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Símbolos empleados
Core
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TM
HCV
0459
Test rápido para la detección de anticuerpos contra el Virus de la Hepatitis C (HCV) en suero humano
Temperatura de conservación
INTRODUCClON
CoreTM HCV es una prueba rápida de inmunoensayo sandwich de dos sitios, in vitro, cualitativa
diseñada para la detección de anticuerpos contra el Virus de la Hepatitis C (HCV) en suero
humano. Para uso profesional.
Fecha de caducidad
Número de lote
Número de referencia
RESUMEN
El virus de la Hepatitis C (HCV) es un virus RNA de cadena simple de la familia Flaviviridae. El
virus HCV es el agente causante de la gran mayoría de hepatitis no A no B. Los anticuerpos contra
los antígenos de la hepatitis C se encuentran presentes en el suero de los individuos infectados por
el virus HCV. La detección de los anticuerpos indica que ha habido exposición al virus de la
Hepatitis C.
Producto de diagnóstico in vitro
CARD
PIPETTE
BUF
Placa
Gotero desechable
Tampón
PRINCIPIO
Core HCV emplea el principio de inmunocromatografía de flujo lateral, un inmunoensayo de
sándwich de dos sitios y doble antígeno en membrana. A medida que la muestra migra a lo largo
de la placa, el conjugado coloreado oro coloidal – antígeno HCV recombinante específico se une a
los anticuerpos de HCV presentes en la muestra. Este complejo migra por la membrana hacia la
zona de test ‘T’ en donde queda inmovilizado por los antígenos HCV específicos recombinantes
que recubren la membrana en dicha zona, formándose una banda coloreada si el resultado de la
prueba es positivo. La ausencia de una banda coloreada en la zona de test ‘T’ indica que el
resultado es negativo. El conjugado que no ha reaccionado y el complejo no ligado, si están
presentes, continúan migrando por la membrana junto con el conjugado oro coloidal – IgG de
conejo hasta quedar inmovilizados por los anticuerpos de cabra anti-conejo que recubren la
membrana en la zona de control ‘C’, formando una banda coloreada. Esta banda de control sirve
para validar los reactivos y el procedimiento de la prueba.
Fabricado por
Fecha de fabricación
Contiene <n> tests
REACTIVOS Y MATERIAL SUMINISTRADO
Componentes del kit
1. La prueba Core HCV está compuesta por conjugado oro coloidal – antígeno HCV
recombinante específico dispensado conjuntamente con conjugado oro coloidal – IgG de
conejo, pre-dispensado con antígeno HCV específico recombinante en la región ‘T’ y
antisuero anti-conejo predispensado en la región ‘C’. Gotero de plástico. Desecante.
2. Tampón de dilución para la muestra: tampón fosfato 0.15 M (pH 8.0), Tween 20 (1.5%),
azida sódica (0.1%).
3. Hoja de instrucciones
Aspect Court, 4 Temple Row
Birmingham B2 5HG
UNITED KINGDOM
Versión Es1 – 05/2007
Cat.No./ Componente
Placa
Tampón de dilución
para la muestra
0459
HCV-130022
25
1 vial de 10 ml
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
Las placas, que están convenientemente empaquetadas en sobres de aluminio, y el tampón de
dilución de muestra pueden almacenarse a 4°C - 30°C hasta la fecha de caducidad indicada en el
sobre protector de la placa y en el vial del tampón. Una vez abierto, el tampón es estable hasta la
fecha de caducidad, si se conserva a 4°C - 30°C. No congelar las placas ni el tampón.
NOTAS
1.
Este producto es para uso diagnóstico in vitro. No es para uso medicinal.
2.
No utilizar si el producto ha caducado.
3.
Leer atentamente las instrucciones antes de realizar la prueba.
4.
Manipular todas las muestras como potencialmente infecciosas.
5.
Deben seguirse las normas de seguridad biológica para la manipulación y eliminación de
6.
7.
material potencialmente infeccioso.
El tampón de dilución de la muestra contiene azida sódica (0.1%). Debe evitarse el contacto
del reactivo con la piel. La azida sódica puede reaccionar con el plomo y el cobre de las
tuberías, formando óxidos metálicos explosivos. Puede eliminarse por el desagüe
diluyéndolo en un volumen abundante de agua para evitar la posibilidad de formación de
azidas en las tuberías.
Si el sobre protector está dañado, debe descartarse la placa correspondiente y tomar una
nueva para realizar la prueba.
Total
2.
RECOGIDA Y PREPARACION DE LA MUESTRA
No es necesaria una preparación especial del paciente para la toma de muestra, que debe
realizarse mediante los procedimientos estándares. A pesar de que es preferible realizar la prueba
con suero fresco, las muestras pueden almacenarse a 2° C - 8° C hasta 24 horas.
No utilizar muestra turbias, lipémicas o hemolizadas.
Precauciones respecto a las regulaciones para pruebas de HCV:
1.
El producto es exclusivamente para uso profesional.
2.
Una infección reciente puede dar resultado negativo.
3.
La prueba debe realizarse por un facultativo o bajo la supervisión de éste o por un técnico a
quien un facultativo le haya requerido la realización de la prueba.
PROCEDIMIENTO DE LA PRUEBA E INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
1.
Atemperar los componentes a temperatura ambiente (20°C-28°C) antes de realizar la
prueba.
2.
Abrir el estuche y extraer la placa. Una vez abierto el estuche, la prueba debe realizarse de
inmediato.
3.
Identificar la placa con el nombre del paciente.
4.
Añadir dos gotas de suero (50 µl) mediante el gotero suministrado, en el pocillo marcado con
la letra "A". Puede emplearse también una micropipeta.
5.
Añadir 3 gotas de tampón de dilución en el pocillo marcado con la letra "B", mediante el
gotero del vial.
6.
Leer el resultado tras 15 minutos
NEGATIVO:
7.
8.
9.
POSITIVO:
Negativo: sólo aparece una banda coloreada en la zona de control ‘C’.
Positivo: además de la banda de control, aparece una banda coloreada en la zona de test ‘T’.
La prueba no es válida si no aparece ni la banda de test ni la banda de control. Repetir la
prueba con una nueva placa.
Dependiendo de la concentración de anticuerpos de HCV presentes en la muestra, el
resultado puede aparecer al cabo de 2 minutos. Los resultados negativos sólo se confirman
tras haber transcurrido 15 minutos del inicio de la prueba.
En caso de resultado dudoso a los 15 minutos, la placa puede leerse a los 30 minutos para
obtener un fondo más claro. No leer pasados los 30 minutos.
IMPORTANTE:
Para controlar la óptima realización de la prueba, es recomendable procesar muestras de control
interno.
1.
Especificidad diagnóstica:
Se han analizado un total de 1003 muestras mediante la prueba Core HCV en el Centro
Europeo de Transfusión de Sangre. Se encontraron 2 muestras que repetidamente dieron
resultado positivo. La especificidad diagnóstica determinada fue de 99.80%.
Centro
Número de muestras analizadas
A
1003
3.
Core HCV
Negativo
1001
Positivo
2
1001 (99.80%)
2
Sensibilidad diagnóstica:
Se analizaron 423 muestras positivas de HCV (genotipos de 1 a 5) mediante la prueba Core
HCV, encontrándose todas ellas positivas
La sensibilidad diagnóstica determinada fue de 100%.
HCV
Número de muestras
analizadas
423
Core HCV
negativo
0
positivo
423
Posibles interferencias:
La tabla siguiente muestra los resultados de la prueba Core HCV al analizar muestras que
contenían posibles sustancias interferentes:
Tipo de muestra
Número de muestras
analizadas
Core HCV
negativo
positivo
212
0
212
200
0
200
Infecciones relacionadas (*)
107
0
107
(*) Los resultados fueron negativos para muestra que contenían HBs Ag (20), anti-HIV (6), antiHTLV (14), anti-HSV (12), anti-VZV (9) , anti-EBV (4), anti-HAV –IgM(15), anti CMV (20), RF (7).
Muestra clínicas
Mujeres embarazadas
4.
Panales de seroconversión
La sensibilidad se evaluó en 30 paneles de seroconversión comerciales (Boston Biomedica
Inc.). La prueba Core HCV era menos sensible que algunas pruebas de ELISA.
5.
Precisión
La repetibilidad y reproducibilidad (inter-ensayo e inter-lote) se evaluó en un número de
muestras positivas y negativas de HCV. No se observaron variaciones en los resultados de
las distintas pruebas.
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1.
La prueba detecta la presencia de anticuerpos contra HCV en la muestra y no debe utilizarse
como el único criterio para diagnosticar la infección por HCV.
2.
Al igual que en el resto de pruebas diagnósticas, el resultado debe correlacionar con otras
pruebas clínicas. Si el resultado es negativo pero se sospecha de la existencia de la
infección, debe realizarse un seguimiento del paciente mediante otros métodos clínicos.
3.
Un resultado negativo no excluye la posibilidad de exposición al virus o de infección.
4.
Si se obtiene un resultado positivo, aunque sea débil, debe confirmarse mediante pruebas
más sensibles, como RIBA.
BIBLIOGRAFÍA
1.
2.
CARACTERISTICAS DEL TEST
1003
3.
4.
5.
Restricted Isotypic Antibody reactivity to Hepatitis C Virus Synthetic Peptides in Immunocompromised Patients,
Marisol Deves Arlette De Saez, Graciela Leon, Firelei Sirit, Clarisa Coson, Henry Bermudez, Ferdinando Liprandi,
Oscar Noya, Flor H.Pujol, Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology, Vol.6 No.2, 279-281, May 1999.
Immunodiagnosis of Viral Hepatitides A to E and Non-A to -E, Gang Yang, Girish N.Vyas, Clinical and Diagnostic
Laboratory Immunology, Vol.3 No.3, 247-256, May 1996.
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223-235, April 2000.
Perspectives for the Treatment of Infections with Flaviviridae, Pieter Leyssen, Eric De Clerq, John Neyts, Clinical
Micro Reviews,Vol.13 No.1, 67-82, Jan.2000.
Principle and Practice of Infectious Diseases, Mandell, Burnett and Dolin, 5th Edn., Vol. 1 Part-II, 1307-1331, 2000,
Churchill Livingstone Publications.