosomas (nanovesiculas de 40-100 nm) de orina para detectar expresión de
HSD11B2, AQ2 (acuaporina 2, marcador epitelio renal), miRNA-575, miRNA-U6 (gen de
expresión constitutiva pequeño) y 18S mediante RT-qPCR. La asociación entre variables se
determinó por correlaciones de Pearson con Prism v5.0. Resultados: El análisis bioinformático
identificó que miRNA-575 se une a la región codificante y 3’UTR del RNA de HSD11B2. En
leucocitos de sujetos estudiados se detectó miRNA-575 y HSD11B2. Aquí la tasa de expresión
relativa fue similar y proporcional entre miRNA-575 y HSD11B2 (R=0.65, p<0.05). En
sedimento de orina matinal, hemos aislado RNA y detectado la expresión de 11BHSD2, AQ2,
miRNA-575 y miRNA-U6, y observamos una asociación positiva entre miRNA-575 y
11BHSD2 (R=0.88, p<0,05). La expresión de miRNA-U6 y 18S presenta una asociación
positiva en leucocitos (R=0.64, p <0.05) y orina (R=0.97, p <0.05). Ensayos preliminares
muestran expresión de miRNA-575, miRNA-U6 y AQ2 en exosomas urinarios. Conclusiones:
Detectamos RNA de miRNA-575 y HSD11B2 en leucocitos periféricos y orina matinal. La
asociación positiva entre miRNA-575 y HSD11B2 en orina sugiere que este miRNA sea un
potencial biomarcador clínico y no invasivo de la expresión de 11BHSD2. SOCHED 2012-04,
FONDEF IDEA CA12i10150, FONDECYT 1100356 y P09/016-F IMII. CAC es becario
doctoral CONICYT.