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Huayllu-Bios. Nº 5. Noviembre 2011 Estudio de la Estabilidad de la Actividad Lacasa en
el Hongo Ligninolítico Trametes Villosa .
Perez, G.; Papinutti, L. & Cinto, E. ( 1 )
D B B E - F CE y N ( UB A ); PRO P L A ME - PR H I D E B ( CO N I CE T )
1 : ic in to@ bg. fc en .ub a. ar
La capacidad de depolimerización de la lignina de hongos
causantes de pudrición blanca se debe a un grupo de enzimas
extracelulares,
principalmente
Mn-peroxidasa,
lignin-peroxidasa
y
lacasa, pudiendo degradar diversos contaminantes. El objetivo del
presente trabajo fue estudiar la estabilidad de la actividad lacasa a
distintos pH y temperaturas. Se utilizó el sobrenadante de cultivo
(con 2mM de CuSO 4 como inductor) como fuente de enzimas. La
actividad lacasa se midió utilizando DMP 5 mM o ABTS 0,5 mM como
sustratos en buffer acetato a pH 3,6. El efecto del pH en la actividad
lacasa se estudió en buffer citrato-fosfato pH 3,0–7,0 y buffer Tris pH
7,2–9,0. La estabilidad de la enzima se estudió midiendo la actividad
remanente a distintos tiempos de incubación a 40°C y 65°C. La
actividad óptima fue a pH 5 con DMP y pH 4 con ABTS. Con DMP se
observó que a partir de pH 6 la actividad disminuye, para luego
aumentar hasta un 20% a pH 9. Con ABTS la actividad decrece a
partir
de
pH
5
hasta
valores
indetectables.
Esto
se
debe,
probablemente, a que hay más de una forma de lacasa con diferente
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales – Universidad Nacional de Catamarca.
—Página 45— Huayllu-Bios. Nº 5. Noviembre 2011 afinidad
por
sustrato.
La
actividad
mostró
ser
muy
estable
conservando casi el 80% aún después de 24 h de incubación a 40°C
a pH 6 y 7. En el ensayo a 65°C el 50 % se obtuvo luego de 50
minutos de incubación en los mismos pH. Los estudios demostraron
que la actividad lacasa de T. villosa es muy estable, lo cual es
interesante para futuras aplicaciones biotecnológicas.
Palabras clave: Estabilidad; Lacasa; Trametes villosa.
Facultad de Ciencias Exactas y Naturales – Universidad Nacional de Catamarca.
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