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1 NO SALE A ~31.5233 DOMICILIO C&5 UNIVERSIDAD NACIONAL DE LA AMAZONIA PERUANA Escuela de Postgrado "José ~orres Vásquez" Programa de Doctorado en Ambiente y Desarrollo Sostenible Nivel de expresión genética de la L-Galactono-1,4-lactona deshidrogenasa y su relación con el contenido de vitamina e· en Myrciaria duhia (HBK) McVaugh "camu camu" Autora: Marianela Cobos Ruiz Tesis para obtener el Grado Académico de Doctor con mención en Ambiente y Desarrollo Sostenible IQUITOS- PERÚ t.)l)NADO POR: 2013 RESUMEN El principal objetivo de esta investigación fue determinar el nivel de expresión del gen que codifica la enzima L-Galactono-1,4-lactona deshidrogenasa y su relación con el contenido de vitamina C en M dubia. Las hojas y frutos maduros fueron obtenidos de la Colección de Germoplasma del Instituto Nacional de Innovación Agraria. El contenido de vitamina C se determinó mediante Cromatografia Líquida de Alta Performancia y la expresión relativa del gen mediante reacción en cadena de la polimerasa en tiempo real. El contenido de vitamina C de los frutos mostró variación (650 a 2529 mg vitamina C/100 g pulpa). Asimismo, el contenido de vitamina C de la cáscara fue mayor que en pulpa u hoja (F = 363, df = 2, p < 0,001). También, el gen MdGalLDH mostró expresión diferencial en los tres tejidos mencionados (F= 97, df= 2,p < 0,001). Adicionalmente, este gen presentó hasta 3 veces más expresión en plantas productoras de alto contenido de vitamina C que en aquellas que producen menos (prueba t de Student = 3,24, df = 4, p = 0,032). En conclusión, las plantas de M dubia de la colección de germoplasma del lNlA presentan frutos con una amplia variación en su contenido de vitamina C, el cual se debe, en parte, a la expresión diferencial del gen MdGalLDH que participa en la biosíntesis de esta vitamina. Palabras clave: vía Smimoff-Wheeler, biosíntesis de vitamina C, ácido L-ascórbico, expresión de genes. 9 ABSTRACT The main objective of this study was to determine the expression leve! of the gene encoding the enzyme L-Galactono-1,4-lactone dehydrogenase and its relation to the content ofvitamin e in M dubia. Leaves and ripe fruits were obtained from the Instituto Nacional de Innovación Agraria Germoplasm eollection. Vitamin e content was determined by High Performance Liquid ehromatography and the relative gene expression by real time polymerase chain reaction. Vitamin e content of fruits was variable (650-2529 mg vitamin e/100 g pulp). In addition, vitamin e content of the peel was greater than that contained in the pulp or leaves (F = 363, df= 2,p < 0.001). Also, MdGalLDH showed differential expression in the three tissues (F = 97, df = 2, p < 0.001). Gene expression was up to 3x greater in plants producing high level ofvitamin e than those producing low levels (Student t-test = 3.24, df= 4, p = 0.032). In conclusion, M dubia plants from the INIA germoplasm collection contained fruits with a wide variation in vitamin e content, due in part, to differential MdGalLDH expression. Keywords: Smimoff-Wheeler pathway, vitamin e biosynthesis, L-ascorbic acid, gene expression. 10