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RESISTENCIA DE LOS
MICROORGANISMOS
A LOS BIOCIDAS
bioseguridad
Rafael Arlegui González
Jefe de producto de ganadería Hypred
En más ocasiones de las que sería deseable,
nos podemos encontrar que las desinfecciones
llevadas a cabo sobre una nave durante el vacío
sanitario no han sido lo eficaces que debieran.
Apareciendo microorganismos al monitorizar
dicha desinfección, ya sean bacterias como
Salmonella o cualquier otro tipo de agente,
con el consiguiente riesgo de contaminación
cruzada con el próximo lote de animales.
Cuando algo así sucede, es imperativo revisar
el protocolo de limpieza y desinfección y
descubrir dónde puede radicar el error que ha
posibilitado dicha persistencia.
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N
i que decir tiene que, en el caso de Salmonella
por ejemplo, también se hace inexcusable el
repetir el proceso de limpieza y desinfección
LA EFICACIA DEL DESINFECTANTE
La eficacia de un determinado desinfectante
sobre un microorganismo en concreto depende,
hasta que el resultado sea negativo.
Un punto muy importante, además de una
concienzuda limpieza previa con detergente alcalino,
preferiblemente aplicado en espuma, es la elección
del desinfectante a emplear tras dicha limpieza
previa y su modo de aplicación.
circunstancias ambientales al margen, de tres
factores principales que son la sensibilidad o
resistencia del microorganismo a ese biocida, la
concentración del mismo y el tiempo de contacto
entre ambos.
Visto esto, nos encontramos que podemos influir con
facilidad sobre los dos últimos factores que son la
concentración de biocida y el tiempo de contacto.
EL DESINFECTANTE A EMPLEAR
En lo que respecta sensibilidad, o más
A la hora de elegir el desinfectante a emplear, se
concretamente a la resistencia de los
ambientales:
microorganismos a los biocidas, cabe señalar varios
puntos importantes.
bioseguridad
han de tener en cuenta diversas circunstancias
La resistencia a los desinfectantes puede ser de dos
Condiciones de trabajo
tipos, intrínseca o adquirida.
Material sobre el que trabajar; cemento, metales,
Esquema 1. Representación gráfica de
los niveles de resistencia natural de los
microorganismos a los desinfectantes
plásticos, etc.
La temperatura de aplicación
La dureza del agua
SUSCEPTIBILIDAD
La presencia de materia orgánica dependiente
de una buena limpieza previa
Todos estos factores y otros muchos van a
condicionar posteriormente que el grado de eficacia
conseguido en la desinfección sea el adecuado.
DESINFECTANTE
Sensibilidad o
resistencia del
microorganismo
Concentración
de biocida
Tiempo de
contacto
Mycoplasma
Virus con envuelta lipídica
Bacterias gram-positivo
Bacterias gram-negativo
Pseudomonas
Virus sin envoltura
Esporas Fúngicas
Parvovirus
Bacterias ácido-alcohol
Esporas Bacterianas
OoquIstes
Priones
RESISTENCIA
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TIPOS DE RESISTENCIA DE LOS
MICROORGANISMOS A DESINFECTANTES
Resistencia intrínseca o natural
Es aquella que poseen los microorganismos por
sí mismos, es decir, debido a sus características
propias.
bioseguridad
Así, por ejemplo, se observa que los hay
capaces de generar formas de resistencia
como las bacterias esporuladas o los
ooquistes de los coccidios, bacterias gram
positivas y gram negativas poseen diferente
sensibilidad a los desinfectantes debido a
sus diferencias estructurales en lo que a la
pared se refiere, igualmente encontramos
virus con envoltura lipídica o sin ella con
resistencia también variable en función de
esta característica.
Otros mecanismos de resistencia son la
producción de enzimas inactivadoras, que
destruyen la molécula del biocida impidiendo
su acción, la existencia de bombas de eflujo
que expulsan el biocida fuera de la célula
para que no pueda alcanzar la concentración
adecuada en el citoplasma bacteriano, etc.
RESISTENCIA
NATURAL
Enzimas inactivadoras
Bombas de flujo
Diferencias estructurales
en la pared celular
ADQUIRIDA
Cambios genéticos
Biofilm
Resistencia adquirida
Es aquella que desarrollan los microorganismos
Esquema 2. Desarrollo del los tipos
de resistencia de los microorganismos
y que inicialmente no poseían de manera
intrínseca.
Este tipo de resistencia adquirida puede ser
debida a cambios genéticos en virtud de los cuales
desarrollan mecanismos de resistencia.
Por otro lado, la resistencia adquirida también se
puede deber a la protección de los microorganismos
gracias a la generación del biofilm que los protege
del ataque de los biocidas.
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RESISTENCIA ADQUIRIDA DEBIDA
A CAMBIOS GENÉTICOS
En el primer caso de resistencia adquirida, los
Pero no se puede dejar de indicar que, si bien
cambios genéticos se pueden producir por
estos mecanismos descritos en la Figura 1 de
mutaciones espontáneas.
intercambio genético se dan en el ambiente, no
Pero, lo más común es el intercambio de material
genético que contiene genes de resistencia entre
diferentes microorganismos.
son tan habituales como a veces se supone, es
más, no son comunes. Y lo raro es raro y ocurre
con poca frecuencia.
Estos intercambios se pueden producir por varios
mecanismos (Figura 1):
Transformación
Se trata de un proceso mediante el que una
célula incorpora material genético exógeno
que se encuentra disperso en el medio en
bioseguridad
que habita.
Conjugación
Una célula transfiere a otra material genético
mediante unas pequeñas porciones del
mismo denominadas plásmidos.
Transducción
La transmisión del material genético la llevan
a cabo virus como son los fagos no líticos
que infectan bacterias.
Figura 1. Representación visual de los tres mecanismos de intercambio de material genético que pueden dar lugar a cambios genéticos
Los cambios genéticos se pueden producir por mutaciones
espontáneas o intercambio de material genético, pero ocurre
con poca frecuencia
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RESISTENCIA ADQUIRIDA DEBIDA
A PRESENCIA DE BIOFILM
Con mucho, la causa más habitual de aparición
de resistencia, y fallos en la desinfección, es
Un biofilm es una población de células que crecen
adheridas a una superficie envueltas en una pared
de exopolisacáridos que ellos mismos generan y
que las protege del ataque de muchos antibióticos y
desinfectantes.
la persistencia de restos de materia orgánica
y el desarrollo de biofilm por parte de los
microorganismos y la protección que éste les
confiere.
Sirva de ejemplo el que alrededor del 50% de las cepas
de Salmonella aisladas a nivel de campo son capaces
de producir biofilm y, por tanto, pueden resultar ser
mil veces más resistentes a los desinfectantes (Marin
et Al., 2009).
Con todo esto, es lógico deducir que la mejor forma
de prevenir la aparición de resistencias es mediante la
lucha contra la formación de biofilm y la persistencia
bioseguridad
de restos de materia orgánica.
Esto se puede conseguir mediante una buena
limpieza previa, empleando detergente en espuma,
Imagen 1. Ejemplo de biofilm visto
desde el microscopio
que elimine toda la materia orgánica para que no
pueda servir después de sustento y sustrato para la
formación del biofilm.
Pues, por mucho que se quiera, el agua a presión por sí
sola no es capaz de eliminar la última capa de materia
orgánica adherida a las superficies. Más si estas son
rugosas o porosas como suele suceder en las granjas, de
lo que el cemento es un ejemplo claro.
Otra de las razones por las que es importante eliminar
Imagen 2. Tubería invadida por
materia orgánica
el biofilm y los restos de materia orgánica, además de
evitar la protección que brinda a los microorganismos,
es que, aun considerando que los mecanismos de
intercambio genético antes comentados son poco
frecuentes, siempre hay más posibilidad de que estos
La mejor forma de prevenir
la aparición de resistencias
es mediante la lucha contra
el biofilm y la materia
orgánica
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se produzcan en el interior de la matriz del biofilm.
En ella, microorganismos de todo tipo, hongos, virus,
bacterias, etc., se encuentran en íntimo contacto
favoreciéndose los fenómenos de transformación,
conjugación y transducción. (Figura 1)
A LT O
CRITERIOS DE EFICACIA DEL
DESINFECTANTE
Una vez vistos los mecanismos por los que
los microorganismos pueden ser capaces de
MEDIO
eludir la acción de los biocidas, se ha de elegir
el desinfectante más adecuado para cada caso
en base a criterios de eficacia.
Sin olvidar, claro está, los criterios legales,
BAJO
según los que todos los desinfectantes han
de contar con su correspondiente registro y
Centrándonos en los criterios de eficacia, es
evidente que cuanto mayor sea el espectro de
acción del desinfectante mucho mejor.
Se trata de asegurarnos el mayor grado de
destrucción de microrganismos de todo tipo
posible.
SINERGIA
Figura 2. Clasificación de los
desinfectantes atendiendo a su
capacidad biocida y espectro de acción
Los principios activos de los desinfectantes se
clasifican en alto medio y bajo. Realizando
combinaciones entre ellos podemos obtener
sinergias aumentando la eficacia y disminuyendo
la dosis.
uso de cara al aplicador y el medioambiente.
bioseguridad
autorización de uso, ni los de seguridad de
Atendiendo a su capacidad biocida y espectro
de acción, los principios activos de los
desinfectantes se clasifican en alto, medio
y bajo nivel. Esto puede aprovecharse para
hacer combinaciones de ellos y conseguir
Pruebas de eficacia
sinergias, dotando al producto elaborado de
Para evaluar la eficacia de los distintos
más eficacia con una menor dosis; haciéndolo
productos elaborados a partir de esos principios
además más seguro para el aplicador.
activos se siguen las pruebas de eficacia, que
son ensayos estandarizados y reconocidos
internacionalmente y que determinan la
actividad de los desinfectantes frente a
microorganismos concretos, a concentraciones
conocidas y tiempos de contacto determinados.
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