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Fundamentos de control microbiano Introducción • Los microorganismos son capaces de adaptarse a una gran variedad de factores ambientales. • ajuste complejo en su bioquímica y genética • permiten largos periódos de supervivencia y crecimiento. • Para muchos microorganismos factores ambientales afectan: • funciones de las enzimas metabólicas (controlan crecimiento microbiano). • Crecimiento en un ambiente versus tolerancia al ambiente (supervivencia sin crecimiento). Fases de la curva de crecimiento • LAG • LOG • Estacionaria • Muerte Fase LAG (latencia) • Imediantamente luego de inocular en el medio fresco. • Población no cambia por un periódo temporero. • Adaptación al medio. • Biosíntesis de componentes celulares, aumento en masa. • No se están multiplicando. Fase LOG • Crecimiento exponencial de la población. • Se duplica hasta llegar a un número máximo de bacterias. • Patrón de crecimiento por fisión binaria. Fase Estacionaria • El número de bacterias dividiéndose es proporcional al número debacterias muriendo. • No hay aumento en la población. • Se agotan nutrientes. • Se acumulan desechos metabólicos. Fase de Muerte • Aumento de desechos metabólicos. • Rápida disminución de la población. Factores que afectan la supervivencia § Factores físicos § Temperatura § Rango óptimo es variable para cada organismo § Psicrófilos, mesófilos, termófilos § Requerimiento de Gases § Oxígeno y CO2 § Aerobios, Anaerobio, facultativos y estrictos § Presion Osmótica § Mayoría existen en condiciones isotónicas o hipotónicas § Staphylococcus aureus puede crecer en NaCl en concentraciones de 0.1% hasta 20% § pH § Acidófilos y alcalinófilos Temperatura • Afecta a los microorganismos • Reacciones catalizadas por enzimas; altas temperaturas: • Desnaturalización de enzimas y proteínas • Deterioro de membranas • Doble capa se funde y desintegra. Oxígeno • Aerobios obligados: Crecen sólo en presencia de oxígeno (Pseudomonas, Bacillus, Mycobacterium tuberculosis). • Anaerobio facultativo: Crecen en presencia como en ausencia de oxígeno, pero mejor en presencia de este (Fam. Enterobacteriaceae). • Anaerobio obligado: Crecen sólo en ausencia de oxígeno (Clostridium sporogenes). • Anaerobio aerotolerante: No utiliza oxígeno, pero la presencia de este no le es dañino (Lactobacillus y Streptococcus). • Microaerófilo: Requiere cantidades limitadas de oxígeno para su crecimiento (Helicobacter pylori). Presión Osmótica • Fuerza que se desarrolla cuando dos soluciones de diferentes concentraciones de solutos son separadas por una membrana permeable únicamente al solvente (el cual mayormente es agua). ¿Qué es pH? • Medida de la actividad de iones de H + o H3O + • El pH afecta la actividad enzimática de las bacterias, especialmente aquellas envueltas en la biosíntesis y el crecimiento. • Cada bacteria posee un rango definido de pH y un pH óptimo de crecimiento. pH • Basados en sus requerimientos de pH, los microorganismos son clasificados en: a. Acidófilos: crecen en un pH entre 0.0 y 5.5 b. Neutrófilos: crecen en un pH entre 5.5 a 8.0 c. Alcalófilos: crecen en un pH entre 8.5 y 11.5 • • Mayoría de bacterias y protozoarios son neutrófilos Hongos, levaduras y algas crecen en ambientes ligeramente ácidos (pH entre 4 y 6) Bacterias y sus rangos de pH Radiación UV Mecanismos de reparación • Cuando los dímeros de pirimidina se exponen a la luz visible, la enzima pirimidina dimerasa es activada y rompe el dímero = fotoreactivación. • Existe otro mecanismo de reparación independiente de luz y es conocido como reparación por oscuridad. Factores que afectan la supervivencia • Factores Nutricionales • Fuente de Carbono • Nutrientes • Nitrógeno • Fósforo • Minerales y Vitaminas Estrategias de Supervivencia • Asociaciones microbianas • Simbióticas • Mutualismo, Comensalismo y Parasitismo • No simbióticas • Sinergismo (miembros cooperan y comparten nutrientes) • Antagonismo (Algunos inhiben o destruyen a otros) • Desarrollo de estructuras de supervivencia • Esporas- Bacillus spp. • Desarrollo de mecanismos de protección • Agentes antimicrobianos Desarrollo de “biofilms” • “Biofilms”: comunidades complejas • microorganismos y polímeros extracelulares • colonizar, fijarse y desarrollarse sobre superficies hidrofóbicas o hidrofílicas, bióticas o abióticas. • Se pueden encontrar en todos los medios donde existan bacterias: • • • • medio natural clínico industrial puesto que solo necesitan un entorno hidratado y una mínima presencia de nutrientes para desarrollarse. Biofilm de S. aureus en un catéter. Desarrollo de “bioAilms” Productores más comunes de “biofilms” • Bacillus spp. (contaminantes habituales del medioambiente). • Enterobacteriaceae (contaminantes fecales). • Pseudomonas (contaminantes habituales del agua y de alimentos proteícos, especialmente los de origen animal). • Staphylococcus (contaminantes de la piel de animales y humanos).