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Uso veterinario Kit de diagnóstico para la detección de anticuerpos contra el virus de la Enfermedad Infecciosa de Fabricio (Gumboro) (IBD). La enfermedad infecciosa de la bolsa de Fabricio (Gumboro) (IBD) es una enfermedad viral aguda altamente contagiosa que afecta a los pollos jóvenes. Ésta es una de las enfermedades más importantes desde el punto de vista económico que afectan a los pollos comerciales.1 La enfermedad clínica en pollos aparece a las 3 semanas de edad y se manifiesta en forma de bolsas inflamadas (y en ocasiones hemorrágicas), después de lo cual se presenta regresión de la bolsa, inmunosupresión y con frecuencia mortalidad. La IBD también puede manifestarse como una enfermedad subclínica en la cual la inmunosupresión se vuelve evidente cuando las aves se vuelven más susceptibles a otros agentes infecciosos.2 Niveles elevados de anticuerpos maternos contra IBD que son pasados de la gallina al polluelo ayudan a brindar a los pollos jóvenes protección pasiva contra las variedades de campo de la IBD. El anticuerpo contra IBD presente en el suero de gallinas o pollos puede ser medido a través de un ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA).3 El kit de ELISA ProFLOK® IBD es una prueba serológica rápida y específica para la detección del anticuerpo contra IBD en muestras de suero de pollo. El kit fue desarrollado principalmente para ayudar en la detección de los niveles de anticuerpos contra IBD presentes antes y después de la vacunación en pollos. El kit de ELISA ProFLOK® IBD también es útil en el desarrollo y la evaluación de programas de vacunación. Características y beneficios • Altamente específico para la detección de anticuerpos contra el virus de la IBD incluyendo a cepas clásicas y variantes4 • Buena correlación (r2 = 0.55) con la prueba de neutralización de virus (VN) para IBD5 • Excelente coeficiente de variación (CV) entre pozo y pozo, y entre placa y placa que demuestra una reproducibilidad constante con diferentes lotes a través del tiempo • Autorizado por el Departamento de Agricultura de los EUA (USDA) • Vida de anaquel prolongada de 24 meses para un fácil manejo de inventarios Desempeño del kit Especificidad 4 El kit de ELISA ProFLOK® IBD ha demostrado excelente especificidad para anticuerpos contra IBD, pero no reacciona significativamente con los anticuerpos contra otros patógenos aviares examinados. El kit también fue evaluado utilizando un panel de sueros monoespecíficos preparados contra cepas estándar y variantes del virus de la IBD. Tabla 1: Especificidad evaluada utilizando sueros monoespecíficos contra diferentes cepas estándar y variantes del virus de la IBD 4 ANTISUERO ELISA para ProFLOK® IBD VALOR DEL COCIENTE MUESTRA/CONTROL POSITIVO (SP) ESTATUS DE ANTICUERPOS Variante Indiana Variante MD Variante GLS Variante E/Del Lukert (clásico) 0.323 1.245 0.846 0.791 0.314 Positivo Positivo Positivo Positivo Positivo Edgar (clásico) 0.044 Negativo Sueros monoespecíficos preparados contra cepas estándar y variantes del virus de la IBD obtenidas de la Universidad de Delaware y de la Universidad Estatal de Ohio. 1/2 Uso veterinario Sensibilidad 5 El kit de ELISA ProFLOK® IBD demostró buena sensibilidad en comparación con la prueba de VN para IBD convencional (r2 = 0.55). Un panel de sueros con títulos conocidos de anticuerpos contra IBD por VN (títulos de 290 a 10,240) fue examinado con el kit de ELISA ProFLOK® IBD para detectar anticuerpos contra el virus de la IBD. Tabla 2: Comparación entre los títulos de anticuerpos del ensayo ELISA para ProFLOK® IBD y los títulos de anticuerpos contra IBD por VN MUESTRA DE SUERO A B 1 2 3 TÍTULO DE ANTICUERPOS POR ELISA A PARA ProFLOK® IBD 389 806 1,225 TÍTULO DE ANTICUERPOS B CONTRA IBD POR VN 290 580 2,560 4 1,316 10,240 Los valores son la media de 15 muestras. Prueba de VN para IBD realizada por la Universidad de Maryland, 100 TCID50. Reproducibilidad 5 Un estudio demostró que el kit de ELISA ProFLOK® IBD presenta niveles elevados de reproducibilidad entre placa y placa. Tabla 3: Resumen de variabilidad de placas de un lote B DENSIDAD ÓPTICA (OD) GLOBAL DE LAS RANGO DE OD A PLACAS 0.639 0.385 - 0.786 A B C %CV C 6.84 El valor es la media de 11 placas de ELISA. Los valores son el valor mínimo y el valor máximo de OD encontrados para los sueros positivos para IBD en 11 placas. El valor es la media del %CV combinado de 11 placas. Interpretación de los resultados Los valores de títulos de anticuerpos obtenidos mediante el ensayo ProFLOK® IBD representan una comparación entre el nivel de anticuerpos contra IBD presente en cada muestra de campo de suero de pollo examinada y los sueros de control (normal y positivo) del kit de ELISA ProFLOK® IBD. Por lo tanto, es importante determinar en primer lugar que los valores obtenidos para los sueros de control (normal y positivo) del ensayo de ProFLOK® IBD sean válidos de la manera detallada en la sección “Valores de los controles del ensayo” del folleto de instrucciones antes de interpretar los resultados obtenidos con el kit de ELISA ProFLOK® IBD. El umbral del valor SP separa claramente a las muestras positivas de las muestras negativas. Una muestra negativa es una muestra que no es significativamente diferente del suero de control normal. El umbral del valor SP para el kit de ELISA ProFLOK® IBD es el siguiente: VALOR SP ≤0.180 RANGO DE VALORES DEL TÍTULO DE ANTICUERPOS DETERMINADO POR ELISA PARA ProFLOK IBD 0 ≥0.181 554 y superiores Contenido del kit Contenido: 960 pruebas (diez placas de 96 pozos) Referencias: 1 Lasher H, Shane SW. Infectious Bursal Disease. World’s Poultry Science Journal 1994;50(2):133-166. 2 Eterradossi N, Saif YM. Infectious bursal disease. In: Saif YM, et al., eds. Diseases of Poultry. 12th ed. Ames, Iowa: Iowa State Press, Blackwell Publishing, 2008;185-208. 3 Snyder DB, Marquardt WW, Mallinson ET, Savage PK, Allen DC. Rapid serological profiling by enzyme-linked immunosorbent assay. III. Simultaneous measurements of antibody titers to infectious bronchitis, infectious bursal disease, and Newcastle disease viruses in a single serum dilution. Avian Dis 1984;28(1):12-24. 4 Datos en archivo, Reporte de Estudio de Eficacia, 3 de noviembre de 1997, Zoetis Inc. 5 Datos en archivo, Reporte de Estudio de Eficacia, 6 de junio de 1987, Zoetis Inc. ProFLOK® IBD es una marca propiedad de Zoetis Inc., o alguna subsidiaria. www.kitsdediagnosticozoetis.com 2/2