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XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
AISLAMIENTO DE PROMOTORES FLOEMA-ESPECÍFICOS Y
CONSTRUCCIÓN DE PLÁSMIDOS BINARIOS CONTENIENDO EL GEN
REPORTERO gusA
Christian Omar Gómez Díaz Ciencias Biológicas y Agropecuarias de la Universidad de
Colima, christian.gd@hotmail.com. Asesor Marco Tulio Buenrostro Nava Universidad de
Colima, mbuenrostro0@ucol.mx
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
En los últimos años los principales problemas en los cultivos son las plagas y
enfermedades, ya que reducen significativamente su producción. La ingeniería
genética representa una herramienta fundamental para la introducción de nuevas
características agronómicas en los diferentes cultivares y muy probablemente es
una de las herramientas más viables para generar plantas tolerantes a patógenos,
los cuales se establecen en tejido vegetativo especifico, en este caso al conducto
del floema.
Por lo que es requerido el uso construcciones genéticas con promotores floemaespecíficos, como opción para ser utilizados en los programas de transformación
genética con genes antibacterianos.
METODOLOGÍA
Se emplearon brotes tiernos de un árbol de naranja dulce (Citrus sinensis) y de
plantas jóvenes de Arabidopsis thaliana para la extracción de ADN, usando un
método basado en bromuro de hexadeciltrimelamonio (CTAB). El aislamiento de
los promotores CsSUSI-1 y AtSUC se realizó mediante la reacción en cadena de
la polimerasa (PCR). Los fragmentos fueron purificados y clonados en plásmidos
para después ser introducidos en células de Escherichia coli para ser subclonados
en plásmidos binarios conteniendo el gen reportero gusA e introducirlos en
Agrobacterium tumefaciens.
CONCLUSIONES
Se diseñaron los iniciadores específicos para cada uno de los promotores y se
logró amplificar las regiones de los promotores CsSUSI-1 y AtSUC, los cuales
están siendo clonados en plásmidos para su posterior manipulación y clonación en
plásmidos binarios.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del
Pacífico
Agosto 2014