Download diagnóstico precoz de gestaciones múltiples por

Universidad Nacional de Córdoba
Facultad de Ciencias Agropecuarias. Escuela para Graduados
Instituto de Reproducción Animal Córdoba (IRAC)
Diagnóstico Precoz de Gestaciones
Múltiples por Ultrasonografía en
Bovinos
Méd. Vet. Blas Matías Palma
Vet. Matías Vattovez
Trabajo Final
Córdoba, 2011
http://www.texaslonghorn.com/pr/index.cfm?con=twins
Ecografía o Ultrasonido
Herramienta de diagnóstico para evaluar el
sistema reproductivo femenino, de una manera
no invasiva
Utilidades
Presencia o ausencia de gestación y estado de la
viabilidad fetal en forma precoz después del servicio
Identificación temprana
gestaciones múltiples
de
los
animales
con
Determinación del sexo fetal
Examen detallado de los ovarios y de sus estructuras
Técnicas de intervención
diagnósticos o terapéuticos
guiadas
para
fines
Gestaciones Múltiples
Producción de leche
Asociadas a enfermedades del periparto (aborto,
distocia, mortalidad neonatal, retención de placenta,
metritis, piómetra, cetosis, dislocación abomasal)
Freemartinismo
Reducción del pico de producción de leche y del peso
de las crías
Deterioro del rendimiento reproductivo
reproductivo-- productivo
Gestaciones Múltiples
Producción de carne
Oportunidad para aumentar tanto
eficiencia reproductiva como económica
la
Productores se oponen a estos nacimientos
debido al número de inconvenientes asociados
Objetivo del Trabajo
Profundizar en el estudio de las gestaciones
múltiples, destacando la necesidad y utilidad
de la Ecografía, analizando los factores
predisponentes y los mecanismos que dan
lugar a este suceso
http://retirenicaragua.wordpress.com/author/retirenicaragua
Gentileza del Dr. Stroud, citado en Gnemmi 2008
Materiales y Métodos
Artículos
publicados
en
diversas
revistas
especializadas, de divulgación, libros, disertaciones,
congresos,
publicaciones
en
Internet
y
comunicaciones
personales
de
profesionales
especialistas
Período 1952
1952–– 2011
Recopilación, selección y lectura de la bibliografía
citada;; análisis, interpretación, evaluación y síntesis
citada
de la información, intercalada con opiniones y
experiencias propias
Incidencia
Leche
Variación
Autor
4,54 % (1959) a 6,86 % (1997) Day et al., 1997, citado en
DesCôteaux et al., 2010
3,4 % (1996) a 4,8 % (2004)
Silva del Río et al., 2007
4,6 % (1996) a 10,4 % (2008)
Gnemmi, 2011
Hasta 1515- 16 % (Gnemmi, 2006, 2011)
http://www.fayerwayer.com/2011/01/chile-nacio-joya-verde-una-ternera-clonada/
Incidencia
Carne
Incidencia
Autor
0,5 % en razas británicas y Echternkamp y Gregory,
de 1 a 2 % en razas 2002
continentales (1981)
< 5%
Rutledge, 1975, Morris y
Day, 1986, citados en
Kirkpatrick, 2002
0,5%
Gilmore et al., 1952;
Komisarek y Dorynek,
2002,
citados
en
Gnemmi, 2006
Gestación Triple
0,01%
01% de incidencia (Bottarelli, 1989
1989,, citado en
Gnemmi, 2006)
2006)
http://udaradecharon.hubpages.com/hub/animalcloning
Incidencia
Aumento con los sucesivos partos;
partos; muy poco frecuente en
vaquillonas y vacas primíparas
Reincidencias frecuentes, alcanzando el 22 % (Al Dahash,
1977 y Berra et al
al.., 1984
1984,, citados en Bottarelli 1989
1989,,
citados en Gnemmi, 2006
2006))
Algunos toros tienen una frecuencia extremadamente
bajas, en comparación con otros:
otros: heredabilidad del 0.70.8 % en la primer gestación, pero trepa al 2,8 % en la
segunda
Mayor en primavera y más baja en el otoño (Johanson et
al
al.., 2001,
2001, citado en Gnemmi, 2006)
2006)
Etiología
La alta producción de leche se vería correlacionada
con la tasa de ovulaciones dobles (Kinsel et al
al.., 1998;
1998;
Wiltbank et al
al.., 2000,
2000, citado en Gnemmi, 2006),
2006),
aumentando la incidencia de las mismas (Pursley,
2006)) y por lo tanto, de las gestaciones gemelares
2006
Aumento del metabolismo esteroide por aumento en
el tránsito de sangre desde el tracto digestivo al
hígado (el hígado es el principal sitio del
metabolismo esteroide) (Fricke y Wiltbank, 1999
1999;;
Wiltbank et al
al.., 2000,
2000, citado en Gnemmi, 2006)
2006)
Etiología
Maduración simultánea de dos o tres folículos
dominantes (Echternkamp et al
al.., 2004,
2004, citado en Gnemmi,
2006))
2006
Mayor concentración de IGF
IGF-- I, aumento del
reclutamiento de los folículos, o la reducción de su
atresia
Menor producción de factores que inhiben el crecimiento
folicular por parte de un folículo dominante:
dominante: el
crecimiento de los folículos subordinados continúa hasta
el desarrollo de más de un folículo de De Graaf
Etiología
Riesgo de mellizos y de doble ovulación aumentó con los días en
leche (DIM) y fue mayor para las vacas diagnosticadas con
quistes en los ovarios y que carecen de un CL al inicio de un
protocolo Ovsynch (Silva del Rio et al, 2009
2009))
http://www.weeklytimesnow.com.au/article/2011/08/25/372481_back-paddock.html
Presentación
Monocigotas o heterocigotas (Gnemmi, 2006
2006))
Monocigotas:
Monocigotas: 1,1- 4% (Gnemmi, 2011
2011),
), menos del 5%
del total de gemelos en bovinos (Silva del Rio et al
al..,
2006,, citado en DesCôteaux et al
2006
al.., 2010
2010))
El 9696-99 % de las gestaciones gemelares son
heterocigotas
Mellizos Monocigotas
1: Cuerpo lúteo; 2: Embriones (DesCôteaux et al., 2010)
Mellizos Heterocigotas
Ipsilaterales. 1: Cuerpos lúteos; 2: Embriones
(DesCôteaux et al., 2010)
Diagnóstico
Palpación Rectal:
Rectal: baja sensibilidad
Day et al
al.. 1995,
1995, reportaron una sensibilidad del
49,
49,3 %
La evaluación manual es imposible cuando es llevada
a cabo a los 3030- 45 días, casi inútil (y siempre muy
casual) a los 4545- 60 días de gestación (Gnemmi,
2006))
2006
Diagnóstico
Ecografía Transrectal proporciona una mayor
sensibilidad (Davis y Haibel, 1993;
1993; Dobson et al
al..,
1993;; McMillan et al
1993
al.., 1994;
1994; Gnemmi, 2006)
2006)
Gnemmi 2008
Momento del Diagnóstico
Echternkamp y Gregory 1991;
1991; Davis y Haibel 1993
1993;; Dobson et
al
al.. 1993,
1993, citados por Fricke,
Fricke,2002
2002,, sugieren 40 a 55 días
después de la IA, sin mejoras en la precisión en fechas
posteriores
Davis y Haibel 1993
1993,, citado en Kirkpatrick 2002
2002,, la
sensibilidad entre los 49 a 55 días de gestación fue de 93%
93%
McMillan et al
al.. 1994,
1994, citado en Kirkpatrick 2002
2002,, menor
precisión (40 a 62%
62%) a los 45 o 60 días de gestación, lo que en
parte refleja una mayor tasa de pérdidas embrionarias y/ o
fetales en este trabajo
Echternkamp y Gregory 1991,
1991, citado en Kirkpatrick, 2002
2002,,
informan de una mayor precisión (65%
65%) en los 46 a 79 días de
gestación vs.
vs. 28 a 45 días (57%
57%)
Momento del Diagnóstico
Es útil saber si la vaca está preñada después de los
2525- 28 días del servicio, pero es indispensable
saberlo entre los 28 y 30 días
días.. Estos datos permiten
inferir si se produjo la muerte del embrión durante
la gestación temprana, por un lado, y la vacuidad del
vientre por el otro (Gnemmi, 2006
2006))
Dificultad en la realización del diagnóstico después
de los 80 días de gestación
Momento del Diagnóstico
En otros casos, la detección de fetos múltiples es
llevada a cabo por el veterinario generalmente al
mismo tiempo que la determinación del sexo del
feto, después de los 57 días de gestación (Stroud,
1994))
1994
Gnemmi 2008
Diagnóstico
Ovarios
Presencia de cuerpo lúteo:
lúteo: único o varios
Gnemmi 2008
Dos o más CL
CL:: excelente indicador de las vacas con
mayor riesgo de concepción de mellizos
50%
50% de las gestaciones que se caracterizan por
presentar dos CL corresponden a mellizos
Diagnóstico
Útero
La longitud total de ambos cuernos uterinos deben
ser escaneados
Presencia de uno o más embriones:
embriones: SOLO su
identificación permite establecer con certeza que la
vaca está preñada
Puede revelar mayor cantidad de fluido de lo previsto
para la etapa de la gestación
Gestación de 43 días de vida
Bilateral. La membrana amniótica del cuerno uterino izquierdo es visible en
la imagen de los mellizos en el cuerno uterino derecho (puntas de flecha
blanca). 1: Embriones; 2: Amnios; 3: Líquido alantoideo (DesCôteaux et al.
2010)
Mellizos Monocigotas
Twin, gravidanza gemellare.flv
Gnemmi 2009
Mellizos Heterocigotas
Twin, gravidanza gemellare2.flv
Gnemmi 2009
Diagnóstico
Si la presencia de mellizos es confirmada < día 55,
55, es
importante hacer otro examen entre los 60 y 90 días
para determinar el sexo de los fetos y adoptar medidas
de manejo de acuerdo a los resultados
Gnemmi 2008
"Twin--line” (línea de mellizos)
"Twin
Membrana corioalantoidea doble compartida
entre fetos
No confundir con membranas amnióticas que
aparecen como un círculo alrededor de cada
feto
No siempre es vista, pero cuando se visualiza
está indicado un examen exhaustivo en busca
de mellizos (DesCôteaux et al
al.. 2010)
2010)
"Twin--line” (línea de mellizos)
"Twin
Vesículas amnióticas (en azul), alantoideas (en amarillo) y
membrana corioalantoidea compartida (flechas negras) (Cortesía
(Cortesía
de The Drost Project, DesCôteaux et al. 2010)
Gestación de 26 días de vida
1: Embrión; Flecha roja: Línea de mellizos
(DesCôteaux et al. 2010)
Gestación de 39 días de vida
Ambos cuernos uterinos. 1: Embriones; 2: Amnios; 3: Líquido
alantoideo; 4: Línea de mellizos (Twin line)
(DesCôteaux et al. 2010)
Consecuencias
Anastomosis de los vasos sanguíneos
coriónicos, compartiendo un suministro
común de sangre (Echternkamp, 1992
1992)):
1) Síndrome de Freemartin
http://wisecreatures.blogspot.com/2010/10/freemartin.html
2) Aumento de la mortalidad embrionaria/
fetal
Consecuencias
Proporción de sexos [machos (M), hembras
(H)]:: 53,
(H)]
53,3 % M y 46,
46,7 % H para terneros
únicos, y 30,
30,1 % MM, 43,
43,6 % MH, y 26,
26,3 % HH
para terneros mellizos (Silva del Río et al
al..
2007))
2007
Gnemmi 2006
Muerte embrionaria/ fetal
Alta tasa en mellizos unilaterales (López
(López-- Gatius, citado en
Colloton 2010)
2010)
Cuando un feto en una misma unidad placentaria muere, el otro
feto por lo general, también lo hace (Echternkamp 1992
1992))
Un solo feto:
feto: 6,2 % abortó antes del parto, 92,
92,2 % produjo una
sola cría y unas pocas vacas diagnosticadas incorrectamente,
dieron a luz mellizos
Gestaciones dobles:
dobles: 12,
12,2 % abortó durante la gestación, 4,6 %
dio a luz a una sola cría (posibles errores de diagnóstico) y 81,
81,8
% dio a luz mellizos (Echternkamp y Gregory 1999)
1999)
Muerte embrionaria/ fetal
Pérdida de la gestación o reducción embrionaria fue
mayor para las vacas diagnosticadas con gestación
doble que única (OR = 3.6), resultando en una tasa
de supervivencia de los embriones de 91,
91,9 % para las
vacas diagnosticadas con un solo embrión frente a
75,
75,5 % de las vacas diagnosticadas con gestaciones
de mellizos
Época de cría y la producción de leche se asociaron
con la pérdida de la gestación para las gestaciones
únicas, mientras que el número de CL se asoció
negativamente con la reducción embrionaria y la
pérdida de la gestación para las dobles (Silva del Rio
et al, 2009)
2009)
Muerte embrionaria/ fetal
En gestaciones de trillizos, aumento significativo de
la mortalidad embrionaria/ fetal
fetal:: 50,
50,0 % abortó
durante la gestación, 29,
29,4 % produjo mellizos y 32,
32,1
% trillizos (Echternkamp y Gregory 1999)
1999)
http://www.weeklytimesnow.com.au/article/2011/08/25/372481_back-paddock.html
Muerte embrionaria/ fetal
40,
40,8 % mellizos bilaterales, 59,
59,2 % unilaterales
Muerte de un solo embrión:
embrión: 16,
16,6 % de las vacas
94,
94,3 % de los casos, la detección en el momento del
diagnóstico de gestación
10,
10,4 % de los animales, entre la primera y cuarta semana
después del diagnóstico de gestación múltiple
6,2 % del número total de animales siguieron con la gestación
de un solo embrión
Muerte del embrión antes de los 90 días de gestación (69 ± 14
días) en 24,
24,2 % de los casos
casos:: en 8 % de ellos, los mellizos
fueron bilaterales, mientras que en el 35,
35,2 % fueron
unilaterales (32,
32,4 % y 39,
39,2 %, del lado derecho e izquierdo,
respectivamente)
Muerte de un solo embrión fue significativamente menor (P =
0,02)
02) en gestaciones dobles bilaterales (9,3 %), en
comparación con gestaciones dobles unilaterales (21,
21,6 %)
(López--Gatius et al
(López
al.. 2005,
2005, citado en Gnemmi 2006)
2006)
Exámenes de control o re chequeo
A los 60 días de gestación
gestación:: son más críticos para los
mellizos que para las gestaciones únicas
Tasa de pérdida contralateral de los mellizos desde el
primer examen a los 36 a 42 días hasta el re chequeo a
los 90 días
días:: 8 %, 32 % en mellizos ipsilaterales
Uno de los fetos se perdió en 6,2 % de los casos y el
segundo feto sobrevivió (Lopez
(Lopez–– Gatius y Hunter 2005
2005,,
citado en DesCôteaux et al
al.. 2010)
2010)
Si el sobreviviente es una hembra y el que murió era un
macho, existe la posibilidad de freemartinismo, sobre
todo si el macho se perdió después de los 42 días de vida
(período embrionario) (DesCôteaux et al
al.. 2010)
2010)
Exámenes de control o re chequeo
En gestaciones únicas:
únicas: 3,7 % fueron diagnosticados
con un embrión no viable en el primer examen y el
4,6 % de los diagnosticados con un embrión viable
sufrió la pérdida antes del segundo examen
11,
11,2 % con mellizos experimentaron una reducción de
un solo embrión, 13,
13,3 % perdió los dos embriones
(Silva del Rio et al
al.. 2009
2009))
Mellizos de 30 días de vida
Embrión de la derecha: normal. Izquierda: degradado y muerto.
Gestación de alto riesgo, debe ser rechequeada en la próxima
visita (DesCôteaux et al. 2010)
1 Mellizo muerto
Colloton 2006, citado en The Drost Project
Mellizos-- 54 días de vida
Mellizos
Examen de re chequeo. Aspecto nublado del líquido amniótico y
ausencia de definición fetal. Normal a la Palpación Rectal
(DesCôteaux et al. 2010)
Mortalidad de terneros
Según Silva del Río et al
al.. 2007
2007,, fue
mayor después de los nacimientos de mellizos,
con el 28,
28,2 % incluyendo uno o dos terneros
muertos, en comparación con el 7,2 % de
nacimientos únicos (OR = 6,5)
Gnemmi, 2006
http://www.drostproject.org/en_bovrep/10-46/_item10.html
Discusión
La gestación de mellizos tiene un impacto muy diferente según
los autores (Gnemmi 2006
2006)) pero todos coinciden en la
importancia del diagnóstico precoz y preciso
Parece haber una correlación positiva directa entre la tasa de
mellizos y la producción de leche, aunque el mecanismo es
incierto en este momento para algunos autores (Day et al
al..
1997,, Fricke y Wiltbank 1999
1997
1999))
Hipótesis:
Hipótesis: elevación en la producción de leche aumenta el
metabolismo esteroide
Palpación Rectal proporciona baja sensibilidad
Ecografía Transrectal proporciona una mayor sensibilidad
(Davis y Haibel 1993
1993,, Dobson et al
al.. 1993,
1993, McMillan et al
al.. 1994,
1994,
Gnemmi 2006)
2006)
Discusión
Los diferentes investigadores
momento del diagnóstico
difieren
en
el
Según Gnemmi 2006,
2006, debe ser lo más precoz posible
Es necesario monitorear las gestaciones de mellizos
con por lo menos dos exámenes entre el primer
diagnóstico y el día 90 post
post-- servicio (Gnemmi 2006
2006))
Discusión
Importante problema de manejo en el ganado lechero,
entre otros, por el aumento de la mortalidad embrionaria
en relación con ella.
ella. Algunos autores creen que la
mortalidad embrionaria en estos casos, sería más tardía
que en el curso de las gestaciones únicas (Lopez(Lopez- Gatius
et al
al.. 2004,
2004, citado en Gnemmi 2006)
2006)
El número de CL se asoció negativamente con la reducción
embrionaria y la pérdida de la gestación de mellizos
El riesgo de mellizos y de doble ovulación aumentó con los
días en leche (DIM) y fue mayor para las vacas
diagnosticadas con quistes en los ovarios y que carecen
de un CL al inicio de un protocolo Ovsynch (Silva del Rio
et al
al.. 2009)
2009)
Discusión
Mayor información en relación a posición
intrauterina,
restricciones
del
crecimiento,
vasculatura, muerte del co
co-- mellizo, para poder
tener mejor comprensión, mejor atención pre
pre-- parto,
mejorar el tratamiento de las anomalías y maximizar
la producción ganadera (McCarter y Shoemaker
2006))
2006
Influencia de las líneas paternas
paternas:: pares de
cromosomas implicados serían el número 5, 7, 19 y
23 (Komisarek y Dorynek 2002,
2002, citado en Gnemmi
2006))
2006
Producción de Carne
Línea Twinner (United States Meat Animal Research
Centre, Nebraska, USA):
USA): en 30 años ha logrado
alcanzar 50 % de taza de mellizos en su rodeo de
investigación de gran tamaño (Echternkamp y
Gregory 2002)
2002)
Espera una valoración económica de su producción
El aumento de la mortalidad embrionaria/ fetal y de
terneros en gestaciones de trillizos cuestiona la
posible aplicación en el ganado bovino (Echternkamp
y Gregory 1996)
1996)
Últimas tecnologías disponibles
Ultrasonido Color Doppler: evaluación del útero
(Herzog y Bollwein 2007, citado en Medana y Abd
El
El--Atyb 2010) y flujo sanguíneo en el diagnóstico de
quistes ováricos (Rauch et al. 2008, citado en
Medana y Abd ElEl-Atyb 2010)
Ultrasonido tridimensional: en la especie equina para
examinar el tracto reproductivo (MacEachern et al.
2002, citado en Medana y Abd ElEl-Atyb 2010)
Ultrasonido en cuatro dimensiones: imágenes en tres
dimensiones en tiempo real (Medana y Abd ElEl-Atyb
2010)
Últimas tecnologías disponibles
Ecografía Doppler de la arteria uterina derecha en una vaca, 7 días despues de IA (gentileza
de Bollwein, citado en Gnemmi 2008)
Impacto
El conocimiento precoz de la gestación múltiple
permite redimensionar la entidad del problema de la
"mortalidad embrionaria/ fetal"
La muerte embrionaria (de uno o de los dos
embriones) se produce antes del diagnóstico de
gestación (3535-45 días), y la vaca es considerada
"problema", ya que no está preñada, pero en
realidad, la vaca se había preñado normalmente, pero
luego puso fin a su gestación debido a la presencia
de mellizos
Impacto
Reduce el uso de programas de sincronización de
celos y/ u ovulaciones en rodeos de leche
leche:: permite
prevenir problemas que hacen que este tipo de
gestación sea "no deseada” (Gnemmi 2006
2006))
La
identificación
temprana
permitirá
la
implementación
de
estrategias
de
manejo
diferencial para disminuir los efectos negativos de
los mismos (Fricke 2002
2002))
Manejo
Varios escenarios incluyendo refugo, aborto
y vuelta al servicio, o continuo monitoreo
hasta el parto (Fricke 2001
2001))
El refugo para evitar el continuo manejo de
una vaca gestando mellizos es mejor
alternativa que abortar la gestación
Producción de Leche
La mayoría de los problemas se pueden
atenuar mediante la intensificación del
manejo de estas vacas
El parto se prevé:
prevé: secar estas vacas con
anterioridad a la fecha programada, se
adelanta el período de transición
Reducir los problemas metabólicos y
asegurar que la vaca será atendida de
manera adecuada antes, durante y después
del parto
Producción de Leche
Metritis y Piómetra, a veces pueden ser
inevitables, la mayoría de los casos pueden
evitarse con limpieza y saneamiento de las
instalaciones donde ocurre el parto (Pursley
2006))
2006
Asegurar la pronta atención obstétrica
reducirá los efectos de la distocia y la
incidencia de muerte fetal (Bostedt 1982
1982,,
citado en Bottarelli 1989
1989,, citado en Gnemmi
2006))
2006
Impacto
Según Echternkamp et al
al.. 1999,
1999, citado en
Gnemmi 2006,
2006, los índices reproductivos de
vacas que hayan parido una sola cría son
mejores que los de las vacas que han tenido
una gestación de mellizos
mellizos:: más corto el
período parto
parto-- 1° celo (P <0,01)
01) y mayor tasa
de preñez
Fricke 2007
Producción de Carne
Nuevo paradigma:
paradigma: ofrece la oportunidad de
aumentar tanto su eficiencia reproductiva
como económica
La mayoría de los productores no están
preparados para hacer frente a las
complicaciones
Impacto
Ya existen en Australia, Canadá, Reino Unido,
Estados Unidos y Nueva Zelanda rodeos comerciales
productores de mellizos, para aumentar y
eficientizar la producción de carne por hectárea
Se pueden lograr más terneros y mayor producción
de carne/ vaca y / kg
kg.. de alimento requerido y / ha
ha..,
y se disminuyen las emisiones de gases al ambiente/
producto y / hectárea
Se necesitan menos vacas por unidad económica para
tener la misma producción de carne (Miller 2009
2009))
Impacto
El freemartinismo es más un problema percibido
que uno real
real:: aunque el % de reducción de las
hembras con fines reproductivos existe, el número
total de hembras fértiles diferirá en forma muy
pequeña de un sistema de nacimiento único
(Kirkpatrick 2002
2002))
Bell, Hunter 1779, citado en McCarter y Shoemaker 2006
Manejo
Diagnóstico de gestación precoz para
determinar gestaciones únicas vs múltiples,
contar con instalaciones adecuadas para el
parto y adelantar el destete
http://www.redbubble.com/people
/louisegreen/art/3515913rachael-and-her-twins
Conclusiones
Producción de Leche
Representa un problema
Tendencia de aumento en el tiempo
Cambio en los factores causales asociados
para revertir este proceso
Producción de carne
Posible medio para mejorar en forma
impactante su eficiencia de producción
Conclusiones
Su detección temprana le permite al
productor tomar una serie de decisiones
sobre el futuro reproductivo y productivo
del animal
Reducir al mínimo las pérdidas, en un
problema que es poco controlable y
predecible
Diagnóstico lo más precoz posible y
monitoreo
mediante
Ultrasonido,
instrumento eficaz y práctico para el
diagnóstico de las gestaciones múltiples en el
bovino
Conclusiones
Obtener mayor cantidad y calidad de
información acerca de los sucesos que
ocurren durante el transcurso de las mismas,
permitiendo la adopción de medidas de
manejo tendientes a reducir los impactos
negativos que las mismas ocasionan en la
producción de leche, y a maximizar los
beneficios potenciales que pueden acarrear
en la producción de carne
Conclusiones
El uso efectivo de la Ecografía puede mejorar
significativamente la eficiencia reproductiva y la
rentabilidad general de los establecimientos
ganaderos
http://www.ars.usda.gov/Main/docs.htm?docid=16944
Muchas gracias!!!