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Quito - Ecuador NORMA TÉCNICA ECUATORIANA NTE INEN 55:2012 SAL COMÚN. EXAMEN DE BACTERIAS HALÓFILAS Primera edición SALT. TEST OF HALOPHILIC BACTERIA First edition DESCRIPTORES: . AL 05.01-305 CDU: 664.41 CIIU: ICS: NTE INEN Norma Técnica Ecuatoriana SAL COMÚN. EXAMEN DE BACTERIAS HALÓFILAS. NTE INEN 55:2012 1. OBJETO 1.1 Esta norma tiene por objeto establecer un método para detectar la presencia de bacterias halófilas rojas en la sal común. 2. TERMINOLOGÍA 2.1 Bacterias halófilas. Son bacterias que pueden desarrollarse en presencia de elevadas concentraciones de sal. 3. DISPOSICIONES GENERALES 3.1 Todo el material de vidrio empleado en este ensayo deberá esterilizarse previamente mediante calentamiento en estufa a 170° C durante 1 hora. 4. FUNDAMENTO 4.1 El método se basa en realizar un cultivo sobre un medio sólido selectivo y observar el desarrollo de colonias rojas propias de las bacterias halófilas. 5. INSTRUMENTAL 5.1 Autoclave. 5.2 Estufa de cultivo, con regulador de temperatura, ajustada a 37° ± 1° C. 5.3 Cajas de Petri. 3 5 .4 Matraces Erlenmeyer de 1000 cm . 6. REACTIVOS 6.1 Medio de cultivo (Dussault y Lachance). Mezclar, en un recipiente adecuado, 5 g de sulfato de magnesio, 1 g de nitrato de magnesio, 0,025 g de cloruro férrico, 5 g de peptona, 10 g de glicerina, 3 200 g de cloruro de sodio y 1000 cm de agua destilada. Calentar un poco la mezcla para disolver los ingredientes, ajustar el pH de la solución a 7,5 usando un medidor potenciométrico de pH, esterilizarla en autoclave a 121° C durante 15 min y luego dividirla en dos porciones iguales. A la una porción, A, añadir un 10 por ciento de leche descremada y a la otra, B, un 3 por ciento de agar. Inmediatamente antes de usar el medio, fundir la porción B, calentar la porción A (que debe estar bien mezclada para 3 asegurar una suspensión uniforme) y, luego de mezclarlas íntimamente, verter porciones de 15 cm a 3 20 cm en cada caja de Petri y dejarlas solidificar a temperatura ambiente. (Continúa) NTE INEN 7. PREPARACIÓN DE LA MUESTRA 7.1 Mezclar íntimamente la muestra y guardarla en un frasco estéril herméticamente cerrado hasta el momento del análisis. 8. PROCEDIMIENTO 8.1 Espolvorear 1 g de la muestra para ensayo (ver 7.1) sobre la superficie del medio de cultivo en una caja de Petri. 8.2 Incubar la caja de Petri en la estufa a 37° ± 1° C durante 14 días. 8.3 Examinar la caja de Petri inmediatamente después de la incubación. La presencia de colonias rojas indica que la muestra ensayada contenía bacterias halófilas. 9. INFORME DE RESULTADOS 9.1 Si se han formado colonias rojas (ver 8.3) reportar el ensayo como positivo, caso contrario como negativo. 9.2 En el informe de resultados debe indicarse el método usado y el resultado obtenido. Debe mencionarse además cualquier condición no especificada en esta norma, así como cualquier circunstancia que pueda haber influido sobre el resultado. 9.3 Deben incluirse todos los detalles necesarios para la completa identificación de la muestra. NTE INEN APÉNDICE Z Z.1 DOCUMENTOS NORMATIVOS A CONSULTAR Esta norma no requiere de otras para su aplicación Z.2 NORMAS PUBLICADAS SOBRE EL TEMA INEN 49 Sal común. Determinación de la humedad. INEN 50 Sal común. Determinación del residuo insoluble y de la sustancia de deshidratante. INEN 51 Sal común. Determinación del cloruro de sodio. INEN 54 Sal yodada. Determinación del yodo. INEN 55 Sal común. Examen de bacterias halófilas. INEN 56 Sal común. Muestreo. INEN 57 Sal de mesa. Requisitos. Z.3 BASES DE ESTUDIO Norma Sudafricana S.A.B.S. 638-1961. Standard Specification for salt. South African Bureau of Standards, Pretoria, 1961. NTE INEN INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA Documento: NTE INEN 55:2012 TÍTULO: SAL COMÚN. EXAMEN DE BACTERIAS HALÓFILAS ORIGINAL: Fecha de iniciación del estudio: Código: AL 05.01-305 REVISIÓN: La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficialización con el Carácter de Obligatoria por Resolución No. publicado en el Registro Oficial No. Fecha de iniciación del estudio: Fechas de consulta pública: No se realizó Subcomité Técnico de: Fecha de iniciación: Integrantes del Subcomité: Fecha de aprobación: NOMBRES: INSTITUCIÓN REPRESENTADA: Mediante compromiso presidencial N° 16364, el Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN, en vista de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo normativo en base al estado del arte y con el objetivo de atender a los sectores priorizados así como a todos los sectores productivos del país. Para la revisión de esta Norma Técnica se ha considerado el nivel jerárquico de la normalización, habiendo el INEN realizado un análisis que ha determinado su conveniente aplicación en el país. La Norma en referencia ha sido sometida a consulta pública por un período de 30 días y por ser considerada EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico. Otros trámites: Esta NTE INEN 55:2012 Sal Común. Examen de Bacterias Halófilas, reemplaza a la NTE INEN 55:1973 Sal Común. Examen de Bacterias Halófilas. La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma Oficializada como: Por Resolución No. Registro Oficial No. Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre Casilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815 Dirección General: E-Mail:direccion@inen.gob.ec Área Técnica de Normalización: E-Mail:normalizacion@inen.gob.ec Área Técnica de Certificación: E-Mail:certificacion@inen.gob.ec Área Técnica de Verificación: E-Mail:verificacion@inen.gob.ec Área Técnica de Servicios Tecnológicos: E-Mail:inenlaboratorios@inen.gob.ec Regional Guayas: E-Mail:inenguayas@inen.gob.ec Regional Azuay: E-Mail:inencuenca@inen.gob.ec Regional Chimborazo: E-Mail:inenriobamba@inen.gob.ec URL:www.inen.gob.ec